培养基及常用器皿的灭菌方案设计.doc

生物工艺课程单元教学设计- 培养基及常用器皿的灭菌方案设计一、教案头本次课标题：培养基及常用器皿的灭菌方案设计授课班级略上课时间4课时上课地点略教学目标能力目标知识目标素质目标1、能针对不同的器皿选择合适的灭菌方法。2、能够进行培养基的灭菌处理1、掌握常用的灭菌方法及适用范围。2、掌握培养基灭菌的方法及灭菌效果的检验方法。1、具备一定沟通能力2、团队协助能力3、培养实验素质能力训练任务及案例训练任务：1、每组汇报制定的常用器皿的灭菌方案。2、各组示范一种灭菌方法。3、各组将指定的器皿和培养基灭菌。成果1、实验室器皿和培养基的灭菌方案。2、各种器皿灭菌后经无菌检验合格。3、培养基灭菌后经无菌检验合格。参考资料工业微生物学实验、氨基酸发酵工艺学、生化工艺学、南京化工职业技术学院生化社团培训资料二、教学设计项目背景：“南化生物公司”由于建设初期人员比较紧张，故招收了一些临时工，这些工人主要负责实验室常用器皿的灭菌和培养基等灭菌，现在需要对这些员工进行培训，请各小组拟定一个培训计划。要求培训后这些员工能够独立完成实验室的所有灭菌工作。第一步：各组汇报编制的培训方案 35分钟 1、实验室常用仪器及器皿的清洗及包扎方法； 2、各种器皿的灭菌方法及操作注意事项； 3、培养基灭菌方法 4、灭菌锅使用说明及操作注意事项； 5、灭菌后培养基无菌检验方法；第二步：讨论：1、玻璃器皿灭菌方法主要有哪些？ 20分钟 -干热灭菌和湿热灭菌 2、培养基能否用干热灭菌？ -不能，其中水分会流失 3、火焰灼烧法适用哪些器材灭菌？ -接种环 涂布棒 接种针等小型器皿 4、哪种灭菌方法最好？ -火焰灼烧法 但是适用面窄 5、玻璃器皿灭菌为什么用牛皮纸包扎？ -防止拿出后有微生物沉降到表面 6、吸管灭菌要注意什么？ -吸头要加棉花，但是不能塞的过紧第三步：总结培养基及常用器皿的灭菌方法 20分钟 1、常见灭菌方法 -化学灭菌法 射线灭菌法 干热灭菌法 湿热灭菌法 过滤除菌法 灼烧灭菌 2、常用的化学灭菌剂有哪些？ -KMnO4:0.1%0.25% 皮肤消毒 -漂白粉：2%5% 环境消毒 -乙醇：70%75% 皮肤消毒 器皿消毒 -石碳酸：1%5% 桌面消毒 浸泡衣物 空间环境消毒 -甲醛：1%2% 空气消毒 （1015mL/m3）熏蒸4h -铵盐（新洁尔灭）：0.10.2% 皮肤、器具、环境消毒 3、射线灭菌的有效波长。 -260nm 4、干热灭菌原理及适用范围 -加热使微生物体内的蛋白质变性，电解质浓缩，引起中毒导致微生物死亡 -160170 11.5h -适用于要求保持干燥的实验器具和材料 5、湿热灭菌原理及应用 -利用饱和蒸汽释放的热能，使蛋白质、酶及核酸分子内部化学键破坏，引起不可逆的变性，导致微生物死亡。 -121，30min 6、过滤除菌适用范围 -适用于澄清流体除菌。 7、火焰灼烧法 -适用实验室小型器皿灭菌（接种针、接种环、涂布棒等） 8、培养基灭菌的理论基础。第四步：讨论各组项目报告中的问题。 15分钟 -器皿的包扎方法 -灭菌锅的使用手册 -干热灭菌注意事项第五步：项目方案实施（实验室操作） 75分钟 1、实验室常用器皿的包扎 2、各种器皿的灭菌方法（玻璃器皿、枪头等） 3、培养基的灭菌（各组将配制的培养基灭菌，主要要求掌握灭菌锅的使用方法） 4、将灭菌过的培养基于35培养24h，检验是否灭菌彻底。第六步：总结点评，提出问题 10分钟 -灭菌锅是不是通过温度计来控制温度的？ 是通过压力表来控制压力的 -灭菌锅使用时的注意事项 不能离人 防止“假压”出现（排除锅内的冷空气） -培养