PCNA在子宫内膜癌组织中的表达及意义.doc

PCNA在子宫内膜癌组织中的表达及意义【关键词】 子宫内膜摘要:目的 探讨增殖细胞核抗原（PCNA）在子宫内膜癌中的表达及临床意义。 方法 采用免疫组织化学技术对23例子宫内膜癌及26例正常绝经期子宫内膜中PCNA表达水平进行检测。每例切片3张，厚度4m，分别进行HE染色及PCNA测定。 结果 PCNA在子宫内膜癌中的表达明显高于正常绝经期子宫内膜（P0.01），与子宫内膜癌组织学分级和手术分期相关。 结论 PCNA的表达与子宫内膜癌的生物学行为有关，PCNA指数可作为预测子宫内膜癌预后的指标。 关键词:子宫内膜;肿瘤;增殖细胞核抗原Expression of PCNA in endometrial carcinomas.XU Yong-zhong，DENG Ying.（Zhangjiajie Municipal Peoples Hospital，Zhangjiajie427000，Hunan，P.R.China） Abstract:Objective To investigate the expressions and effect of proliferating cell nuclear antigen（PCNA）in human endome-trial carcinoma. Methods Immunohistochemistry was used to detect the expression of PCNA in23cases of endomtrial carcino-ma.and26normal endometrial tissues. Results Expression of PCNA in endometrial carcinoma was higher than that in normal en-dometrial tissues（P0.01）was associated with the histological grading and surgical staging of endometrial carcinoma.With the in-crease of tumour grade and staging，the PCNA index increased. Conclusion PCNA may be involved in the carcinogenesis of en-dometrial carcinoam.PCNA index can be useful prognosticators of endometrial carcinoma. Key words:Endometrial;Carcinoma;PCNA 增殖细胞核抗原（Proliferating cell nuclear antigen，PCNA）又称周期素，其表达合成与增殖细胞的增殖周期有关，其量的变化与DNA合成一致 1 。本研究应用免疫组化技术对子宫内膜癌组织进行PCNA检测，探讨PCNA的表达与子宫内膜癌生物学行为的关系。1 材料及方法 1.1 标本来源 子宫内膜癌标本23例，取自1998年11月2004年1月在张家界市人民医院诊刮确定为子宫内膜癌患者，其平均年龄（646）岁。正常绝经期子宫内膜26例，取自绝经期子宫脱垂行子宫切除及绝经期出血行诊刮内膜病理检查正常者，平均年龄（594）岁，无性激素应用史。全部标本经4%多聚甲醛固定，石蜡包埋，5m连续切片。 1.2 试剂及免疫组化方法 小鼠抗人单克隆抗体PCNA（PC10）及SP免疫组化试剂盒购自福州迈新生物制品有限公司，按试剂盒说明书操作，用PBS代替抗作阴性对照，已知子宫内膜癌阳性切片作阳性对照。免疫组化步骤如下:切片脱蜡至水。蒸馏水新鲜配置3%H 2 O 2 室温510min灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。微波修复抗原:将切片浸入0.01M枸橼酸盐缓冲液，pH6.0，微波炉加热至96100，持续2030min，冷却后进行下一步。滴加抗原修复液，室温10min。蒸馏水洗3次。滴加正常血清封闭液，室温20min。去掉多余液体，不洗。滴加适当稀释的PCNA，室温120min。0.01M PBS洗2min3次。滴加生物素化山羊抗小鼠IgG，2020min，0.01M PBS洗2min3次。滴加试剂SABC，2020min，0.01M PBS洗5min4次。DAB显色。苏木素轻度复染。脱水、透明、封固。显微镜观察 1，2 。 1.3 结果判断 免疫组化染色阳性反应为棕黄色、黄色，PCNA定位于细胞核。PCNA用增殖指数（Prolif-erative index，PI）表示，PI是指PCNA阳性细胞占肿瘤细胞的百分率，并将之分为四级，1%25%为级，26%50%为级，51%75%为级，75%为级。其中级为弱阳性，级为强阳性。 1.4 统计学处理 实验数据均采用卡方检验进行统计学分析。 2 结果 正常绝经期子宫内膜中可见部分细胞呈PCNA的低水平表达，子宫内膜癌则是肿瘤组织中癌细胞胞核中有表达，PCNA的阳性表达率分别为26.9%及86.9%，其详细表达情况见表1。表1 子宫内膜组织中PCNA的表达（略） 注:经统计学检验，PCNA在子宫内膜癌中的表达与在正常绝经期子宫内膜中的表达相比P值0.01，差异有极显著性。 3 讨论 子宫内膜癌是最常见的妇科恶性肿瘤，但其发生机制目前尚不清楚。近年来研究表明，细胞周期失控是癌变的重要原因。PCNA是一种分子量为36KD的酸性核蛋白，作为DNA多聚酶的辅助蛋白在DNA复制中起重要作用。其含量在静止期细胞极少，G1后期合成增加，S期达高峰，G2/M期明显下降 2，3 。因此，PCNA含量与细胞的增殖状态密切相关，可作为反映肿瘤细胞增殖程度和预后判断的指标 3，4 ，PCNA阳性染色在细胞核内呈细颗粒状或弥漫型，核仁为强阳性。这种反应代表与复制位点相关的，主要用于肿瘤的诊断，病情监测及预后评估。本研究应用单克隆抗体PC10测定子宫内膜癌中PCNA的表达率，发现PC-NA在子宫内膜癌中的表达明显高于正常绝经期子宫内膜。因此，PCNA的阳性表达与子宫内膜癌的高度 增殖生物学行为是一致的，临床应用价值很高。 PI与子宫内膜癌的组织分化程度相关，随肿瘤分级的升高而增加，组织分化程度高的肿瘤PCNA阳性细胞数少，而肿瘤组织分化程度越低，PCNA表达量越高;晚期子宫内膜癌患者PCNA指数高于早期患者。异常表达的患者，其肿瘤恶性程度高、子宫外转移的可能性大，术后应严密随访，并给予必要辅助治疗。因此，我们认为检测PCNA的表达，将有助于进一步揭示子宫内膜癌的发生发展机制，判断肿瘤的恶性程度，以指导后续治疗。参考文献: 1 Hall PA，Levison DA，Woods AL，et al.Proliferating cell unclearantigen（PCNA）immunolocalization in paraffin sections:an indexof cell prolifera-tion with evidence of deregulated expression insome neoplasmsJ.J Pathol，1990，162:285. 2林国志，赵云霞.子宫内膜癌P53蛋白和PCNA表达的相关性研究J.泰山医学院学报，2004，25（1）:46. 3Brandon DD，Erickson TE，Keenan EJ，et al.Estrogen receptor gene expres-sion in humer uterine leionyomataJ.J Clin Endoorind Metab，1995，80:19761988. 4Maryer A，Takimoto M，Fritz E，et al.The prognostic singnifi