贝诺酯片的制备.doc

贝诺酯片的制备工艺流程贝诺酯片的制备工艺：水杨酸阿司匹林贝诺酯贝诺酯片1.阿司匹林的生产方法：水杨酸乙酰化得到，在反应罐中加乙酐（加料量为水杨酸总量的0.7889倍），再加入三分之二量的水杨酸，搅拌升温，在81-82反应40-60min。降温至81-82保温反应2h。检查游离水杨酸合格后，降温至13，析出结晶，甩滤，水洗甩干，于65-70气流干燥，得乙酰水杨酸。阿司匹林学名为乙酰水杨酸,是白色晶体,易溶于乙醇,氯仿和乙醚,微溶于水.因具有解热,镇痛和消炎作用,可用于治疗伤风,感冒,头痛,发烧,神经痛,关节痛及风湿病等,也用于预防心脑血管疾病.常用退热镇痛药APC中A即为阿司匹林.实验室通常采用水杨酸和乙酸酐在浓硫酸的催化下发生酰基化反应来制取.反应式如下:水杨酸 乙酸酐 乙酰水杨酸 乙酸反应温度应控制在7580左右,温度过高易发生下列副反应:生成的阿司匹林粗品,用35%的乙醇溶液进行重结晶将其纯化.其操作流程如下:【仪器药品】锥形瓶(100mL) 量筒(10mL,25mL) 温度计(100) 烧杯(200mL,100mL) 吸滤瓶 布氏漏斗 小水泵 水浴锅 电炉水杨酸 乙酸酐 硫酸(98%) 乙醇水溶液(35%) 【实验步骤】 酰化 在干燥的锥形瓶1中加入4.3g水杨酸和6mL乙酸酐,再滴入7滴浓硫酸2,立即配上带有100温度计的塞子(温度计插入物料之中).混匀后置于水浴中加热,在充分振摇下缓慢升温至75.保持此温度反应15min,期间仍不断振摇.最后提高反应温度至80,再反应5min,使反应进行完全. 结晶抽滤 稍冷后拆下温度计.在充分搅拌下将反应液倒入盛有100mL水的烧杯中,然后冰水冷却,待结晶完全析出后,进行抽滤.用少量冷水洗涤滤饼两次,压紧抽干后转移到100mL烧杯中. 重结晶 在盛有粗产品的烧杯中加入25mL35%乙醇,置于4550水浴中加热,使其迅速溶解3.若产品不能完全溶解,可酌情补加35%的乙醇溶液.然后静置到室温,冰水冷却,待结晶完全析出后,进行抽滤.用少量冷水洗涤滤饼两次,压紧抽干.将结晶转移至表面皿中,自然晾干后称量,计算产率.【注意事项】 酰化反应时,要用手压住瓶塞,以防反应蒸气冲出.并不断振摇,确保反应进行完全. 控制好酰化反应温度,否则将增加副产物的生成. 将反应液转移到水中时,要充分搅拌,将大的固体颗粒搅碎,以防重结晶时不易溶解. 乙酸酐具有强烈刺激性,要在通风橱内取用,并注意不要粘在皮肤上.【1】若制备阿司匹林的量较大,可采用带电动搅拌器的回流装置.三颈瓶中口安装电动搅拌器,一侧口安装球形冷凝管,另一侧口安装温度计.【2】水杨酸分子内存在氢键,阻碍酚羟基的酰基化反应.反应需加热至150160才能进行.若加入少量浓硫酸,可破坏水杨酸分子内氢键,使反应温度降低到80左右,从而减少副产物的生成.【3】溶解时,加热时间不宜太长,温度不宜过高,否则阿司匹林发生水解.阿司匹林的制备方法1）称取水杨酸1.98g于锥形瓶（150mL）；在通风条件下用吸量管取乙酸酐5mL，加入锥形瓶，滴入5滴浓流酸，摇动使固体全部溶解，盖上带玻璃管的胶塞，在事先预热的水浴中加热约10-15min2水浴装置：500mL烧杯中加100mL水、沸石，用温度计控制85-90。2）取出锥形瓶，将液体转移至250mL烧杯并冷却至室温（可能会没有晶析出）。加入50mL水，同时剧烈搅拌；冰水中冷却10min，晶体完全析出3）抽滤。冷水洗涤几次，尽量抽干，固体转移至表面皿，风干。粗品精制（1）粗产品置于100mL烧杯中缓慢加入饱和NaHCO3溶液，产生大量气体，固体大部分溶解。共加入约5mL 饱和NaHCO3(aq)搅拌至无气体产生。（2）用干净的抽滤瓶抽滤，用5-10mL水洗（可先转移溶液，后洗）。将滤液和洗涤液合并并转移至100mL烧杯中，缓缓加入15mL 4mol/L的盐酸。边加边搅拌，有大量气泡产生。（3）用冰水冷却10min后抽滤，2-3mL冷水洗涤几次，抽干。干燥。称量。（4）产品纯度检验：取几粒结晶，加5mL水，滴加1%FeCl3溶液。检验纯度。思考题1、反应容器为什么要干燥无水？ 以防止乙酸酐水解转化成乙酸2、为什么用乙酸酐而不用乙酸？ 不可以。由于酚存在共轭体系，氧原子上的 电子云向苯环移动，使羟基氧上的电子云密度 降低，导致酚羟基亲核能力较弱，进攻乙酸羰基碳的能力较弱，所以反应很难发 生。 3、加入浓硫酸的目的是什么？ 浓硫酸作为催化剂。 水杨酸形成分子内氢键，阻碍酚羟基酰化作用。 水杨酸与酸酐直接作用须加热至150160才能生成乙酰水杨酸， 如果加入浓硫酸（或磷酸），氢键被破坏，酰化作用可在较低温度下进行，同时副产物大大减少。优化后的实验方法实验试剂水杨酸1.00g(0.0072mol)，0.05gNa2CO3 ，乙酸酐0.9mL(0.0095mol)，浓盐酸，冰块。实验仪器15150mm试管， 100mL、 250mL烧杯各一只，布氏漏斗，吸量管温度计，玻棒，药匙，加热器，烘箱。实验步骤（1）在15150mm干净、干燥试管中加入1.00g水杨酸，0.05gNa2CO3 ，在通风条件下用吸量管量取0.9mL乙酸酐，一并加入。（为使固体都进入试管底部，必须后加乙酸酐）（2）在250mL烧杯水浴加热，控制80-85，至溶解后再加热10min。达到既定温度后固体全部溶解，有气泡生成。事先于100mL烧杯准备12mL冷水，加入4滴盐酸（通风条件下操作，先加水，以免盐酸挥发）（3）趁热将试管中反应物倒入上述烧杯(操作须迅速，以免固体残留试管，冷水无法洗出，影响产率) ，冰水浴10min，至晶体完全析出，抽滤，冷水(每次2-3mL) 洗两次，压干。（4）95干燥50min (干燥条件需改进)，称量产品m=1.04g备注:碱催化方案乙酰水杨酸产率比酸催化方案高，理论产量1.3g，产率达80%。2.贝诺酯（扑炎痛）的制备扑炎痛（Benorylate）的合成一、目的要求1.通过乙酰水杨酰氯的制备，了解氯化试剂的选择及操作中的注意事项。2.通过本实验了解拼合原理在化学结构修饰方面的应用。3.通过本实验了解Schotten-Baumann酯化反应原理。二、实验原理扑炎痛为一种新型解热镇痛抗炎药，是由阿司匹林和扑热息痛经拼合原理制成，它既保留了原药的解热镇痛功能，又减小了原药的毒副作用，并有协同作用。适用于急、慢性风湿性关节炎，风湿痛，感冒发烧，头痛及神经痛等。扑炎痛化学名为2-乙酰氧基苯甲酸-乙酰胺基苯酯扑炎痛为白色结晶性粉末，无臭无味。mp.174178，不溶于水，微溶于乙醇，溶于氯仿、丙酮三、实验方法（一）乙酰水杨酰氯的制备在干燥的100mL圆底烧瓶中，依次加入吡啶2滴，阿司匹林10g，氯化亚砜5.5mL，迅速按上球形冷凝器（顶端附有氯化钙干燥管，干燥管连有导气管，导气管另一端通到水池下水口）。置油浴上慢慢加热至70（约1015min），维持油浴温度在702反应70min，冷却，加入无水丙酮10mL，将反应液倾入干燥的100mL滴液漏斗中，混匀，密闭备用。（二）扑炎痛的制备在装有搅拌棒及温度计的250mL三颈瓶中，加入扑热息痛10g，水50mL。冰水浴冷至10左右，在搅拌下滴加氢氧化钠溶液（氢氧化钠3.6g加20mL水配成，用滴管滴加）。滴加完毕，在812之间，在强烈搅拌下，慢慢滴加上次实验制得的乙酰水杨酰氯丙酮溶液（在20min左右滴完）。滴加完毕，调至pH10，控制温度在812之间继续搅拌反应60min，抽滤，水洗至中性，得粗品，计算收率。（三）精制取粗品5g置于装有球形冷凝器的100mL圆底瓶中，加入10倍量（w）95%乙醇，在水浴上加热溶解。稍冷，加活性碳脱色（活性碳用量视粗品颜色而定），加热回流30min，趁热抽滤（布氏漏斗、抽滤瓶应预热）。将滤液趁热转移至烧杯中，自然冷却，待结晶完全析出后，抽滤，压干；用少量乙醇洗涤两次（母液回收），压干，干燥，测熔点，计算收率注释：1.二氯亚砜是由羧酸制备酰氯最常用的氯化试剂，不仅价格便宜而且沸点低，生成的副产物均为挥发性气体，故所得酰氯产品易于纯化。二氯亚砜遇水可分解为二氧化硫和氯化氢，因此所用仪器均需干燥；加热时不能用水浴。反应用阿司匹林需在60干燥4h。吡啶作为催化剂，用量不宜过多，否则影响产品的质量。制得的酰氯不应久置。2.扑炎痛制备采用Schotten-Baumann方法酯化，即乙酰水杨酰氯与对乙酰氨基酚钠缩合酯化。由于扑热息痛酚羟基与苯环共轭，加之苯环上又有吸电子的乙酰胺基，因此酚羟基上电子云密度较低，亲核反应性较弱；成盐后酚羟基氧原子电子云密度增高，有利于亲核反应；此外，酚钠成酯，还可避免生成氯化氢，使生成的酯键水解。贝诺酯的质量检验操作规程本品为4-乙酰胺苯基乙酰水杨酸酯。按干燥品计算，含C17H15NO5应为99.0%102.0%。 鉴别：取本品适量，精密称定，加无水乙醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含7.5g的溶液，照紫外-可见分光光度法（附录 A）测定，在240nm 的波长处有最大吸收；在240nm的波长处测定吸光度，按干燥品计算，吸收系数（E1%1cm）为730760。 【鉴别】 (1) 在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。 检查有关物质 取本品适量，加甲醇溶解并制成每1ml中含0.4mg的溶液，摇匀，作为供试品溶液（临用前配制）；精密量取1ml，置100ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。另取对乙酰氨基酚对照品适量，用甲醇配制成每1ml中含0.01mg的溶液，作为对乙酰氨基酚对照品溶液。照含量测定项下的色谱条件，取对照溶液10l注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的10%20%；再精密量取对乙酰氨基酚对照品溶液，供试品溶液和对照溶液各10l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2.5倍，供试品溶液的色谱图中如显杂质峰（溶剂峰除外），与对乙酰氨基酚保留时间一致的峰，其峰面积不得大于对照溶液主峰面积的1/10(0.1%),其余单个杂质峰面积均不得大于对照溶液主峰面积 的1/2(0.5%),各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积（1.0%）。 含量测定照高效液相色谱法(附录D)测定。 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇水（用磷酸调pH为3.5）（56：44）为流动相；检测波长为240nm。理论板数按贝诺酯峰计算不低于3000，贝诺酯与相邻杂质峰分离度大于1.5。 测定法 取本品适量，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.4mg的溶液，摇匀，作为供试品溶液，精密量取10l注入液相色谱仪，记录色谱图；另取贝诺酯对照品适量，精密称定，用甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.4mg的溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。片剂制备工艺流程原辅料粉碎、过筛物料配料、混合湿法造粒颗粒干燥压片包衣包装储存 3贝诺酯片的制备工艺（1）粉碎：取适量贝诺酯于研钵中，不断研磨，过100目筛后，备用。取淀粉适量，过100目筛后，备用。（2）淀粉浆的制备（准备托盘天平1台，100ml烧杯1个，电炉子1个，100ml或50ml量筒1个。玻璃棒1根，称量纸2张，药chi1个）操作：调节托盘天平与平衡状态，两边分别放称量纸，再调平衡；取淀粉，称量7.5g加入100ml的烧杯中，用量筒取蒸馏水50ml倒入烧杯中，用玻璃棒搅拌均匀，取电炉插上电源，将含淀粉的少被放到电炉上，边加热，边叫板，直至形成糊状，室温冷却后，备用。（3）混合：按处方量称取贝诺酯、淀粉、羧甲基淀粉钠，按等量递加法混合均匀。（4）制湿颗粒：将混合好的药粉放到盘子里，加适量淀粉浆制软材（握着成团，弹则散开），过16目筛制颗粒。（5）干燥：将湿颗粒放到干燥箱内，5060干燥2h。（6）颗粒含水量的测定：取干燥后的颗粒，1g，于水分测定仪测定其水分，含水量应在2%5%之间。（7）整粒：将干燥后的颗粒，再过16目筛，防止颗粒粘连。（8）再混合后确定片重：将整粒后的颗粒称重，加滑石粉，加崩解剂，混合均匀，根据投料量计算片重。（9）压片：调节压片机，用旋转压片机压片。贝诺酯片的质量检验操作规程：硬度、脆碎度、崩解时限、重量差异和溶出度检查。（1）硬度检查法：采用破碎强度法仪器：；片剂四用测定仪。方法：将药片径向固定在两横杆之间，其中的活动柱杆借助弹簧沿水平方向对片剂径向加压，当片剂破碎时，活动柱杆的弹簧停止加压，仪器刻度盘所指示的压力即为片的硬度。测定36片，取平均值。（2）脆碎度检查法：取药片，按中国药典2005年版二部附录X G项下检查法，置片剂四用测定仪脆碎度检查槽内检查，记录检查结果。仪器：脆碎仪方法：片重为0.65g或以下者取若干片，使其总重量约为6.5g；片重大于0.65g者取10片。用吹风机吹去脱落的粉末，精密称重，置圆筒中，转动100次。取出，同法除去粉末，精密称重，减失重量不得过1%，且不得检出断裂、龟裂及粉碎的片。本试验一般仅作一次，如减失重量超过1%时，可复检2次，3次的平均减失重量不得超过1%，并不得检出裂痕、龟裂及粉碎的片。（3）崩解时间检查法：采用吊篮法。仪器：崩解仪方法：取药片6片，分别置于吊篮的玻璃管中，每管各加一片，开动仪器使吊篮浸入371.0的水中，按一定的频率（30-32次/min）和幅度（552mm）往复运动。从片剂置于玻璃管开始计时，至片剂破碎并全部固体粒子都通过玻璃管底部的筛网（2mm）为止，该时间即为该片剂的崩解时间，应符合规定崩解时限（一般压制片为15min）。如有1片不符合要求，应另取6片复试，均应符合规定。结果判断：普通片剂：按上述装置与方法检查，6片均应在15min中内全部崩解。1片不合格，再取6片检查，均应符合规定。薄膜衣片：按上述装置与方法检查，或改用在，应在30min中内全部崩解。1片不合格，再取6片检查，均应符合规定。糖衣片：按上述装置与方法检查，应在1h中内全部崩解。如有1片不合格，再取6片检查，均应符合规定。肠溶片：按上述装置与方法，先在盐酸溶液（91000）中检查2h，每片均不得有裂缝、崩解或软化现象；继将吊蓝取出，用少量水洗涤后，每管各加挡板一块，再按上述方法在磷酸盐缓冲溶液（pH6.8）中进行检查，1h中内应全部崩解。如有1片不合格，再取6片检查，均应符合规定。泡腾片：取1片，置250ml烧杯中，烧杯内盛有200ml水，水温为15-25，有许多气泡放出，当片剂或碎片周围的气体停止逸出时，片剂应崩解、溶解或分散在水中，无聚集的颗粒剩留。除另有规定外，按上述方法检查6片，各片均应在5min中内崩解。（4）重量差异检查法仪器：电子天平方法：取药片20片，精密称定总重量，求得平均片重后，再分别精密称定各片的重量。每片重量与平均片重相比较（凡无含量测定的片剂，每片重量应与标示片重比较）超出重量差异限度（见表2）的药片不得多于2片，并不得有1片超出限度1倍。 表2 重量差异限度平均片重重量差异限度0.30g以下7.5%030g或0.30g以上5% （5）溶出度测定仪器：溶出仪方法：取本品6片，按照溶出度测定法（附录X C第二法）浆法测定，以1十二烷基硫酸钠溶液900ml为溶剂，介质温度（371），转速为100r/min，经45min取溶液5ml，滤过，精密量取续滤液1ml，加蒸馏水稀释至50ml，摇匀，作为供试品溶液；另取贝诺酯对照品20mg，精密称定，加无水乙醇溶解，并稀释至50ml，摇匀，取1ml，加0.025十二烷基硫酸钠溶液稀释至50ml，作为对照品溶液。取上述两种溶液，采用紫外分光光度法，分别在240nm波长处测定吸收度，计算每片的溶出百分率。限度为标示量的65，应符合规定。C：测定溶液的药物浓度；V：溶出介质的体积；n：稀释倍数。（6）贝诺酯片剂的含量测定仪器：紫外分光光度计方法：取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于贝诺酯15mg），置100ml量瓶中，加无水乙醇适量，振摇，微温，使贝诺酯溶解后，放冷，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置100ml量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，采用紫外分光光度法（附录A），在240nm的波长处测定吸收度，按C17H15NO5的吸收系数（）为745计算，即得。 扑炎痛 CAS号 5003-48-5 分子式 C17H15NO5 分子量 313.3092 对乙酰氨基酚与阿司匹林的酯化物，白色，无臭，无味稳定结晶性化合物，几乎不溶于水。在沸乙醇中易溶，在沸甲醇中溶解，在甲醇或乙醇中微溶。熔点为177181。为非甾体类抗炎、抗风湿、解热镇痛药。制备方法：由乙酰水杨酸经酰氯化生成乙酰水杨酰氯，再与对乙酰胺基苯酚缩合得到贝诺酯。1.1乙酰水杨酰氯的制备在100ml的三颈瓶中加入阿司匹林（9.0g，0.05mol）。在05滴加干燥的二氯亚砜（5ml，0.06mol）和两滴DMF,加热到70，反应大约2h，然后减压蒸去过量的二氯亚砜，的淡黄色的乙酰水杨酰氯，加10ml甲苯待用。1.2贝诺酯的制备在100ml三颈瓶加入50ml 7NaOH水溶液，冷却至5，再加入扑热息痛（7.6g，0.05mol）和5%（mol）的PEG，搅拌溶解，加入40ml甲苯，在剧烈搅拌下于05内滴加溶解在10ml甲苯中的乙酰水杨酰氯，加完后控制反应温度在05反应3h，抽滤，冷水洗至中性，得白色粗品贝诺酯，95%乙醇重结晶，干燥，的白色晶体5.0g，收率95%。DMF摩尔分数为阿司匹林5%是催化效果最佳。鉴别取该品的细粉适量，照贝诺酯项下的鉴别（1）、（2）项试验，应显相同的反应。检查溶出度取该品，照溶出度测定法，以1%十二烷基硫酸钠溶液1000ml为溶剂，转速为每分钟90转，依法操作，经45分钟时，取溶液10ml，滤过，精密量取续滤液1ml，加水稀释至50ml，摇匀，作为供试品溶液；另取贝诺酯对照品20mg，精密称定，加无水乙醇溶解，并稀释至50ml，摇匀，取1ml，加0.025%十二烷基硫酸钠溶液稀释至50ml，作为对照品溶液。取上述两种溶液，照分光光度法，在240nm的波长处分别测定吸收度，计算出每片的溶出量。限度为标示量的65%，应符合规定。其他应符合片剂项下有关的各项规定。含量测定取该品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于贝诺酯15mg），置100ml量瓶中，加无水乙醇适量，振摇，微温，使贝诺酯溶解后，放冷，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置100ml量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，照分光光度法，在240nm的波长处测定吸收度，按C17H15NO5的吸收系数（E1%1cm）为745计算，即得。测定方法方法名称：贝诺酯片贝诺酯的测定分光光度法应用范围：该方法采用分光光度法测定贝诺酯片中贝诺酯的含量。该方法适用于贝诺酯片。方法原理：供试品研细后，加无水乙醇溶解并定量稀释制成供试液，置紫外可见分光光度计，于240nm波长处测定吸收度，计算出其含量。试剂：无水乙醇仪器设备：紫外可见分光光度计试样制备：1.供试品溶液的制备取供试品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于贝诺酯15mg），置100mL量瓶中，加无水乙醇适量，振摇，微温，使贝诺酯溶解后，放冷，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5mL，置100mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。注：“精密称取”系指称取重量应准确至称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。操作步骤：取供试品溶液照紫外分光光度法，于波长240nm处测定吸收度，按C17H15NO5的吸收系数（E1%1cm）为745计算，即得。注：分光光度法应以配制供试品的同批溶剂为对照，采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波长作为测定波长，一般供试品的吸收度读数，以在0.3-0.7之间的误差较小。仪器的狭缝波带宽度应小于供试品吸收带的半宽度，否则测得的吸收度偏低。狭缝宽度的选择，应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准。由于吸收池和溶剂本身可能有空白吸收，因此测定供试品的吸收度后应减去空白读数，再计算含量。参考文献：中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，一部，p.48。本品含贝诺酯(C17H15NO5)应为标示量的95.0105.0%。本篇文章来自百拇医药网原文链接：/Html/Dir1/07/70/71.htm性状】本品为白色或类白色结晶性粉末；无臭或微有特臭。本品在磷酸盐缓冲液（PH6.0）中略溶，在水或甲醇中微溶，在丙酮或三氯甲烷中不溶。吸收系数取本品，精密称定，加磷酸盐缓冲液（PH6.0）溶解并定量稀释制成每1ml中含10g的溶液，照紫外-可见分光光度法（附录A）。在257nm的波长处测定吸光度，吸收系数（E1%/cm）为400-430。【鉴别】（1）在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。（2）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集718图）一致。【检查】酸度取本品，加水制成每1ml中含5mg的溶液，依法测定（附录H），pH值应为3.0-4.0。溶液的澄清度与颜色取本品5份，各0.6g，分别加碳酸钠溶液（1100）5ml使溶解，溶液应澄清无色；如显浑浊，与1号浊度标准液（附录B）比较，均不得更浓；如显色，与黄色或黄绿色6号标准比色液（附录A第一法）比较，均不得更深。吡啶高效液相色谱法（附录D）测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.25mol/L磷酸二氢铵溶液（取磷酸二氧铵57.515g，用水溶解并稀释至2000ml水（300：100：600）用氨溶液调节pH值至7.0为流动相；流速为每分钟1.0ml；检测波长为254nm。理论板数应不低于3O00，取吡啶对照品溶液20l注入液相色谱仪，计算数次进样结果，其相对标准偏差不得过3.0。吡啶对照品溶液的制备精密称取吡啶约1g，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度摇匀。精密量取10ml，置另-100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，于15以下贮存。临用前精密量取2ml，置200ml量瓶中，）加pH7.0磷酸盐缓冲液（称取无水磷酸氢二钠5.68g、磷酸二氢钾3.63g，加水溶解并稀释至1000ml）稀释至刻度，摇匀,作为对照品溶液。测定法精密称取本品约660mg，置100ml量瓶中，加上述pH7.0磷酸盐缓冲液溶解并稀释年刻度（于15以下贮存，1小时内进样完毕），摇匀，精密量取20l注入液相色谱仪，记录色谱图；另取吡啶对照品溶液同法测定。按外标法计算出供试品中吡啶的含量。本品含吡啶的量不得过0.12。头孢他啶聚合物照分子排阻色谱法（附录H）测定。色谱条件与系统适用性试验用葡聚糖凝胶（G-10（40-12Om）为填充剂，玻璃柱内径1.3-1.6cm，柱高度30-4Ocm。以含3.5硫酸铵的pH7.0的0.1mol/L磷酸盐缓冲液0.1mol/L磷酸氢二钠溶液0.1mol/L磷酸二氢钠溶液（61：39）为流动相A，以水为流动相B，流速的为每分钟0.8ml，检测波长为254nm。分别以流动相A、B为流动相，取0.1mg/ml蓝色葡聚糖2000溶液200l注入液相色谱仪，理论板数以蓝色葡聚糖2