食用菌栽培习题总结.doc

绪论1.什么是真菌、大型真菌和食用菌？答：真菌：是一类具有真核细胞，能产生孢子，无叶绿素的低等真核生物。大型真菌：主要指菌丝生长到一定阶段，能形成较大子实体结构的一类真菌，包括担子菌和子囊菌的一些种类。食用菌：指大型真菌中，具有肥大多肉的繁殖器官，木质化程度低，不含毒素，烹调后无味者。2.简述食用菌的食用价值。答：食用菌是一种营养丰富并兼具食疗价值的食品，其食用部分多为具有产孢结构的子实体(fruitbody)。食用菌具有高蛋白，低脂肪，富含维生素和矿物质等特点。 1.高蛋白：食用菌子实体的蛋白质含量丰富，约为鲜重的3%4%或干重的25%左右，介于肉类和蔬菜之间。子实体蛋白质含有人体必需的氨基酸种类齐全。 2.低脂肪：食用菌的脂肪含量一般较低，平均为干重的8%，其脂肪的性质类似于植物油，含有较多的不饱和脂肪酸,如油酸、亚油酸等，所以对降低血脂有明显的好处。3.富含维生素：包括VB1(硫胺素)、VB2（核黄素）、VPP（烟酸）、VC（抗坏血酸）和维生素D等（麦角甾醇）。4.富含矿物质：食用菌子实体的矿物质含量约占干重的7%，其中钾、磷的含量最高，其次是钙和铁，具有成骨造血、滋补脑力、调节人体体液和维持细胞内物质代谢等生理活性。第一章 大型真菌的形态与发育1.真菌的生长发育分为哪两个阶段？简述由孢子发育成子实体的过程。答：真菌的生长发育可以分为营养生长阶段和生殖生长阶段孢子发育成子实体过程：真菌单个孢子萌发后形成单核菌丝，与可亲和得单核菌丝配对，质配之后变成双核菌丝（营养菌丝）。当营养菌丝生理成熟后，在外界环境的刺激下，在培养基的表面或近表面，菌丝见先出现菌丝束，局部菌丝束扭结，逐步发育成盘状、颗粒状等“菇胚”（子实体原基），大量原基的的出现，标志着真菌的营养生长转入生殖生长，极少数的原基发育成菌蕾，在适宜条件下，菌蕾进一步分化成子实体。2.在形态上伞菌主要由那几部分组成，各部分有何特点？答：伞菌是包括通常称其子实体为蘑菇（mushroom）的一类担子菌，由菌盖（pileus, cap）、菌柄（stipe, stem, stalk）、菌环和菌托等部分构成。1.菌盖：菌盖是担子果最明显的部分，形状多种多样，菌盖边缘的形状有全缘或开裂，有的边缘内折或外翻，有的边缘平滑，有的边缘平滑具条纹，菌盖表面的皮层或角质层的菌丝体内常含有不同的颜色，使菌盖呈现白、黄、灰、红、紫、绿等不同的色泽，菌盖表面干燥、湿润或粘稠，平滑或粗糙。有些种类的菌盖表面具鳞片、纤毛或鳞片。2.菌柄菌柄在菌盖下面，是联结和支撑菌盖的“支柱”，有中生、偏生或侧生之分，与菌盖不易分离或极易分离。质地有肉质、蜡质、纤维质等。菌柄颜色多种，形状也各不同，如圆柱状、棒状、纺锤状、杆状、粗筒形、圆头形、假根形等。3.菌环和菌托菌环是内菌膜遗留在菌柄上的环状物，常在菌柄的上部，有各种形状，单层、双层或齿轮形。菌环的有无是鉴定种属的重要依据。菌托是菌柄在伸长时，外菌膜破裂形成的，菌托的形状有苞状（saccate）、杯环状（marginate）、鳞片状（friable）、粉状（powdery）、环带状等。菌环、菌托的有无是伞菌分类鉴定中重要的特征。第二章 大型真菌的形态1.大型真菌的营养类型分为哪几类，各自有哪些不同？答：所有的食用菌均属于异养型生物（heterotroph），不能进行光合作用，也不能同化空气中的二氧化碳，必需从其生长的基质或寄主获取营养。食用菌的主要营养类型有：腐生（saprophytic）、共生（symbiotic）和寄生（parasitic）三大类 。腐生：从动植物残体或无生命的有机物质获取营养。共生：两种不同生物共同生活，互惠互利，相互依存寄生：一种生物着生于另一种生物的体内或表面，并从后者体内摄取营养。三种营养类型最大的不同点：获取营养的方式不同。2.食用菌的生态类群有几种类群？答：依据基物类别和是否形成菌根，食用菌的子实体分为以下五种生态类型。木生类：木生真菌（lignicolous fungi）：以木材为基物，菌丝体分解纤维素和半纤维素或木质素的能力较强，往往会引起树木或木材白色或褐色腐朽。 粪生类：粪生真菌（coprophilous fungi）：适于在牲畜粪便上或粪肥充足的肥沃土壤上生长，菌丝体分解吸收牲畜粪便中所含有大量纤维素及其它有机物供给自身生长发育。土生类：土生真菌（geophilous fungi）：主要是以土壤和地表腐殖质层为生长基物的一些种类，且不包括与树木形成外生菌根的种类，主要是蘑菇科环柄菇属（Lepiota）、羊肚菌科羊肚菌属（Morchella）及部分蘑菇科的一些种虫生类：虫生类真菌（entomophytous fungi）：是指繁殖生长在昆虫体上或与昆虫的活动有着密切联系的真菌，目前已知80余种。霍克斯虫草（C. hawkesii）和冬虫夏草（Cordyceps sinensis）是典型的虫生类真菌，因具有极高的食用和药用价值而引人注目，我国在此类真菌的人工驯化等方面开展了大量的研究工作并有所进展。菌根类：真真菌与高等植物的根系所形成的共生体称为菌根（mycorrhiza），而与根系共生的真菌则称为菌根真菌（mycorrhizal fungi）。根据菌丝在根中存在部位的不同，可将菌根分为两类。.外生菌根（ectomycorrhizae）：真菌菌丝大部分包被在植物幼根的表面形成白色丝状物覆盖层，只有少数菌丝伸入根的表皮、皮层细胞的胞间隙中，但不侵入细胞之中。以菌丝代替了根毛的功能，增加了根的吸收面积，因而具外生菌根的根尖通常略变粗，马尾松、云杉、栎属等植物多形成此类菌根。.内生菌根（endomycorrhizae）：真菌的菌丝通过植物的细胞壁且大部分侵入到幼根皮层活细胞内，在显微镜下可以观察到表皮细胞和皮层细胞内散布着盘旋状的菌丝，胡桃、桑、葡萄、李、杜鹃及兰科植物等可形成内生菌根。 3.应从哪些角度了解食用菌的生态环境？答：纬度、海拔高度、地形地貌、植被类群、土壤土质以及大型真菌的季相。第三章 食用菌的生理1.食用菌生长发育的营养条件有哪些？答：食用菌所需的营养物质包括碳源、氮源、碳氮比、无机盐、生长激素。碳源：为菌丝细胞生长提供能量和新陈代谢中做为碳架来源的碳水化合物称为碳源，其主要作用是构成细胞组织和供给食用菌生长发育所需要的能源。碳源是食用菌最重要的营养源之一。可分为无机碳和有机碳两大类。氮源：氮源是合成蛋白质和核酸所不可缺少的原料。凡能提供食用菌生长发育所需要的氮素的营养物质，称为氮源。一般不提供能量，是食用菌最重要的营养物质之一。食用菌主要利用有机氮。碳氮比（C/N）：培养基中碳素总量与氮素总量之比称为碳氮比。碳氮比影响着食用菌的生长与发育，提高氮源浓度，促进营养生长，而使生殖生长受抑制；如果提高碳源浓度，受抑制状态能得到缓和甚至不受抑制；各种菇类所需的C/N比值不同。无机盐：食用菌生长所需要的矿物质元素可分为大量元素和微量元素两大类型。大量元素有磷、硫、镁、钾、钙等，它们参与细胞结构物质的组成、酶的组成、维持酶的作用、能量的转移、控制原生质的胶态和调节细胞的渗透压等。微量元素包括铁、铜、锌、锰、硼、钴、钼等，它们是酶活性基的组成成分或是酶的激活剂，需求量极少。生长激素：不同食用菌类所含激素种类、含量均不一，它们在食用菌生长发育中起着重要的作用。2.什么叫稳温结实与变温结实？答：稳温结实：某些菌类营养菌丝生理成熟后，经降温至一定值，诱导菌丝纽结成原基后，至于原基是否能顺利健全发育子实体，取决于菇床温度及菇床上之温度是否保持相对稳定。变温结实：某些菌类进入生殖生长阶段之前虽有一个连续降温过程，但还不能诱导原基形成。 例如生理成熟后的香菇菌丝单纯受到降温刺激是不易形成菇蕾的，还必须有一较大的昼夜温差刺激才行，温差幅度越大越好。3.影响食用菌生长发育的环境条件有哪些,试就某一栽培菌类进行分析。答：食用菌不能在真空中生长，需要有适宜的环境条件。这些环境条件包括两个方面：理化环境和生物环境。理化环境包括温度、湿度、水分、空气（主要是氧气和二氧化碳）、光线强度、酸碱度；生物环境包括植物、动物和微生物。以段木栽培香菇为例来剖析。温度：温度是影响香菇生长发育的一个最活跃、最重要的因素。孢子萌发温度一般在1332之间；最适温度2328。低于10和高于32生长不良；35停止生长；38以上死亡。在低温条件下菌丝生长缓慢，即使在-20经10小时也不会死亡。段木栽培时，由于木材的保温作用，菇木内的菌丝可忍耐比气温更低或更高的温度。当气温低到20和高到40时仍可保持1020小时生命。香菇菌丝生长的最适温度为22-28 。香菇原基在821分化；在1020分化最好。子实体发育温度525；适温为1217。湿度：在锯木屑培养基中，菌丝体生长的最适含水量是60%70%（因锯木屑的种类、粗细而异）；在菇木中适宜的含水量是32%45%，其中以35%40%最适宜，在32%以下成活率不高，在10%15%时菌丝生长极差。香菇菌丝生长阶段，需要较干燥的环境，空气相对湿度60%70%为宜。空气相对湿度80%90%有利于出菇；菇蕾形成后，将空气相对湿度调至60%左右，可望培养优质香菇（花菇）。空气：香菇是好气性真菌，足够的新鲜空气是保证香菇正常生长发育的重要条件之一。当空气不流通、不新鲜、氧气不足时，香菇的呼吸过程受到抑制，菌丝的生长和子实体的发育也就受到抑制并导致死亡。因此，在通风良好的场所栽培香菇，才能得到好的收成。酸碱度：酸碱度也是影响香菇生长发育的主要环境因子之一。香菇菌丝生长之后，菇木中的pH值是很低的，一般为3.73.8，平均3.67，而且几乎是恒定的，据推测，这样低的pH值可能有利于出菇。光照：香菇是需光性的真菌，强度适宜的漫射光是香菇完成正常生活史的一个必要条件。在菌丝营养生长阶段完全不需要光照。光照会抑制香菇菌丝的生长。在黑暗条件下进行营养生长，而子实体的分化和生长发育则需要光照。（1）光照对孢子的影响 在直射阳光下，晒10min孢子萌发率减少一半，晒3h几乎都不萌发了，晒45h就全部不萌发。（2）光照对菌丝的影响 强烈的直射阳光对香菇菌丝有抑制作用和致死作用。在明亮的室内，菌丝容易形成褐色的被膜。（3）光照对子实体的影响 没有光照决不形成子实体，分化后的原基在暗处有徒长的倾向，盖小，柄长，色淡，肉薄，质劣。总而言之，以上这些生活条件是综合地对香菇发生作用的。在营养条件完全满足的情况下，决定能否进入结菇阶段的主要因子是温度、湿度和光照。第四章 菌种类型、制种装备与菌种场布局1.请以图解方式简述各级菌种间的相互关系。答：一级种培养基制备高压灭菌接种培养提纯分离原始母种中试后确定一级种 一级种转管扩大保存 二级种培养基制备高压灭菌接种培养二级种 三级种培养基制备高压灭菌接种栽培监测使用销售2.根据各级菌种制作的工艺流程，解释菌种场的布局原则。答：菌种场布局是否合理，关系到工作效率及菌种污染率的高低，直接关系到菌类商品的合格率。菌种场布局应结合地形，方位统筹安排，根据菌种制作的工艺流程来安排生产线的走向，防止交错，以免引起生产上的混乱。食用菌菌种制作的工艺流程一般为：培养料的贮备，容器、工具的洗涤，培养基的配制，灭菌、冷却，接种，培养，贮存。因此，菌种厂必须筹建原辅料仓库、原料处理场地、洗涤室、灭菌室、冷却室、接种室、培养室及储藏室等基本设施。（一）原辅料仓库：原料库用于制作母种及栽培种的原料，数量多，体积大，容易发霉发酵或孳生害虫，因此库房必须干燥，通风良好，并要保持环境卫生。（二）原料处理场地：原料预处理场地主要供培养料摊晒、粉碎及培养料堆积发酵用。因此，地面必须坚实平整，最好铺设水泥地面。其规模大小可根据原料数量多少而定。（三）洗涤室：主要用以洗刷菌种瓶、试管等。室内应修建洗刷池及上：下水道，以利排除污水。并要配备搬运菌种瓶的筐篮、控水沥干菌种瓶的空心格子木架、斜插瓶（管）架、洗涤剂、瓶刷等。（四）配料室：室内地面务必平整光滑。配备拌料槽、拌料机、磅秤、天平、锨、桶等拌料配料工具。并设分装操作台、装瓶机装袋机及制作试管斜面菌种用的玻璃漏斗及漏斗架等。（五）灭菌室：室内设有小型手提式高压蒸汽灭菌锅，立式、卧式高压蒸汽灭菌锅，蒸汽灭菌柜或常压灭菌灶等，供各级菌种培养基灭菌用。（六）冷却室：室内地面和墙壁要求平滑，便于洗刷消毒。用于冷却灭菌后的培养基。（七）接种室：无菌室 无菌室为无菌操作的场所，分里、外两间，外间为缓冲室，面积为23 m2，内间为接种室，57 m2，两间高度均为2.22.5 m。内、外间设移动式拉门，且两门呈对角线排列。无菌室必须密封性好，消毒后能保持无菌状态。接种箱 接种箱为小型接种设备，结构简单，操作方便，便于熏蒸消毒。接种箱有单人接种和两面双人接种两种，木质结构，箱体145 cm85 cm80 cm，箱体上部两侧各有两扇能开启的斜向的玻璃窗，窗门上钉有绒布以使箱门紧闭后不漏气，箱体下半部两侧各有两个直径1213 cm的圆洞，两洞的中心距离为52 cm，每一洞口都装有袖套，袖口有松紧带，箱顶为平板，安装有紫外线灯和日光灯。超静工作台 此种设备较先进，利用空气过滤器，使操作区的空间达到相对的无尘、无菌状态，降低接种污染率。（八）培养室：培养室是培养菌种的场所，要求干燥、清洁、闭光、隔热性好。安装自动控温装置、空气调节器、排气设备及移动式照明灯，易于保温、控湿、通风换气和检查菌种。培养室内有多层的培养架，架宽5060 cm，上、下层之间距离40 cm，两架间走道宽60 cm。（九）化验室：供检查无菌效果，观察菌种生长发育情况，鉴别菌种质量及配制药品用。室内应设置仪器柜、药物柜、工作台、显微镜及有关试剂和药品等。（十）储藏室：菌种成品贮存的场所。应远离原料库及其它污染源。室内要求干燥、低温（48 ）、通风、凉爽、清洁，能遮光的条件。在存放菌种之前必须进行清毒处理，室内禁止存放有毒药物及其它污染物。地面可经常撒布石灰，防止杂菌污染。第五章 菌种培养基的制备1.常用作一级菌种培养基的化学试剂有哪些，其使用的浓度范围是什么？答：1.葡萄糖 2%2.蔗糖 2%3.蛋白胨 一般为0.05%-0.2% 常用0.1%4.麦芽浸膏0.5%-2.5%5.琼脂 1.8%-2.3% 6.盐酸 2%（配制浓度）7.氢氧化钠2%（配制浓度）2.请叙述一级菌种培养基制备的原理。答：1.不溶物的热浸提 天然有机物如马铃薯，黄豆粉，玉米粉等新鲜，无虫，无变质材料经热浸提后，取滤液入料，为食用菌生长提供全面营养。 2.可溶性物质的溶解 如麦芽浸膏，酵母浸膏，蛋白胨等主要为食用菌提供优质的碳源和氮源，矿物质多在改良培养基或综合培养基中作为食用菌对矿物质的要求的补充剂，同时对培养基物理性状改良其重要作用，用量0.01%-0.5%。3.琼脂熔化仅作为固化剂，不提取任何营养。4.培养基的分装培养基配制结束后，趁热分装，否则琼脂凝固，分装无法进行。3.二级菌种制备中要用到哪些物质，对其有何要求？答：1.木屑：可稍粗些，不能用针树叶。2.棉籽壳：高持水，需无虫、无霉。3.米糠或麸皮：选细糠，麸皮需新鲜。4.石膏或CaCO3:质地以细为好，越细越好，热石膏更方便。5.蔗糖：红糖较好6.磷酸氢二钾与磷酸二氢钾7.过磷酸钙8.容器：透明的专用菌种瓶。4.请叙述二级菌种培养基的制备过程。答：1.培养基配方的确定2.可溶性辅料溶解及不溶性物质的预处理，然后混合均匀3.测定含水量及PH至最适4.容器填充5.高压灭菌6.冷却5.请叙述三级菌种培养基的制备过程。答：木腐生菌类：木屑三级菌种制备方法与木屑二级种几乎相同，所不同的仅是在洗涤前菌种瓶的正中央打一锥形孔，孔径2cm。打孔的目的是接种时，菌种能从预留孔落入，便于菌种瓶内培养基表面和空穴内菌丝同步蔓延，缩短培育时间，有利于容器内菌丝的菌龄基本相同。草腐生菌类：1.麦粒三级菌种的制作：1）.浸泡，清洗，去尘土2）.摊晾、拌料3）.装瓶4）.洗瓶，塞棉花5）.灭菌、冷却2.稻草段三级菌种的制作：取无霉烂，新鲜的干稻草段切成3-4cm长，浸泡3-5小时后沥干，撒入麸皮，拌入石膏，过磷酸钙，即可装瓶，压瓶，洗涤，塞棉花，立即灭菌。6.三级菌种培养基有哪些类型，试比较它们之间的优缺点。答：1.木屑三级种：优点：取材方便，易操作缺点：菌种瓶较重，易破损 2.麦粒三级种：优点：菌种损伤恢复快，四面开花，有利于提高产量缺点：易污染 3.稻草段三级种：优点：取材方便，经济实惠缺点：质地较硬，瓶装较困难，袋装易刺破壁，导致污染，受潮后弹性强，不易压实，易断裂，影响菌种质量。第六章 灭菌与消毒1.灭菌与消毒有何本质区别？答：消毒（disinfection）：是指用物理或化学方法杀死待消毒物体表面或内部部分微生物营养体的方法，但不一定杀死细菌的芽胞。如接种前的皮肤用酒精棉涂抹即为消毒。是一种不彻底的灭菌方法。灭菌（sterilization）：是指用物理或化学方法杀死物体表面和内部的所有微生物，（包括细菌的芽胞），使之达到无菌状态。如配制的培养基在接种前应进行湿热灭菌。是一种较为彻底的灭菌方法灭菌可包括消毒，而消毒却不能代替灭菌。2.灭菌有哪几种形式，试比较它们各自的特点？答：1.干热灭菌法（1）火焰灭菌法：利用火焰灼烧，使物体表面的微生物死亡，多使用于接种针、铲、耙等移植工具的灭菌。（2）干热空气灭菌法：这是实验室中常用的一种方法，利用干热空气维持1-2小时后，使微生物细胞的蛋白质变性，达到灭菌目的，如一些玻璃器具及棉花塞，液体石蜡等。2.常压湿热蒸汽灭菌法：利用蒸汽较强的穿透力，释放出大量的潜热能，不断地传导至培养基深处，达到内外热平衡，并较长时间维持在100以达到彻底灭菌目的。3.高压灭菌：利用饱和蒸汽使被灭菌物体受热，受潮，在高温作用下，使细菌蛋白质变性，丧失活力而达到灭菌的目的。3.请叙述影响常压灭菌的主要因素。答：1.培养料预湿是否适宜2.控制灭菌前微生物的自繁生物量3.灭菌锅内培养袋间应留有空隙4.灭菌锅容积对灭菌效果的影响5.灭菌锅内100的保持时间是否在12小时以上是彻底灭菌的关键6.灭菌锅内应有活蒸汽，避免死角发生4.请叙述影响高压灭菌的主要因素。答：1.避免假压现象是高压灭菌能否彻底的关键 2.培养基成分对灭菌效果的影响3.PH对灭菌效果的影响 4.孔隙度对灭菌效果的影响5.化学消毒时常用的化学药剂有哪些？使用过程中要注意哪些问题？答：1. 乙醇 使菌体蛋白凝固变性，对芽胞无效。以70%75%溶液作为消毒剂，多用于皮肤消毒。易挥发需加盖保存并定期调整其浓度。低于70%浓度则消毒作用差。2. 新洁尔灭 阳离子表面活性剂，能吸附带阴电的细菌，破坏细菌的细胞膜，最终导致菌体自溶死亡，又可使菌体蛋白变性而沉淀。0.1%-0.2%溶液用于皮肤消毒；0.1%-0.2%溶液用于消毒金属器械，浸泡1530min（加入0.5%亚硝酸钠以防锈）。对肥皂、碘等阴离子表面活性剂有拮抗作用。有吸附作用，会降低药效，所以溶液内不可投入纱布、棉花等。3. 福尔马林（甲醛） 使菌体蛋白变性，酶活性消失。能杀灭细菌、真菌、芽胞和病毒。具有强烈的刺激性气味，会刺激皮肤、眼睛及呼吸道，使用人员应注意自身防护。4. 漂白粉 在水溶液中放出有效氯，破坏细菌酶的活性而致死亡。能杀灭各种致病菌、病毒芽胞1%3%澄清液喷洒（100300 ml/m3）消毒30 min后通风；0.5%1%的漂白粉溶液能在15分钟内杀死大部分细菌，配制的澄清液性质不稳定，密封保存时间不可超过1周，最好现配现用；有腐蚀及退色作用，不宜用于金属制品、有色衣物及油漆家具、布类消毒后应立即清洗、以防被腐蚀。5. 高锰酸钾 常用浓度为0.1%-0.2%，现配现用。6. 过氧乙酸 能产生新生态氧，将菌体蛋白质氧化，使细菌死亡，能杀灭细菌真菌，芽胞。0.2%溶液用于手的消毒浸泡12 min；0.2%-0.5%溶液用于物体表面的擦拭或浸泡10 min；1%2%溶液用于室内空气消毒。浓溶液有刺激性及腐蚀性，配制时要戴口罩和橡胶手套须谨慎防止溅到它处；因腐蚀性强不宜用金属器皿盛装；存于阴处，防高温引起爆炸；易氧化分解可降低浓度和杀菌力，故须现配现用。7. 过氧化氢（双氧水） 过氧化氢能破坏蛋白质的基础分子结构从而具有抑菌与杀菌作用。3%6%溶液用于烯酸树脂制成的外科体内埋植物的消毒；10%25%溶液用于不耐热的塑料制品消毒，使用前用无菌生理盐水冲洗；易氧化分解 降低浓度应存于阴凉处不宜用金属器皿盛装。8. 甲酚皂（来苏儿） 含甲酚，杀菌能力与苯酚相似。稀释至1%-2%水溶液用于手、皮肤、疗器械等消毒；5%-10%水溶液用于环境等消毒。本品为有毒与腐蚀物质，对皮肤与粘膜有腐蚀性。9. 多菌灵 不同菌类对多菌灵敏感度不同。5.常用的物理消毒方法有哪些？使用过程要注意哪些？答：1. 紫外线消毒法常用于接种箱，超净工作台，缓冲室的空间消毒紫外线对人体有辐射，注意自身防护。2. 臭氧发生器消毒法 灭菌灯内装有1-4支臭氧发生管，在电场作用下，将空气中的氧气转换成高纯臭氧。臭氧主要依靠其强大的氧化作用而杀菌。主要用于接种箱等空气流动性较差的小环境消毒，使用灭菌灯时，关闭门窗，确保消毒效果。用于空气消毒时，人员须离开现场，消毒结束后20-30 min方可进入。3. 空气净化法第七章 菌种的分离、提纯、扩大、培养与保存1.无菌操作有哪些规程？答：无菌操作，首先要求操作者严格树立无菌观念1.采用空间消毒的方法：净化操作环境2.分离、接种所有使用的工具均要进行无菌处理后，才可直接接触培养基组织块。3.注意火焰封口2.如何进行种菇种耳的选择？答：要求菌形理想，长势健壮，无虫无害的子实体。留种应在无虫无害的栽培场内进行，最好选择第二潮菇发生的初期留种。选定留种菇耳后应将其四周幼蕾摘除，使培养基能集中供给种菇发育，种菇应选单生，菇盖肥厚，圆正，菇柄粗短的作为留种对象。3.常用的菌种分离法有哪些，各自有何特点？操作过程的关键点是什么？答：1. 孢子分离法孢子分离法是在无菌条件下，使孢子在适宜的培养基上萌发成菌丝体而获得的培养物。孢子数量大，可提供选择优良菌株的机会较多，而且孢子的生命力强，所得菌种菌龄短，生活力旺盛，但孢子是食用菌有性生殖的产物，存在变异，孢子分离法获得的培养物必须经过品比试验，选择生产性状优良、稳定的纯培养用于菌种生产。孢子分离又可分为单孢分离和多孢分离。对于香菇、平菇异宗结合的菌类，为避免产生单孢不孕现象，可采用多孢分离法。单孢分离法主要用于杂交育种的研究。2. 组织分离法组织分离法是获得纯菌种最常用的方法，操作简单易行，切取子实体、菌核、菌索内部组织，获得纯培养的方法都属于组织分离方法。组织分离法获得的纯培养遗传性状稳定，变异小。包括子实体分离法、菌核分离法和菌索分离法。3.木腐菌的基内菌丝分离法包括菇木（或耳木）分离法和代料基质分离法。分为单一型和混合型。4.如何进行菌种的提纯工作？答：1.排除细菌或酵母菌的污染。转管，在较低温度15-20摄氏度下培养，菌丝速度大于细菌，挑取菌丝前端，分离2-3次。或用接种铲将细菌铲除，打破试管，挑取内部长有菌丝的琼脂块在培养。2.排除霉菌的污染。若霉菌尚未成熟，可用前端菌丝切割提纯后。若已成熟，则将含多菌灵的滤纸覆盖在霉菌菌落上，后用火焰灭菌过的将分离物表面铲除，随后用接种针勾取分离物位置下的基内菌丝再培养。3.菌丝再提纯。对菌丝生长速度一致部位进行菌丝前端切割移植至新的培养基上生长。4.菌丝生长速度测定。5.请叙述一级菌种转管扩大的过程。答：打开超净工作台电源和紫外灯，20min后关闭紫外灯，微开玻璃门和风机，放出O3.打开工作灯，用75%的酒精棉球擦手，点燃酒精灯，右手持接种针，将顶端烧红，并将整支接种针过火几次，用左手指和手掌托持住两只试管，食指与中指持一级原始种，无名指与小指持空白斜面培养基试管。用右手无名指和小指持原始种棉塞，小指和鱼际持空白斜面培养基棉塞，火焰封口双试管。将接种针靠在试管内壁冷却，然后挑取黄豆大小的基内菌丝琼脂块，迅速移接至空白试管培养基中央。棉塞燎至微焦，塞回已接种的试管口中。持住原始种试管保持火焰封口，重复操作直至原始一级种用完为止。6.请叙述一级菌种转接二级菌种的过程。答：二级菌种培养瓶灭菌后，取出来冷却，将培养瓶的外壁擦干净，移入接种箱内。在无菌条件下，将接种针放在火焰上灼烧，冷后，在酒精灯火焰附近拔开培养瓶棉塞，钩取一小块带培养基的一级菌种，将菌块抖入二级种瓶，将培养瓶口在酒精灯火焰上灭菌，然后立即塞上棉塞。轻摇种瓶，使菌块滚至培养基中央。7.请叙述二级菌种转接三级菌种的过程。答：待接栽培瓶横放入接种箱左边，选无污染的二级种瓶置于接种架上，同时将一团浸由95%酒精的棉花团，长柄镊子，接种匙，接种架，酒精灯，火柴等一起放入接种箱内，按常规方法进行消毒。接种时用镊子夹紧酒精棉花团，打开二级种瓶的棉花塞，将棉花团点燃灼烧瓶口消毒后，火焰封口，置于接种架上。用灼烧后的接种匙将二级菌种表面的培养基扒掉，再将下面长满菌丝的培养基在瓶内捣碎，之后将接种匙插放在二级种瓶内，置于接种架上待用。左手取三级种瓶，右手小指及手掌鱼际夹住棉塞旋转打开，靠近二级种瓶口，然后用接种匙铲取一满匙，移入三级种瓶内，再塞紧棉塞。接种完毕，竖放在接种箱右边。周而复始。接种完毕后将三级种瓶取出，贴上写明种类、菌株号、接种人姓名和接种日期的标签，轻振使一部分二级种落入种穴，一部分布满培养基表面。放入培养室。每瓶二级种可接30-40瓶三级种。8.如何鉴别菌种质量的优劣？答：1直接观察肉眼观察包装是否合乎要求，棉塞有无松动，试管、玻璃瓶或塑料袋有无破损，有无病虫侵染。菌丝色泽是否洁白均匀，有无老化萎缩现象。闻菌种是否具有蘑菇特有的香味。原种和栽培种可取出小块菌丝体观察其颜色和均匀度，并用手指捏料块检查含水量是否符合标准。2显微镜检查在载玻片上滴一滴蒸馏水，然后挑取少许菌丝置水滴上，让菌丝体充分展开，盖好盖玻片，再置显微镜下观察。也可通过菌丝体染色后镜检观察。3菌丝萌发、生长速率测定 将所获的菌种，转接至含PDA 培养基培养皿中央，培养，观察菌种萌发时间。待菌丝生长蔓延时，用直径0.5cm的打孔器，经灭菌后打取边缘菌丝，连同培养基重新接入PDA 培养皿中央，25培养，每隔24小时，测定菌落直径，直至菌落覆盖全皿为止，计算出菌丝平均生长速度。4菌种纯度测定 随机抽取经初步检测的菌种，挑取菌种不同部位菌丝连同培养基转接至含PDA培养基培养皿，每瓶（或袋）菌种转接3050点，25培养，观察菌种萌发时有无杂菌或异常生长状况出现。5、吃料能力鉴定将菌种接入新鲜配制的适宜培养料中，置25下培养，观察菌丝生长情况，如果菌种块能很快萌发，并迅速向培养料中生长伸展，则说明该品种的吃料能力强;如果菌种萌发后生长缓慢，不向四周和料层深处伸展，则表明该品种对培养料的适应能力差。6、耐温性测定 用打孔器移接菌种于含PDA培养基培养皿中央，置于1040之间不同温度培养，观察菌种萌发时间，测定不同温度下菌丝生长速度。将不同温度生长的菌丝再转接至新的含PDA培养基培养皿中央，置于25下培养，如果经过不同温度处理的菌丝仍然健壮，则表明该菌种具有较高温度适应性。7、菌种病毒病的检测 病毒病是一种由无细胞结构的极微小的生物寄生于活的寄主后所引起的病害。常常是造成菌种退化，产量下降的因素之一。由于病毒个体极小，普通光学显微镜不能发现，但一旦在播种后造成危害，则很难防治，所以发生可疑迹象时，应对菌种是否遭受病毒感染进行检测。病毒粒子的检测主要有电镜观察法及核酸电泳法两种方法。第八章 香菇栽培1.请叙述香菇菌筒制作方法和操作要点？答：1.填料选择口径为9.5cm的低压聚乙烯塑料筒，将配好的培养料填入其中，采用专用装筒机，填料时，将塑料筒张开，套入装筒机出料筒口，左手压紧塑料筒口，右手压紧出料口，填料接近筒口8cm处，取出竖起在水泥地上，开始扎口，如不能立即扎口须捏紧扭转筒口，倒置在水泥地上，以防爬料。2.扎口将料筒竖起，拳击筒口四周数下，增减培养料，留出8cm高的空间，抖动筒口，扫掉粘木屑，用塑料绳在紧贴培养料处扎紧，在扭转上部薄膜，使薄膜反折，再扎紧。3.灭菌与冷却在完成填料扎口后，立即灭菌，采用常压灭菌，在灭菌结束后，搬入专用接种室，呈“#”排放，以便尽快冷却。准备接种。2.为什么说菌筒转色期是香菇生产成败的关键？菌筒转色有哪些条件？答：木屑栽培不像椴木栽培那样有树皮保护菌丝可防止水分蒸发和杂菌侵入，它是利用菌筒脱袋后在适宜的湿、温、光、氧等条件下，使裸露的菌筒表面的菌丝转色，形成一层具有韧性的红褐色菌膜，以利保温保湿，促进菌丝分化，扭结形成原基。菌筒是否转色,转色的好坏,直接影响到香菇生产的经济效益。正常情况下,转色为红褐色的出菇正常,稀密适当,菇体大小适中,质量好,产量高，所以说转色期是香菇生产成败的关键。影响因素：1. 温度：温度影响菌筒转色的快慢，最佳转色温度为19-23度。温度偏高或偏低，均不易转色。2. 空气湿度：空气湿度影响菌筒转色的质量，菇场内空气越流通，越易转色，同时还要防止失水，菌筒偏干时，可罩紧薄膜，结合短时间通风换气，适量喷水数天。3. 光线：相同条件下，光线充足，转色快而且深，反之转色则慢。4.花菇形成机理是什么？它和畦式栽培在管理上有什么不同？答：在幼蕾直径长到1.5-2.0cm时，遭遇到寒冷干燥的气候，菇蕾表面的蒸腾速率加快，使菇盖表皮层处于近乎干燥状态，表皮层细胞较难进行扩展，与此同时，菌肉组织依然能从菇筒内获取营养物质与水分，照样可以进行缓慢的细胞分裂，两者的分裂处于严重的不同步状态，此时只有表皮层开裂才能满足香菇菌肉组织的扩张，于是在菌盖上出现龟裂，露出雪白的菌肉，形成花菇，所以说，花菇是香菇个体发育过程中对恶劣环境的自我调控，以求完成菇体的个体发育，繁殖后代的过程。（花菇的产生是环境条件对子实体生长的促进与制约的结果。花纹形成主要受以下几种因素影响。(1) 品种特性花菇形成不是某个品种的固有特性，任何一个品种都不会在自然条件下全部形成花菇。生产实践和试验表明，在相同条件下，低温型和中温偏低型、菌肉特别厚的品种，花菇率明显高于其他品种。(2) 菇蕾成熟度菇蕾直径在1 cm以下的幼菇，由于组织幼嫩，抗逆力弱，一但遇 到适宜产生花菇的低温和干燥环境，就会因为大量失水停止生长而萎缩；在这样的条件下， 直径23 cm的菇蕾能形成质量好的白花菇；3.5 cm以上的菇蕾只能形成伞花菇，菌盖中心 干燥无花纹。(3) 温度和温差花菇形成最适宜的温度为1215。在此温度时，仅需要23 d就可形成花菇，温度低时，子实体生长慢，形成的花菇肉厚、柄短、而且组织致密；温度高时子实体生长快，形成的花菇肉薄、柄长，而且组织疏松。日温差大有利于积累干物质。(4) 菌棒的含水量一般菌棒含水量以60%65%为宜，过低影响花菇生长，过高对菌丝积累养分不利。花菇生长期间，不能在棚内喷水，完全依靠菌棒中的水分生长。因此使菌棒内有较充足的水分，对花菇生产特别重要。(5) 湿度花菇形成最适宜的空气相对湿度是55%68%。湿度的高低是通过风速而发生作用的。当外界湿度大于菌棒的含水量时，菇蕾表面的蒸发速度与培养基内供水速度大体平衡，表面不会出现裂纹；反之，表皮先于菌肉干燥，致使内部生长快、外部表皮生长慢，而出现裂纹。温度越低，菇蕾的生理活性越低，供水速度就越慢，表皮就裂得快。(6) 光照光照是通过影响空气湿度，间接对花菇形成发挥作用的，光照越强，空气越干燥，花菇越容易形成。日照时数对花菇生成也有影响，日照时数多，花菇生成也多。充足的散射光能使花纹洁白，菇体厚实，有利于提高产量和质量。）与畦式栽培在管理上的不同：1.菌丝培养阶段：菌丝定植期和生长期管理须注意安全度夏，防止“烧菌”，主要通过翻堆，改变堆形及刺孔放气达到散热降温的目的。2.子实体发生阶段： 选址和建棚：须有一个低温，干燥的环境，通风良好，交通方便，地势平坦，方位以坐西北向东南的地方建棚。 上架：在温度低于20度是，提前2、3天搬入菇棚内，置于架子底层。 诱蕾：昼夜温差刺激。 割口、疏蕾：在菇蕾直径为1cm左右，在原基口附近薄膜割破3/4,1/4留在筒口，弃弱留强，注意菇蕾艰巨，防止挤压变形。 环境调控：湿度在74%一下是首要条件。温差刺激是菇体健壮发育的必要条件，低温型要求较大温差，中温型要求温差在5度以上。光照，适宜光照时提高花菇品质必不可少的条件，增加光照是加速菇盖表面水分蒸发，须随气温调整。微风，对诱导花菇形成起重要作用。补水，外干内湿，多采用高压注水法补水，并尽量加大水温与筒温之差。第十二章 金针菇栽培1.请叙述金针菇再生法栽培特点？答：再生法栽培的金针菇出菇整齐，便于管理，性状好看，适于市场，产量较高。再生法整个工艺分为“开包”，“套包”， “吊包”三道工序。1.开包 菌包生理成熟后通过降温刺激使栽培包从营养生长转入生殖生长，诱导菇蕾形成，当菇蕾形成后，不急于开袋，让其继续在包内高浓度的二氧化碳环境下，菌柄伸长，形成密集菇蕾丛，此时拔除棉花塞和环套，用小刀将栽培包口上的塑料膜割除，称之为开包，随后移入菇房，是温度在68度，湿度在85%-90%。2.套包 当新菇蕾形成馒头形，将栽培包套入另一对折径19.5cm*40cm*0.0045cm塑料袋内，使之有更大的生长空间。3.吊包 套包第五天，将栽培包从第一、二层吊下来放在底层，45天后可采收。2.学习完本章后，你对食用菌设施栽培有何新认识?答：设施栽培就要各流程尽量机械化，标准化。1.通过管理尽可能使同一批菇出菇整齐，采收集中，提高设备、菇房利用率，提高产量。2.设施栽培各环节都要规范操作，任何环节出错，都会带来巨大的经济损失。3.整个过程中做好记录，一旦出现问题，及时发现并及时纠正。第十三章 杏鲍菇栽培1.杏鲍菇填料方法与金针菇有何相同之处和不同之处？答：相同之处： 1.两者均可采用手工填料和机械打包两种方式2.两者均采用聚丙烯塑料袋。3.两者到要求菌袋表面光滑，无皱折，预留孔均在正中间。不同之处：1.杏鲍菇采用喇叭口塑料环套套紧，塞上棉塞后还要盖防潮盖。金针菇不需要。2.金针菇填料高度15cm，杏鲍菇18cm，为了保证预留孔不被堵塞需在预留孔内插专用塑料棒，接种时再拔出。2.杏鲍菇菇体变软，发臭是什么原因造成的？答：由于杏鲍菇在出菇期间，出现高温（20以上）、高湿、通风不良等现象，导致感染了细菌（细菌类假单胞杆菌）而造成的。防治方法：第一，在出菇期间，当温度高于18时，切勿向子实体喷水，只能向地面和四周墙壁上喷水来增加湿度。第二，出菇期间，要加强通风换气管理，避免出现高温、高湿环境。每次喷水后，结合进行通风换气管理，降低菇体表面上水分，可防止细菌性病害。第三，出现病害后，及时摘除病菇，加强通风换气管理，防止传染其他菇体3.杏鲍菇菇蕾形成后为什么要疏蕾？如何进行？答：杏鲍菇与其他菇类不同，只要生理成熟，有温差刺激，环境条件适宜时，就可以在栽培包表面出现大量原基，如果任其发展，就可能出现大量小型菇蕾达不到商品菇要求，为了提高质量，就需要进行人工疏蕾，控制菇蕾数量。用专用刀将劣质菇切掉，每袋仅留下3个健壮菇蕾，不能留过多，营养供应分散，商品菇比例减少。第十八章 银耳栽培1.银耳纯白菌丝和香灰菌丝形态上有所不同，它们之间存在什么样的关系？答：银耳纯菌丝：在PDA培养基上，为纯白菌丝，表现为短而密，前端整齐，培养初期为白绒绣球状，生长极为缓慢，每日仅生长0.1cm。香灰菌丝：在PDA上，菌丝细长，呈羽毛状分支，爬壁力极强，生长速度极快，35天即可长满试管，并自行分泌黑褐色色素，使培养基变黑，最适温度28度。两者关系为单向共生关系，属混合菌丝类型。香灰菌丝将培养基内的纤维素，半纤维素等大分子物质降解成可溶性营养物质，再供给银耳菌丝吸收利用。2.银耳生活史与香菇生活史有何相同之处和不同之处？答：相同处：两者均是异宗结合的四极性菌类，都是由可亲和得单核菌丝间相互结合，质配形成有锁状联合的双核菌丝，双核菌丝生理成熟后形成原基并分化成菇类和耳类。并且都可以在子实体上形成担孢子弹射出去。不同之处：银耳担孢子有时会反芽殖产生大量分生孢子，环境适宜时萌发形成单核菌丝，无论单核菌丝还是双核菌丝在受到环境条件刺激时又断成许多节子，等到带栽培条件适宜又萌发形成双核菌丝，香菇不具有此现象。另外，银耳菌丝需要与香灰菌丝共生才能进一步生长发育形成原基并分化成银耳。3.银耳棒式栽培主要技术措施是什么？答：1.银耳棒长，细，容易用机械填料而不易人工。2.装棒扎口后，就打接种穴，贴封胶布不易发生胀棒现象。3.填料后，立即灭菌，防止培养基泛酸。4.接种时，将银耳菌丝和3倍的香灰菌丝碾碎，两者混合，多余的香灰菌丝弃之不用，不可贪多，接种时，撕开胶布一角，菌种略低于棒面1-2mm，利于原基形成，随后贴回胶布。5.接种后，菌棒堆叠定植，后拆堆。6.接种穴内有白毛团出现时，将胶布撕开，在贴在棒面，形成通气孔。7.当白毛团角质化时，揭开胶布，盖报纸。4.如何满足银耳棒式栽培各生长期对氧的需求？答：1.菌丝定植阶段不用为供氧进行特殊处理，在接种后10 d左右的培养，菌斑直径可达到10cm，穴与穴之间菌斑交接，这时袋内的氧气耗尽，菌丝生长受阻，需要揭胶布通气。2. 揭胶布通气后，菌丝呼吸作用加快，室内二氧化碳浓度增加，因此需要注意加强通风换气，每天结合喷水进行通风，即在喷水前打开门窗，喷水后继续通风30min再关闭门窗。3. 当接种穴内白毛团胶质化，形成耳芽，这时揭去胶布，并用锋利小刀延着接种穴边缘割去约1cm左右的塑料膜，使穴口直径达到45cm。割膜扩穴时，切勿割伤菌丝体。随后在菌袋上盖一层旧报纸，经常在报纸上喷水，保持报纸湿润，但不积水。每天掀动报纸一次进行通风换气，也避免菌丝长到报纸上。4. 扩穴后，每隔45d应把覆盖的报纸取下，在太阳下暴晒消毒，同时也让子实体露出通风810h，再盖上报纸保湿。这样干湿交替，有利子实体生长健壮。如果耳片干燥，边缘发硬，收起报纸，可直接向耳片喷少量喷状水，通风后再盖上报纸。5.银耳子实体在进入成熟期时，注意开窗通风，尤其在温度高于26度时，全天开窗通风。第十九章 草菇栽培1.废棉发酵料栽培技术要点是什么？答：1.将购买的自然棉拆散，加其质量10%-15%的石灰水，倒入模具，捣实，使废料充分吸水，建堆，发酵12天，撤堆。2.撤堆后，将培养料搬入栽培室上架，采用室外蜂窝煤加温，培养料进房后，马上将室内温度提高至6575度，料温控制在63度左右，维持68小时，待料温降至38度左右，抢温播种，随后盖上塑料薄膜12天，以免菌种失水。3.香菇菌丝生长极快，仅几天就蔓延整个培养料，光线对香菇子实体形成影响很大，在完全黑暗条件下不形成子实体，需散射光诱导，光线强，子实体健壮，色泽深，适宜光强度为300500lx，所以在出菇房的前后和门窗都使用透光比较好的薄膜，另外适当通风换气，温度控制在3032度，湿度90%，很快会出现菌丝扭结团，随后很快分化。形成纽扣型菇蕾，再发育成蛋形草菇。2.草菇熟料栽培的技术要点是什么？答：1.浸草，将稻草置于4%石灰水浸泡610小时，捞起晾干，含水量控制在70%-75%，切成1520cm短稻草。2.拌料：稻草50kg，麸皮5kg，石膏粉0.75kg，钙镁磷肥0.5kg混合均匀，充分搅拌。3.装袋：选对折径为2224cm，质量好的低压聚乙烯塑料薄膜筒，切成长55cm，一头用塑料绳活口扎紧，往里装料压紧，离袋口23cm处活口扎紧，每袋可装料0.6kg。4.常压灭菌：装袋灭菌必须在一天内完成，灭菌时23小时，温度升至100度维持45小时，不宜过长，以免酸化，主要作用是经过高温，营养物质热浸提出，马上就可被草菇菌丝利用，同时杀死部分杂菌。不需彻底灭菌。5.接种：接种时用气雾效度盒进行消毒，料温降至38度即可接种，开放式接种，750ml菌种瓶可接1214袋。6.发菌管理：室温保持2832度，料温33度左右，空气相对湿度70%左右，当菌丝生长35cm时，将袋口松开，以使氧气进入，促进草菇菌丝生长，注意防止烧菌。7.出菇管理：当菌丝走满袋，走透时，两端开始出现密集灰白色小点，将袋子全部脱掉，盖上薄膜，两天后再打开，同时加强室内通风换气透光。减小温差，稳定温度，保持湿度，注意通风换气，调节光线。3.废棉，稻草混合发酵料栽培技术要点是什么？答：1.培养料配方：干稻草70kg，废棉30kg，干牛粪粉10kg，麸皮5kg，稻草先用1%石灰水浸泡68小时，捞起沥干，废棉先与石灰混合，淋水捣实，充分吸水，再与稻草混合，倒在活动的木框内再次捣实，混合时，铺一层废棉，撒一层牛粪粉与麸皮混合料，再铺一层稻草再撒