低蛋白含量饲料对黄鳝生长和性转变的影响.doc

低蛋白含量饲料对黄鳝生长和性转变的影响摘要：以体重为（） 的黄鳝（ ）为试验对象，以白鱼粉和豆粕作为蛋白源，设计、共个蛋白水平梯度的等能饲料，探讨低蛋白含量饲料对黄鳝生长、性腺发育和性逆转的影响。结果显示，黄鳝的体重、肥满度、日增重、净增重和成活率都随着饲料蛋白含量的增加而显著增加；黄鳝的性腺指数随着蛋白水平的升高而增加。低蛋白含量饲料组中，间性和雄性比例明显高于高蛋白含量组，表明低蛋白含量饲料对黄鳝的性逆转有促进作用。关键词：黄鳝（ ）；低蛋白；生长；性腺指数；性转变 s ， ， ， ， （ ， / ， ， ， ， ； ， ，； ， ， ， ）： ， ， ， ， ， （） weight， condition factor， daily weight gain， net yield， specific growth rate the gonad somatic index（） s were ，it ： ； ； growth； g ； 黄鳝（ ）俗称鳝鱼，在分类学上隶属于合鳃目合鳃科黄鳝属。合鳃科共属种，在我国仅发现黄鳝属内黄鳝这个惟一种。黄鳝具有性逆转的特性，在自然条件下需要经过年的时间达到性成熟，初次性成熟都是雌性，产卵后性腺开始发生变化，经过较长时间逐步转变为雄性。一般情况下，黄鳝转变成功能性的雄鱼至少需要年的时间，在自然条件下也发现有龄以上的雌性个体。近年来黄鳝自然资源急剧下降，由于雄性亲本的缺乏和雌性绝对怀卵量较小，使得黄鳝的人工繁殖受到限制。如何获得较多的黄鳝雄性亲本和提高雌性的绝对怀卵量成为进行黄鳝人工繁殖的瓶颈问题。推测在不良的环境条件下，例如周期性干旱和食物短缺可能促进黄鳝的性逆转，石琼等报道长期饥饿可以促进黄鳝的性逆转。目前关于低蛋白含量饲料对黄鳝性逆转的报道很少，本试验通过研究低蛋白含量饲料对黄鳝生长和性逆转的影响，旨在为研究黄鳝性逆转和开展黄鳝人工繁殖工作提供一定的理论依据和实践指导。 材料与方法 试验饲料试验共设个组，每组饲料的蛋白含量分别为、和，饲料配方及营养成分含量见表。饲料均以白鱼粉和豆粕作为蛋白源，鱼油作为脂肪源，淀粉作为能量源；其中饲料蛋白含量组作为对照组（）。将各种原料过目筛后充分混匀，制成直径为 的长条状饲料，在室温下烘干后储存于 的冰箱中备用。 试验鱼及饲养管理试验用黄鳝为同批孵化的苗种，由长江大学黄鳝研究所提供，初始体重为（） 。养殖试验在室外池塘的个网箱（ ）中进行，网箱中投放水花生作为黄鳝的栖息环境。试验分为组，每组个平行，每个网箱中投放尾黄鳝，分别投喂对应的饲料。黄鳝在网箱中经过周的驯养后开始正式养殖试验。养殖试验从年月至年月，共个月。试验期间于每天下午左右投喂饲料，投喂量为鱼体重的，次日早晨清理残饵。在水温低于 或高于 时和遇到雷雨天气时则不投喂饲料。从正式养殖试验开始后的第个月取样，每月月底取样次，从每个网箱中随机挑选尾黄鳝，迅速带回实验室检测相关指标。 生长参数和性腺指数的测定试验开始前和结束后分别从每个网箱中随机取尾黄鳝，分别测量其体重（精确度为 ）和体长（精确度为 ），计算初始体重和最终体重、初始肥满度（ ，）和最终肥满度；每次取样后称量其体重，计算日增重（ ，）、净增重（ ，）及特定生长率（ ，）。试验结束后解剖黄鳝，完整地取出性腺，称量其性腺重（精确度为 ），计算其性腺指数（gonad somatic index，）。肥满度；日增重（）（）；净增重（）s（）；特定生长率（）（）；性腺指数性腺重；式中，为黄鳝的体重（），为黄鳝的体长（），、为试验天数（），、为试验第天和天时黄鳝的体重（），为黄鳝的尾数，s为养殖面积（）。 黄鳝性腺组织切片的制作性腺取出称重后，截取其中一段用液固定后脱水，用石蜡包埋，制作切片（厚度 ），染色，用光学显微镜拍照，观察性腺的发育情况。 性别比例和成活率的计算通过肉眼观察性腺发育状况，结合性腺组织切片观察来确定黄鳝的性别。试验结束时统计各组黄鳝的性别，计算性别比例和成活率。性别比例单性个体数样本总数；成活率终末个体数初始样本总数。 数据分析及处理试验数据用 软件进行方差分析、显著性及相关性检验，结果用平均数标准差（x）表示，为差异显著，为差异极显著。 结果与分析 不同蛋白含量饲料对黄鳝生长的影响投喂不同蛋白含量的饲料，各组黄鳝的生长表现出一定的差异（表）。试验结束时，各组黄鳝的体重、日增重和净增重都随着饲料蛋白含量的增加而显著增加。在试验开始时，各组黄鳝的初始肥满度之间均无显著差异；试验结束时各组黄鳝个体大小相差较大，饲料蛋白含量组与组、组与组间最终肥满度差异均不显著，其余各组最终肥满度随着饲料蛋白含量的增加而显著增加。特定生长率在蛋白含量组和组之间差异不显著，其余各组间差异显著。 不同蛋白含量饲料对黄鳝性腺指数的影响试验期间各组黄鳝性腺指数有着相同的变化规律（表）。繁殖期过后性腺指数呈下降趋势，经过越冬期在产卵前性腺指数开始上升，不同蛋白含量的饲料对黄鳝的性腺指数影响较大。各时期黄鳝性腺指数最大值均出现在高蛋白含量组（）中；繁殖期间投喂高蛋白含量的饲料，黄鳝的性腺指数上升的速度较快。为分析不同月份、不同蛋白含量的饲料对黄鳝性腺的影响，进行了蛋白含量和月份的交互作用对性腺指数影响的方差分析（表）。分析结果表明，不同月份、不同蛋白含量以及两者交互作用对黄鳝性腺指数均有极显著影响。 不同蛋白含量饲料对黄鳝性腺发育的影响性腺组织切片表明，各组黄鳝性腺发育的方式是相同的，各组之间没有显著差异。产卵结束后，卵母细胞开始退化，卵巢内出现空隙；越冬期间卵巢内有大量的初级、次级卵母细胞和一些空隙；在繁殖季节前和繁殖期内，雌性性腺处于卵黄发育阶段，卵巢内充满发育成熟的卵母细胞。经过越冬期后，在试验黄鳝中发现有间性和雄性个体存在。在间性个体中，可看见精母细胞夹杂在卵母细胞中，在蛋白含量较低的各组中这种现象比较明显。随着间性个体的发育，雄性精巢组织逐渐扩大，雌性卵巢组织则逐渐萎缩，并且在蛋白含量较低的各组中可见有成熟的雄性个体存在。试验结束时在蛋白含量组中发现有繁殖后的功能性雄鱼。 不同蛋白含量饲料对黄鳝性别比例和成活率的影响黄鳝的性别比例和成活率随着饲料蛋白含量的不同而变化（表）。不同蛋白水平下，各组黄鳝的雌性比例存在显著差异，最高雌性比例出现在高蛋白含量组（）中，雌性比例随着蛋白含量的降低而减少。蛋白含量组和组黄鳝的间性比例比其他各组要低；对照组雄性比例显著低于其他各组，仅为（）。雄性比例最高出现在蛋白含量组中，蛋白含量组中的雄性比例显著高于蛋白含量为组和组（）。同时，蛋白含量组中黄鳝的成活率显著低于其他各组。 讨论本试验结果表明，黄鳝的体重、肥满度、日增重、净增重和成活率均随着饲料蛋白含量的增加而显著增加，说明低蛋白水平的饲料严重影响黄鳝的生长，这与其他学者的研究结果相似。投喂高蛋白水平饲料的尼罗罗非鱼与投喂低蛋白的相比，其生长速度快、食物转换率高、成熟较早，且生殖力和成熟率随着饲料蛋白水平的升高而增加，适宜蛋白含量的饲料能使雄性比例高于雌性比例；罗非鱼不仅生长受饲料蛋白水平的影响，而且其孵化率和受精率也随着蛋白水平的升高而增加。试验中投喂低蛋白水平的饲料，鱼的死亡率较高，这可能是由于营养不平衡和较低的食物转换率所造成的。本试验中黄鳝的性腺指数随着蛋白水平的升高而增加，特别是在繁殖季节前和繁殖期，这种现象更为明显。鱼类卵巢的发育表现为性腺指数的逐步增加，这是其卵巢腔内卵母细胞生长发育的结果，而卵母细胞的生长依赖于卵黄蛋白原的供应。高蛋白水平的饲料有利于卵黄蛋白原的合成，鱼体摄入的蛋白越多，性腺积累的蛋白和脂肪就越多，性腺发育速度也就越快，沈文英等的研究也表明饥饿能显著降低银鲫的性腺指数。通过观察性腺组织切片发现，黄鳝的性别比例与蛋白水平相关。低蛋白含量组中间性和雄性比例明显高于高蛋白组，高比例的雌性出现在蛋白含量最高的对照组中，这表明高蛋白含量饲料能促进黄鳝雌性的发育成熟和抑制性别分化。黄鳝产卵结束后，雌鳝的性腺大小和卵母细胞数量急剧下降，卵巢内可见一些退化的卵母细胞和卵母细胞退化后产生的空隙。在低蛋白含量组中，卵母细胞的退化速度要比高蛋白含量组快，并且卵母细胞的数目要少。从间性个性的性腺组织看，间性初期是在很多卵母细胞中夹杂着一些精母细胞，随着性腺的发育，精母细胞不断增殖而雌性性腺组织则不断退化，发育的精母细胞和卵母细胞同时存在于生殖腺中，最终雄性性腺完全取代性腺组织中的雌性性腺，意味着完成了由雌性向雄性转变的整个过程。本试验中发现了包含有成熟精子的雄性生殖腺，也发现了产后精巢，意味着性逆转后获得了功能性的雄鱼。自然条件下，黄鳝的性逆转多在食物贫乏的干涸季节发生，因此性逆转的发生除了与生殖适应相关联外，可能也是对环境条件长期适应的进化结果。在性逆转过程中，雌性性腺结构退化，未成熟的卵母细胞内的卵黄被重吸收可能也用于应付食物缺乏的恶劣环境。本试验表明，低蛋白含量的饲料对黄鳝生长和性腺发育有显著影响，对黄鳝的性逆转有促进作用，这一结果支持了食物短缺可促进黄鳝性逆转的推测；但是最终揭示黄鳝性逆转的机制和如何有效控制黄鳝的人工繁殖还需进一步的研究。参考文献： ， ，： 杨代勤，陈 芳，阮国良，等黄鳝性转变与体重、年龄的关系 长江大学学报（自然科学版），（）： 贺顺连，刘学文，郭照良，等 种黄鳝遗传多样性分析 湖南农业大学学报（自然科学版），（）： 尹绍武，李建中，周工健，等 黄鳝