马铃薯 马铃薯球蛋白 等电聚焦 纯化 结构分析.doc

马铃薯论文：马铃薯22-KD球蛋白的分离纯化及其结构测定的研究【中文摘要】以荷兰马铃薯为原料,采用Osborne法提取马铃薯球蛋白(tuberin),通过单因素试验,对其提取工艺进行优化。试验结果表明：料液比1：12,温度35,浸提时间1h, NaCl浓度为1mol/L,提取次数为2次的条件下,马铃薯球蛋白提取率较高,达85%。采用半微量凯氏定氮法与等电聚焦技术分别测定粗球蛋白中的蛋白含量及其等电点,试验结果表明：粗品中球蛋白含量为96.7%,该蛋白存在3个等电点,分别为5.83、6.0、6.7。马铃薯球蛋白(tuberin)是马铃薯中三大主要贮藏蛋白之一,主要分布在马铃薯块茎中,占整个马铃薯蛋白的25%左右。它是一种易溶于盐的蛋白质,其含有较高的亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸等,其必需氨基酸明显高于FAO/WHO的推荐值,因此,对食品加工来说它是一种很好的蛋白质原料来源,具有很好的应用前景。将提取得到的马铃薯粗球蛋白,采用Sephadex G-50和DEAE-Cellulose 52阴离子交换剂纯化技术分离22-KD马铃薯球蛋白,纯化后在280nm下测得一个吸收峰,经SDS-PAGE测定其相对分子量为22-KD,此时洗脱液中盐离子浓度为0.67 mol/L。.【英文摘要】The crude tuberin was extracted from the Netherlands potato by Osborne method, optimization its extraction craft by single factor experiment. The results showed that when the dosage liquor ratio is 1:12, temperature is 35, diffusion time is 1h, the concentration of NaCl is lmol/L, extracted twice, the extraction ratio was 85%.Take semimicro Kjeldah method and isoelectric focusing technology determined the protein level and isoelectric points of crude tuberin, the results showed that the protein level i.【关键词】马铃薯 马铃薯球蛋白 等电聚焦 纯化 结构分析【英文关键词】Potato Tuberin Isoelectric focusing Purification Structural analysis【索购全文】联系Q1：138113721 Q2：139938848【目录】马铃薯22-KD球蛋白的分离纯化及其结构测定的研究摘要4-5Abstract5第一章 前言8-161.1 马铃薯及马铃薯蛋白概况8-91.2 马铃薯蛋白质的功能性质及研究现状9-101.2.1 马铃薯蛋白质的功能性质和作用91.2.2 马铃薯蛋白功能性质的国内外研究现状9-101.3 马铃薯球蛋白的功能及国内外研究现状10-111.3.1 马铃薯球蛋白在生化、食品添加剂、饲料等领域的功能和作用10-111.3.2 马铃薯球蛋白的国内外研究现状111.4 蛋白质纯化技术与结构分析技术简介11-151.4.1 蛋白质纯化技术11-141.4.2 蛋白质二级结构分析技术14-151.5 课题研究的意义及内容15-161.5.1 研究意义151.5.2 研究内容15-16第二章 马铃薯球蛋白的提取及其等电点的测定16-242.1 材料与方法16-182.1.1 材料162.1.2 主要仪器和设备162.1.3 试验方法16-182.2 结果与讨论18-222.2.1 SDS-PAGE18-192.2.2 马铃薯球蛋白提取工艺单因素试验19-222.2.3 马铃薯球蛋白蛋白含量测定222.2.4 等电聚焦测定马铃薯球蛋白的等电点222.3 本章小结22-24第三章 22-KD马铃薯球蛋白的分离纯化及其结构研究24-333.1 试验材料与方法24-263.1.1 试验材料及主要试剂243.1.2 主要仪器及设备24-253.1.3 试验方法25-263.2 试验结果与讨论26-323.2.1 Sephadex G-50纯化马铃薯球蛋白26-273.2.2 DEAE-Cellulose 52阴离子纯化马铃薯球蛋白27-283.2.3 22-KD马铃薯球蛋白的氨基酸组成分析28-293.2.4 22-KD马铃薯球蛋白的X-粉末晶体衍射(XRD)分析29-303.2.5 2