第三节 亚慢性和慢.ppt

第三节亚慢性和慢性毒性试验 人类接触环境污染物时 通常接触水平低于急性中毒剂量或浓度 为了得到更接近实际情况的毒作用资料 需要进行亚慢性和慢性毒性试验 亚慢性毒性试验 一 试验时期在相当于动物生命周期的1 30 1 20的时间内进行 二 试验途径使动物每日或反复多次接触受试物的毒性试验 三 试验目的为进一步对受试物的主要毒作用 靶器官和最大无作用剂量或中毒阈剂量做出估计 四 试验应用通过亚慢性试验可以为慢性试验观察指标以及实验设计提供参考 亚慢性毒性试验程序 以哺乳动物为例 1 试验动物及分组应当是急性毒性试验证明的对受试物敏感的动物种属和品系 试验至少设3个剂量组和1个对照组 2 染毒剂量和试验期限 高剂量组能引起明显的中毒反应 但不引起很多动物死亡 低剂量组不引起任何中毒反应 介于高低剂量组之间的为中间剂量组 一般用LD50 LC50 的1 80 1 50作为亚慢性试验剂量 试验期限随目的和要求或动物不同而异 3 染毒途径 亚慢性毒性试验中接触外来化合物的途径 应尽量模拟人类在环境中实际接触的方式或途径 主要是经胃肠道 经口 呼吸道及皮肤接触 染毒途径还应与预期进行慢性毒作用试验的接触途径相一致 4 观察指标 一般综合指标 一般活动 癌症和死亡情况 称重 饲料或饮水量 计算生长率等 血液及生化检验 主要指血清和肝 肾功能的检验 如血红蛋白 红细胞数 白细胞数等 病理组织学检查 如试验过程中解剖死亡或濒临死亡动物 试验结束时 处死所有的动物进行尸检等 5 试验评价由试验结果可对受试物的主要作用 靶器官和最大无作用水平及中毒阈剂量做出初步估计 并为进一步开展慢性毒性试验提供依据 慢性毒性试验 慢性毒性试验的定义 慢性毒性试验是指以低剂量外来化合物 长期与试验动物接触 观察其对试验动物所产生的生物学效应的试验 慢性毒性试验的作用 通过慢性毒性试验 可以确定最大无作用剂量 为制订人体每日允许摄入量 AllowableDailyIntake ADI 和最高容许浓度 MaximamAllowableConcentration MAC 提供毒理学依据 慢性毒理试验程序 以哺乳动物为例 1 试验动物及分组选用断乳的动物 年龄应低于亚慢性试验动物的年龄 设置3至4组剂量组和1组对照组 其他的要求同亚慢性试验 2 染毒剂量和试验期限 高剂量组能引起明显的中毒反应 低剂量组不引起任何中毒反应 在高低剂量组之间再设1至2个剂量组 可根据亚慢性试验资料 取其最低中毒剂量的1 10 1 20 1 50 或LD50的1 100 1 20中取3至4个剂量 作为慢性试验剂量 试验期限为1至12个月 如果包括致癌试验应为18至24个月 3 染毒途径与亚慢性毒性试验相同 4 观察指标基本与亚慢性试验形同 5 试验评价 对受试物在低剂量长时间接触机体时所引起的毒性作用有更深入的了解 可依据敏感观察指标出现异常的最小阈剂量 找出该受试物慢性毒理作用的最大无作用剂量 为受试物能否应用或为制定其在环境中卫生标准 提供最重要的依据 由于试验是在受试动物生命期的绝大部分时间进行 其间通过对动物的一般观察及其对各脏器的病理学检查 对受试物的致癌性评定亦可提供一个参考价值的依据 第四节蓄积毒性试验 一基本概念低于中毒阈剂量的外来化合物 反复多次地与机体持续接触 经一定时间后使机体出现明显的中毒表现 即为蓄积毒性作用 这种蓄积毒性作用 是由于外来化合物进入机体的速度大于有机体消除的速度 而使外来化合物在体内的量不断积累 达到了使机体引起毒性作用的阈剂量所致 二环境污染物在体内蓄积作用的过程 1 物质积累过程 剂量蓄积 环境污染物不断进入机体内 其吸收量大于排出量 使其在体内的量逐渐积累增多 此种量的蓄积称为物质积累 2 功能蓄积过程 效应蓄积 不断进入机体内的环境污染物 反复作用机体 引起机体一定结构或功能的变化 并逐渐累积加重 最后导致出现损害作用 此种蓄积称为功能蓄积 三蓄积毒性试验研究的意义 环境污染物在体内的蓄积作用 是引起亚慢性和慢性毒性作用的基础 因而蓄积毒性作用常常是评估环境污染物毒性作用的指标之一 也是制订其在环境中的卫生标准的重要参考依据 四蓄积毒性试验的试验方法 1 蓄积系数法所谓蓄积系数是分次给受试物后引起50 受试物出现某种毒效应的总剂量 以 LD50 n 表示 与一次给受试物后引起的50 受试物出现同一毒效应的剂量 以 LD50 1 表示 的比值 即蓄积系数 LD50 n LD50 1 比值愈小 表示蓄积作用愈强 根据蓄积系数大小 可将环境污染物的蓄积作用强度分为以下几级 2 20天蓄积试验法 略 3 受试物生物半减期测定法生物半减期是指一种外来化合物在体内消除到原有浓度 或量 的一半所需要的时间 因此 生物半减期越长的物质 表示越不容易