高效液相验证方案.doc

编号：EV- 高效液相色谱仪验证方案验证方案起草人： 日期：验证方案批准人： 日期：南京东沛国际贸易集团有限公司 目录1. 引言2. 安装验证3. 操作验证3.1 试验项目及限度3.2 实验方法3.2.1流量控制阀3.2.2GM-150混合器3.2.3柱温箱3.2.4UV检测器准确度3.2.5UV检测器基线噪音4. 性能验证5. 责任6. 时间安排仪器名称：实验室用高效液相色谱仪生产厂家及型号：Waters in USA，1525泵、1500series柱温箱、2487检测器设备登记号：HY-0171. 引言为确保仪器在使用中符合原设计的要求，并达到原拟订的目的，产生可信赖的量测结果，对仪器进行安装验证（IQ）、操作验证（OQ）、及性能验证（PQ）。 当仪器首次安装调试、经过一定周期（一年）或者变更位置时进行该验证。2. 安装验证2.1参加人员：2.2检查清单：表1：检查清单名称数量存放处负责人签收定购清单1份QC-114室产品授权书3份QC-114室PCI BusLAC/E1张QC-114室1525泵1台QC-114室7725i进样器1个QC-114室1500series柱温箱1个QC-114室2487检测器1台QC-114室配件1盒QC-114室2.3维修服务联系人：单位：地址：电话：传真：2.4结论：所有物品应与检查清单相符，实验室水、电、气设计安装合理，实验室通风系统运行良好则符合仪器安装要求。3 操作验证确认仪器在操作极限内能正常运转，由装机工程师及操作者共同完成。每过一个周期要对该项进行例行验证。若仪器有移动、维修、更换主组件或增加新配件时必须对仪器部分OQ非例行性验证。3.1试验项目与限度（表2）表2：试验项目与限度设备名称组件实验项目限度泵A/B流量控制阀流量稳定性1.0%GM-150混合器梯度准确性0.5%柱温箱温度控制器温度准确性1.0温度精密性0.5UV检测器单色器波长准确性1.0nm基线噪音优于0.35105AU3.2试验方法3.2.1流量控制阀方法：泵流量设为1ml/min,将5ml的容量瓶接在泵出口处，在溶剂流入容量瓶的同时计时，至5ml标线时停止计时，计下测量时间。间隔约10min再测量一次。重复测三次以上， 求平均值 ()计算出时间测量最小值及最d大值与平均值的相对偏差SRMAX、SRMIN。表3：流量稳定性流量mlmin-11次2次3次4次SRMAXSRMIN限度A泵：1ml/min1.0%B泵：1ml/min1.0%结论：A、B两泵分别测定，两泵流量稳定性均应低于1.0%，符合要求。3.2.2 GM-150混合器：方法：设定流动相A和B比例为1：1，流速为1.0ml/ min。取两个10ml量筒，分别装入流动相A、B，开始运行，同时计时。5ml时记录消耗流动相A、B体积，重复三次。表4：梯度准确性流动相一次体积ml二次体积ml三次体积ml平均值允许偏差实际偏差AB结论：实际偏差在限度以内则符合要求。3.2.3柱温箱方法：温度计为37，将一经校正的温度计放入柱温箱，每30min读取温度计及标准面板显示温度一次，共读5次。表5：柱温箱检查项 目30min60min90min120min150min180min温度计示数工作站示数结论：温度计示数偏差应小于1，符合规定。工作面板示数波动应小于0.5。精密度符合要求。3.2.4 UV检测器波长准确性方法：已知苯在233.9nm、238.9nm、243.3nm、248.5nm、254.5nm、260.6nm有特征吸收，故配置100mg/ml苯的乙醇溶液运行“Sample scan”程序。表6：波长准确性规定实测误差规定实测误差结论：波长误差均应小于3nm，符合规定。3.2.5 UV检测器基线噪音： 方法：双波长基线噪音测定：以水和甲醇先后冲洗系统0.5h，然后由流动相的检测器入口处充氮气20min左右，停止后，设A=254nm、B=280nm, 2.0 sec.time constant(TC). 记录工作站面板示数。表7：基线噪音记录时间5min10 min15 min20 min25 min30 min35 min40 minAU值结论：40min内读数变化应在2.510-5之间，则符合规定。4性能验证方法：柱子首次使用前应执行柱效验证，用下述方法进行柱效测试，当柱子柱效降低或超长时间使用时也应进行柱效测试。执行柱效测试包括以下4项内容：1.平衡色谱柱。2.准备二氢苊标准品溶液。3.进样运行。4.检验柱效操作步骤：1 配置流动相：乙腈：水（60：40），设检测波长254nm，柱温37，流速线速上升（01.0ml/min），达到此条件后平衡20min。2 称取0.05g二氢苊溶于100ml乙腈中，即可。手动进样10ul，设运行时间10min，记录数据，依下式计算，结论：N应大于9000，