旋光度测定法标准操作规程.doc

旋光度测定法标准操作规程 一、目 的：建立旋光度测定法标准操作规程。二、适用范围：适用于药品旋光度的测定。三、责 任：QC。四、规 程：1 简述：平面偏振光通过含有某些光学活性化合物的液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或向右旋转。旋转的度数，称为旋光度。偏振光透过长1dm且每1ml中含有旋光性物质1g的溶液，在一定的波长与温度下测得的旋光度称为比旋度。测定比旋度（或旋光度）可以区别和检查某些药品的纯杂程度，亦可用以测定含量。 除另有规定外，本法系采用钠光谱的D线（589.3nm）测定旋光度，测定管长度为1dm（如使用其他管长，应进行换算），测定温度为20，使用读数至0.01并经过检定的旋光计。 比旋度，以表示。使偏振光向右旋转者（顺时针方向）称为右旋物质，常以“+”号表示。使偏振光向左旋转者（反时针方向），称为左旋物质，常以“-”号表示。2 旋光计与性能测试。旋光计又称旋光仪。测定旋光度可用读数至0.01并经过检定的旋光仪。用蔗糖作为基准物进行检定。取经105干燥2小时的蔗糖（化学试剂一级），精密称定，加水溶解，并定量稀释至1ml中含0.2g的溶液依法测定，结果在20时比旋度应为+66.60。用蔗糖检定时蔗糖的纯度、水分都必须符合要求，称量和稀释也必须非常准确，否则测定结果容易产生误差。而且蔗糖溶液易生霉不能长时间放置。目前国际上多不采用标准糖液法校验仪器，国际统一糖分析委员会（ICUMSA）推荐用旋光标准石英管校准仪器，我国国家技术监督局颁布的旋光仪检定规程，也采用旋光标准石英管校准仪器，中国药典2000、2005年版也已改用此法。 鉴于我国国家技术监督局已有旋光标准石英管供应，目前仪器检定除可按中国药典1990年版采用的蔗糖法检定外，尚可用两支“+”和“-”的旋光标准石英管检定，可用+5和-1标准石英管，检定方法可参照JJG675-90规定，要求在规定温度下，记录仪器的零点值，再放上旋光标准石英管，读取仪器示值，如此反复测定6次，按规定处理测定结果，与示值不能超出0.01。另外并要求将测定管旋转不同角度和倒向测定，误差都不得大于0.04。3 样品测定操作法。3.1按各该品种项下规定的方法配制供试品溶液，在规定的温度和放置时间内测定。3.2测定前首先应将室温调至规定温度，然后用配制供试品的空白溶液校正零点或测定停点，以便扣除零点。3.3将测定管用供试液体或溶液（取固体供试品，按各品种项下的方法制成）冲洗数次，缓缓注入供试液体或溶液适量（注意勿使发生气泡），置于旋光计内检测读数，即得供试品的旋光度，用同法读取旋光度3次，取3次的平均值，计算。4 计算与结果判断。4.1供试品的比旋度按下列公式计算： 液体供试品= 固体供试品= 式中 为比旋度；D为钠光谱的D线； t 为测定时的温度； l 为测试管长度，dm； 为测得的旋光度； d 为液体的相对密度； c 为每100ml溶液中含有被测物质的重量（按干燥品或无水物计算），g。4.2结果的判断：旋光度测定法多用于比旋度测定，药典规定的比旋度多有上下限度或最低限度，可根据上述计算公式得出供试品比旋度，判断样品是否符合规定。4.3用旋光度测定法作含量测定时应当称取供试品2份做平行试验。2份供试品测定结果其相对误差应在0.02以内，否则应重做。5 测定操作注意事项。5.1每次测定前应以溶剂作空白校正，测定后再校正1次，以确定在测定时零点有无变动；如第2次校正时发现零点有变动，则应重新测定旋光度。5.2对温度有严格要求的供试品，在测定前应将仪器及供试品置规定温度的恒温室内，或用恒温水浴恒温至少1小时，如无特殊规定，温度均应调节至（200.5）。 5.3未接通电源前应检查仪器样品室内有无异物，钠光灯和其它示数开关是否放在关或规定的位置，仪器放置是否合适。钠光灯启动后仪器不许搬动，以免损坏钠光灯。具有直流极性开关的仪器应适当选择转换方向。5.4钠光灯启动至少20分钟后发光才能稳定，测定或读数时应在钠光灯稳定后读取，测定时钠光灯尽量使用直流电路供电。不测定时间间隔可置于交流供电，以延长钠灯寿命。5.5测定零点或停点时，必须按动复测按钮数次，使检偏镜分别向左或向右偏离光学零位，减少仪器的机械误差。同时通过观察左右复测数次的停点，检查仪器的重复性和稳定性，必要时也可用旋光标准石英管校正仪器的准确度。5.6测定管若有气泡，应先使气泡浮于凸颈处或除去。透光面两端的玻璃应用软布擦干，测定管两端的螺帽应旋至适中位置，过紧容易产生应力，过松容易漏液。测定管旋转时应注意标记的位置和方向。读取零点或停点应重复3次。5.7往测试管加入供试品溶液时，应反复用供试品溶液冲洗测试管数次，以免供试液浓度改变。供试的液体或固体物质的溶液应充分溶解，供试液应澄清。5.8物质的比旋度与测定光源、测定波长、溶剂、浓度和温度等因素有关。因此，表示物质的比旋度时应注明测定条件。5.9有些化合物见光后旋光度变化很大，应绝对避光操作，有些化合物对放置时间要求很严格，必须完全按照规定的时间测定读数。5.10仪器的各个光学镜片应保持干燥清洁，防止灰尘和油污的污染。钠灯有一定的使用寿命，连续使用一般不超过4小时，亦不准瞬间内反复开关。5.11测定结束后测试管必须洗净晾干，以备下次再用，不准许将盛