实验十一酶的特性.doc

实验十一 酶的特性目的进一步理解酶的有关性质，如温度对酶活力的影响、pH值对酶活力的影响、酶的激活与抑制及酶的专一性。一、温度对酶活力的影响原理酶的催化作用受温度的影响，在最适温度下，酶的反应速度最快。大多数动物酶的最适反应温度为3740，植物酶的最适反应温度为5060。酶对温度的稳定性与其存在形式有关，有些酶的干燥制剂，虽加热到100其活性并无明显改变，但在100的溶液中却很快完全失去活性。通常低温能降低或抑制酶的活性，但不能使酶失活。器材试管及试管架。恒温水浴。冰浴。沸水浴。试剂含0.3氯化钠的0.2淀粉溶液：需新鲜配制。稀释200倍的唾液：用蒸馏水漱口，以清除食物残渣。再含一口蒸馏水，30s后使其流入量筒并稀释200倍(稀释倍数可根据各人唾液酶活性调整)，混匀备用。碘化钾-碘溶液：碘化钾20g及碘10g溶于100ml水中，使用前稀释10倍。操作淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色。糊精按其分子的大小，遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘不呈颜色，麦芽糖遇碘也不呈色。在不同温度下，淀粉被唾液淀粉酶水解的程度，可由水解混合物遇碘呈现的颜色来判断。取3支试管，编号后按下表加入试剂，摇匀后，将1号、3号试管放入37恒温水浴中，2号试管放入冰水中。10min后取出，将2号管内液体分为两半，用碘化钾-碘溶液来检验1、2、3管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。记录并解释结果，将2号管剩下的一半溶液放入37水浴中继续保温10min后，再用碘液实验，结果如何?表 温度对酶活影响实验操二、pH值对酶活性的影响原理酶的活力受反应溶液中pH值的影响极为显著，不同酶的最适pH值不同。本实验观察pH值对唾液淀粉酶活性的影响。器材试管及试管架。移液管。滴管。50ml锥形瓶。恒温水浴。试剂新配制的溶于0.3氯化钠的0.5淀粉溶液。 稀释200倍的新鲜唾液。 0.2molL磷酸氢二钠溶液。 0.1molL柠檬酸溶液。 碘化钾-碘溶液。 pH试纸：pH58范围的试纸。操作 取4个标号的50ml锥形瓶。用移液管按下表添加0.2molL磷酸氢二钠溶液和0.1molL柠檬酸溶液以制备pH58的4种缓冲液。表 pH对酶活影响实验操作 从4个锥形瓶中各取缓冲液3ml，分别注入4支带有标号的试管中，随后于每个试管中添加0.5淀粉溶液2ml和稀释200倍的唾液2ml。向各试管中加入稀释唾液的时间间隔各为1min。将各试管内容物混匀，并依次置于37恒温水浴中保温。 第4管加入唾液2min后，每隔1min由第3管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加1小滴碘化钾-碘溶液，检验淀粉的水解程度。待混合液变为棕黄色时，向所有试管依次添加12滴碘化钾-碘溶液。添加碘化钾-碘溶液的时间间隔，从第一管起，亦均为观察各试管内容物呈现的颜色，分析pH值对唾液淀粉酶活性的影响，并指出唾液淀粉酶的最适pH值。三、唾液淀粉酶的活化和抑制原理 酶的活性受活化剂或抑制剂的影响。氯离子为唾液淀粉酶的活化剂，铜离子为其抑制剂。器材 恒温水浴。 试管及试管架。试剂 0.1淀粉溶液。 稀释200倍的新鲜唾液。 1氯化钠溶液。 1硫酸铜溶液。1