浅议黄芩苷对卡氏肺孢子虫肺炎大鼠SOD和MDA影响.doc

浅议黄芩苷对卡氏肺孢子虫肺炎大鼠SOD和MDA影响.txt51自信是永不枯竭的源泉，自信是奔腾不息的波涛，自信是急流奋进的渠道，自信是真正的成功之母。浅议黄芩苷对卡氏肺孢子虫肺炎大鼠SOD和MDA影响【摘要】 目的 研究黄芩苷对卡氏肺孢子虫肺炎(PCP)大鼠血清和肺组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的影响，探讨中药黄芩苷对PCP大鼠的抗氧化作用。方法 给SD大鼠皮下注射地塞米松磷酸钠建立PCP动物模型，观察黄芩苷对PCP模型建立前后肺组织病理及血清和肺组织中SOD活性和MDA含量的影响，研究中药黄芩苷对PCP大鼠的抗氧化作用。结果 黄芩苷可使大鼠肺组织炎症明显减轻，血清和肺组织中SOD活性高剂量组分别为(1075.699.91)和(1235.73202.52) U/mL，显著高于模型组的(664.14245.76),(290.2039.68)U/mL;MDA含量分别为(1.670.57),(1.730.35)nmol/(mg prot)显著低于模型的(8.460.78)和(28.007.43)nmol/(mg prot)。结论 黄芩苷对PCP大鼠具有一定的抗氧化作用，能够降低MDA含量和升高SOD活性，减轻炎症反应。 【关键词】 黄芩苷;卡氏肺孢子虫肺炎;超氧化物歧化醇(SOD)：丙二醛(MDA)Influence of baicalin on superoxide dismutase and malondialdehyde in rats with Pneumocystis carinii pneumonia ZHOU Ling,ZHOU Biying.Department of Traditional Chinese Medicine,the Affiliated Hospital of Zunyi Medical College(Zunyi 563003,China)Abstract： Objective To study the influence of baicalin(Bai) on superoxide dismutase(SOD) and malondialdehyde(MDA) on Pneumocystis carinii pneumonia(PCP) model rats.Methods SpragueDawley(SD) rats were subcutaneously injected with dexamethasone sodium phosphate.The treatment group was treated by baicalin before and after the PCP model established.The pathological change in lung tissue and the level of SOD and MDA in sera and lung homogenate were observed.Results Compared with model group,Bai lightened the inflammation of lung tissue, increased the activity of SOD and decreased the content of MDA in the sera and lung homogenate with significant difference.Conclusion Bai has antioxidation effect in the treatment of PCP in rats and may decrease the content of MDA and increase the activity of SOD and lighten the inflammation reaction in PCP rats.Key words：baicalin;Pneumocystis carinii pneumonia;superoxide dismutase;malondialdehyde肺孢子虫是一种可以感染人体及多种动物的机会致病性病原体。在2001年的国际会议上将感染大鼠的肺孢子虫命名为卡氏肺孢子虫(pneumocystis carinii,PC)，引起卡氏肺孢子虫肺炎(pneumocystis carinii peneumonia,PCP)，是免疫功能低下者(如肿瘤放化疗者、器官移植术者或其他免疫功能失调者等)，尤其是人类免疫缺陷病毒(HIV)患者最常见的并发症，具有较高的发病率和死亡率1。其首选药物磺胺存在长期用药副作用多，部分顽固性病例疗效不理想等缺点2。黄芩苷是中药黄岑的主要有效成分之一，属于黄酮类化合物，具有多种药理作用，如抗炎、抗菌、抗病毒等，同时还是一种天然的抗氧化剂，具有清除人体中超氧离子自由基，增强机体免疫力等生理活性。本研究通过观察黄芩苷对卡氏肺孢子虫肺炎大鼠的抗氧化作用及改善肺部炎症的作用，探讨卡氏肺孢子虫肺炎的病理生理学机制，为PCP的抗氧化治疗提供科学依据。1 材料与方法1.1 材料 动物：清洁级(SD)大鼠50只，雌性，体重180220 g(第三军医大学动物实验中心);合格证号：sCXK-(军)2007-017;购入后适应性饲养1周。试剂：地塞米松磷酸钠注射液(贵州光正制药有限责任公司);四环素片(贵州同济堂制药有限公司);复方磺胺甲基异恶唑片(西南药业股份有限公司);黄芩苷(四川什坊市健福植物原料有限公司)(批号：080411，含量98%以上)，淡黄色粉末，临用前用生理盐水稀释，用NaHO3调pH值至7.4，至黄芩苷完全溶解);超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和考马斯亮兰蛋白测定试剂盒(南京建成生物工程研究所)。721型可见光分光光度计(上海申化仪表自控公司)。1.2 方法1.2.1 PCP大鼠模型的建立 按文献3建立PCP模型，每周2次在腹股沟皮下注射地塞米松磷酸钠3.5 mg/只，连续6周，同时在饮水中加入1 mg/mL四环素以预防继发性细菌感染。普通饲料喂养，由本院实验动物中心按标准配方配制。1.2.2 实验分组与治疗方法 黄芩苷，按每只鼠100 mg/kg计算;预防组，免疫抑制3周后，给予黄芩苷25 mg/只灌胃;低、中和高剂量组，免疫抑制6周后，分别给予黄芩苷25，50和100 mg/只灌胃;阳性药对照组，免疫抑制6周后，每只大鼠给予250 mg/kg磺胺甲基异恶唑(SMZ)+50 mg/kg甲氧苄胺嘧啶(TMP)灌胃;模型组，免疫抑制6周后，不予任何药物治疗;正常组，不予任何处理。每组7只大鼠，药物均每天1次，连续给予2周。 医学论文网1.2.3 标本采集 实验第9周各组大鼠摘眼球取血，室温下静置，2 000 r/min离心10 min，分离血清，留存测血清SOD活性和MDA含量;无菌取出各组大鼠肺脏同一部位，制作肺印片和肺切片。采用六胺银染色油镜下观察肺组织卡氏肺孢子虫(pc)包囊和HE染色光镜下观察肺组织炎症反应程度4;余下肺组织取同一部位准确称量，加9倍量冷生理盐水制成10%肺组织匀浆，3 000 r/min离心10 min，取上清，留存测肺匀浆SOD活性和MDA含量。1.2.4 血清SOD活性和MDA含量测定 血清SOD测定采用黄嘌呤氧化酶法，用721分光光度计550 nm波长比色测定;血清MDA测定采用硫代巴比妥酸(TBA)法，用721分光光度计532nm波长比色测定;蛋白质测定采用考马斯亮蓝法。1.2.5 肺匀浆SOD活性和MDA含量测定 肺匀浆SOD测定采用黄嘌呤氧化酶法，用721分光光度计550 nm波长比色测定，肺匀浆MDA测定采用硫代巴比妥酸(TBA)法;用721分光光度计532 nm波长比色测定，蛋白质测定采用考马斯亮兰法，用721分光光度计以595 nm波长测定。1.3 统计分析 采用SPSS 10.0软件进行分析;多组间比较采用单因素分析、t检验及方差分析。2 结 果2.1 大鼠血清SOD活性和MDA含量检测(表1) 分析显示：模型组大鼠血清中SOD活性与正常对照组比较降低，差异有统计学意义;黄芩苷预防、低、中剂量组的SOD活性与正常组比较有降低，与模型组比较差异有统计学意义，高剂量组的SOD活性与正常组比较差异无统计学意义，与模型组比较则差异有统计学意义;阳性药对照组的SOD活性与正常组比较降低，与模型组比较有明显升高。模型组大鼠血清中MDA含量与正常组比较有明显升高;黄芩苷预防、低、中、高剂量组的MDA含量与正常组比较有升高，与模型组比较有明显降低;阳性药对照组的MDA含量与正常组比较有升高，与模型组比较差异有统计学意义。表1 各组大鼠血清SOD活性和MDA含量变化2.2 大鼠肺匀浆SOD活性和MDA含量检测(表2) 结果显示：模型组大鼠肺匀浆中SOD活性与正常对照组比较差异有统计学意义;黄芩苷预防、低、中、高剂量组的SOD活性与正常组比较有降低，与模型组比较有明