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长 春 中 医 药 大 学综合技能实践操作手册药 学 院目 录1、分析化学容量分析法12、分析化学电位法及可见紫外分光光度法53、中药化学、天然药物化学提取分离技术74、中药化学、天然药物化学化学成分的检识和鉴定105、物理化学操作（一）126、物理化学操作（二）147、药剂学检验标准操作规程168、药剂学生产标准操作规程269、中药鉴定学中药材的性状鉴定3210、中药鉴定学中药材粉末显微鉴定和中药材药典常规检测3511、药理学3912、分析类大型仪器操作（一）5413、分析类大型仪器操作（二）5814、分析类大型仪器操作（三）6415、分析类大型仪器操作（四）6816、药理类大型仪器操作74分析化学分析化学是研究物质化学组成的分析方法及有关理论的一门科学。包括化学分析和仪器分析两个分支。其主要任务是对物质进行测量和表征以及分析方法的选择和评价。本课程的实践考核主要内容分为容量分析法、电位法及分光光度法两部分。分析化学容量分析法 容量分析法是常量分析法。主要用于测定样品中含量较高的一些成分。要求同学们掌握分析天平的使用和容量法操作。【实验目的、要求】1. 学习和掌握分析天平的原理、构造及正确的使用方法。2. 熟悉常用玻璃仪器的名称、用途和使用方法。3. 熟悉指示剂原理和变色范围。4. 能熟练地进行滴定操作。（一）分析天平 分析天平是分析工作中最常用的仪器之一。每一项分析工作都直接或间接地需要使用天平，因此必须了解天平的原理构造及使用注意事项。1. 分析天平的称量原理：杠杆原理2. 分析天平类型、主要部件及使用注意事项【类型】 常用分析天平主要有摆动式分析天平、空气阻尼天平、电光天平等多种，目前使用最多的是双盘半机械加码电光天平。【主要部件】 天平梁：包括梁、三棱体(刀口)、砝码、标尺、指针、重心调节螺丝、零点调节螺丝吊耳和天平盘等八个部件。 天平柱：包括柱、刻度标牌、盘托、升降枢纽及其机件和水平仪等。 天平箱：包括箱体、底座、天平脚、脚垫和砝码拉杆等。砝码：其组成系统有两种，5、2、2、1制和5、2、1、1、1制。每一系统中的等值砝码都有自己的标记。【仪器、药品】电光分析天平、中药粉末、硫酸纸、上皿天平【操作】检查好天平看加砝指数盘是否都退至零处、天平是否水平等准备工作。接通电源。轻开天平，观察光幕，摆动静止后刻度标尺的“O”是否与标线相重合，如不重合，相差不大时，扳动天平底座下部的调零杆使之重合，如相差较大，而调零杆不能调至重合时，则关闭天平，调节梁上的零点调节螺丝，调至重合为止。关闭天平。将硫酸纸放入天平样品盘，加圈码称量，读至小数点第四位，记录数据。关闭天平。将硫酸纸上倒入中药粉末，在上皿天平上粗称后，再在分析天平上称重，记录数据。 将天平整理好，断电、罩好、登记使用情况。【注意事项】 刀口的刀刃锋利，刀承要光滑平整，避免磨损，刀口是天平最重要的部件。 砝码应用镊子夹取，不得用手拿放。 开启天平时用左手缓慢开启升降枢纽切勿动作过粗过重，使玛瑙刀受损。 使用完毕应检查天平是否关闭升降枢纽，摆动部分是否全部架起。 拔去插头将天平罩好，请指导老师检查。【考核知识点】 1分析天平的称量原理 2分析天平主要部件的识别 3调整天平零点 正确接通电源 调整水平仪 正确开启天平 调整零点 整理好天平（二）滴定【原理】通过滴定操作完成被检样品于特定试剂的化学反应。是容量分析法中最重要的基本操作之一，必须熟练掌握。【仪器、药品】25ml酸式滴定管、25ml碱式滴定管、锥形瓶100ml,250ml、凡士林、NaOH、 HCl、甲基橙、酚酞等。【操作】常量滴定管最小刻度为O1m1读数估计为O01ml。分为酸式滴定管和碱式滴定管两类。1试漏：将滴定管充满自来水并擦干外部，直立几分钟如不漏水，将活塞转动180度再试一次，如无漏水现象即可使用，否则将酸式滴定管活塞涂薄薄一层凡士林再试，碱式滴定管玻珠大小适当。2洗涤：用铬酸洗液或滴定管刷刷洗后用自来水冲洗干净，最后用蒸馏水润洗23次，洗净的滴定管内壁应能被水均匀润湿而无条纹，且不挂水珠。3装标准溶液：为避免滴定管内壁残留水分改变准溶液浓度，在装入溶液前先用少量该溶液润洗23次，然后直接将标准溶液从贮液瓶中倒入管内，并注意排出下端气泡。4. 滴定管读数：读数时应将滴定管垂直，以液面呈弯月形最凹处与刻度相切点为准，视线必须与切点在同一水平线，读至O01ml，并做记录。5. 滴定：用左手控制滴定管的活塞，右手拿锥形瓶。使用酸式滴定管时左手姆指在前，食指及中指在后，一起控制活塞。在转动活塞时，手指微微弯曲，轻轻向里扣住，手心不要顶住小头端，以免顶出活塞使溶液溅漏。用碱式滴定管时，用手指捏玻璃珠上半球部位的橡皮管，挤成一条缝隙，溶液即可流出。滴定时，左手控制溶液流量，右手拿住瓶颈，并向同一方向做旋摇运动，使滴入的标准溶液很快被分散，进行化学反应。旋摇时，不让瓶内溶液溅出，近终点时用少量蒸馏水吹洗锥形瓶内壁，淋下溅起的溶液，同时放慢滴定速度，每次滴人标准溶液1滴或半滴直至终点。并正确记录读数。滴定仪器用毕必须用自来水洗净，滴定管倒放或充满蒸馏水置于滴定管夹上。【注意事项】1滴定管是具准确刻度的量器，不能直火加热及烘烤。2每次滴定勿忘记录初读数及终读数。3装溶液或滴定完后稍等半分钟再读数以免管壁的溶液未流下影响读数准确性。4必须正确控制滴定管防止滴定中途漏液。【考核知识点】1滴定管分类 2滴定管准备(包括试漏、洗涤、装标准溶液)3滴定管读数4滴定操作(三) 直接配制法配制标准溶液标准溶液是浓度准确已知的溶液，根据物质的性质特点通常有两种配制方法，即直接配制法和间接配制法。对于基准物质则可以采用直接配制法。【原理】准确称取一定量基准物质，用蒸馏水溶解后定量转移至一定容积的容量瓶中稀释至标线，根据称取基准物质重量及稀释的体积计算出该溶液的准确浓度。【仪器、药品】烧杯250ml,100ml、容量瓶250ml、邻苯二甲酸氢钾【操作】容量瓶是用来准确配制和稀释一定体积溶液的容器，瓶颈上有环形刻线表示20容量毫升数。1检漏：使用前应检查容量瓶与瓶塞磨口是否配套，是否漏水。2洗涤：方法可参见滴定管的洗涤。3配制溶液：将小烧杯内准确称好的固体物质少量蒸馏水溶解后，将溶液小心地定量转移到容量瓶内。转移时，用一干净玻棒插入容量瓶颈内并接触内壁处，烧杯嘴紧靠玻棒下端，使溶液沿玻棒流入，待溶液流完后，将玻棒与烧杯同时直立，使附在烧杯嘴处少许溶液流回烧杯内，最后将烧杯再用蒸馏水淋洗3次，洗液按上述操作转移人容量瓶中，加蒸馏水近标线时用滴管小心滴加至溶液弯月面底部与标线准确相切为止。盖紧瓶塞，一手食指压住瓶塞并握紧瓶口处，另一手的大姆指、中指、食指三个指头托住瓶底反复倒转容量瓶1020次，使瓶内溶液充分混匀。 4. 定量转移：将已准确称量的邻苯二甲酸氢甲放入小烧杯中用少量蒸馏水溶解，定量转移至100毫升容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻线，摇匀即得。【注意事项】 1必须符合基准物质条件的才可用直接配制法配制，同时必须用分析天平准确称量。 2定量转移操作要仔细正确，注意准确量的概念，搅棒不可离开小烧杯。 3定容要小心、准确。 4容量瓶不能直火加热及烘烤，不能久贮溶液。【考核知识点】 1固体药品称取量的计算 2容量瓶的准备 3溶解试样 4定量转移 5稀释至刻度 6混匀 7整理(四) 准确稀释标准溶液【原理】准确稀释标准溶液时，根据稀释倍数选择一定容积的移液管和容量瓶。用移液管准确吸取一定量的浓溶液放至容量瓶中加水稀释至刻线、摇匀。【仪器、药品】移液管10ml,5ml，2ml，1ml、烧杯250ml,100ml、容量瓶250ml、吸耳球、洗瓶、0.100mol/l邻苯二甲酸氢钾标准溶液【操作】移液管又称吸量管，是用于准确移取一定体积溶液用的量器。按形状不同分为腹式吸管和刻度吸管。1. 洗涤：先用洗液，再用常水冲洗，然后用蒸馏水润洗，最后用待吸溶液润洗。2. 使用：右手将移液管插入待吸溶液一定深度，左手用洗耳球将溶液吸至标线以上，立即用右手食指按住管口(不准用拇指)同时拿起贮液瓶，管尖靠近瓶口内壁，稍松食指，使移液管中液面慢慢下降，至弯月面底与刻度相切。按紧食指，把移液管小心地转移到稍倾斜的容量瓶内壁处，使管垂直，放开食指，使溶液全部流出，等15秒后，取出移液管。3. 操作步骤：用25毫升移液管准确量取2500毫升0100moll邻苯二甲酸氢钾标准溶液放至250毫升容量瓶中加水至刻线，摇匀，即成001000moll 邻苯二甲酸氢钾标准溶液。【注意事项】1吸取溶液时将移液管尖端必须插入液面下，防止吸人空气。2按移液管口必须用右手食指。3放出移液管中溶液后，“吹”否要看管上是否标明。【考核知识点】1移液管用途2移液管分类3移液管洗涤4移液管使用5容量瓶使用考核方式容量分析法（称量、标准溶液配制与稀释、滴定）分析化学容量法实践考核评分表形式项目考 核 内 容分数得分笔答仪器名称原理用途计算识别下列分析仪器分析天平称量原理容量法玻璃量器的使用方法及注意事项根据称取基准物质重量及溶液体积计算出该溶液的准确浓度10101010操作或口述天平使用稀释溶液滴定调整水平仪、正确开启天平、调整零点、称重配制0.01molL邻苯二甲酸氢钾标准溶液100毫升使用酸式滴定管进行滴定操作202020合计100分析化学电位法及可见紫外分光光度法1. 可见紫外分光光度法 可见-紫外分光光度法是一种物理化学分析方法，是药品生产和检验部门的一类常规检验方法。主要用于化学药物和中药材及制剂中大类成分如总黄酮、总皂苷的含量测定。【实验目的、要求】1. 学习并掌握可见-紫外分光光度法的基本原理。2. 熟悉分光光度计的原理、构造、性能指标。3. 学会使用仪器和掌握定性、定量分析方法。【原理】波长为200400nm的范围称为紫外光区，400760nm的范围称为可见区。可见-紫外吸收光谱主要产生于有机化合物分子中价电子在电子能级间的跃迁，通过测定分子对紫外-可见光的吸收，可以用于有机化合物定性和定量。利用紫外-可见吸收光谱进行定量分析是依据光吸收的定量定律Beer-Lambert定律： A=lgT=lgII0=ECL式中A吸光度，T透光率，E吸收系数，C被测物质溶液的浓度，L光路长度。吸收系数E有不同的表示方法。当C以“mol/L”为单位时，E称为摩尔吸收系数，用表示；当C用“g/100ml”为单位时，E称为百分吸收系数，用E1%1cm表示。在药物分析中使用百分吸收系数（E1%1cm）。1）含量测定方法标准曲线法： 采用相同的溶剂和步骤，分别配制供试品和对照品数份浓度梯度溶液，在规定波长处分别测定吸收度，按工作曲线求得供试品溶液中被测组分浓度进行计算。吸收系数法： 各品种质量标准方法配制供试品溶液，在规定波长处测定其吸收度，再根据吸收系数按下式计算公式品溶液的浓度。C=A/ E1%1cmL使用吸收系数法测定时，对仪器需进行严格的校正和检定，保证吸收度测定的准确性。2）定性鉴别方法：对比吸收光谱特征参数，即核对供试品溶液的max、E1%1cm、A是否符合规定。供试品具有不止一个吸收峰时，可同时用几个峰位作为鉴别依据。光谱的肩峰或吸收谷，有时也与峰值同用。比较吸收度比值的一致性 物质的吸收峰较多时，可规定几个波长处的吸收度比值作为鉴别标准。【仪器构造】1、光源系统：751G型分光光度计采用自准式光路，属单光束非记录型，波长范围200-1000nm，其中波长小于400nm的是紫外区，大于400nm的为可见区。在320一1000nm的波长范围内用钨丝白炽灯作光源,在200一320nm的波长范围内用氢弧灯作光源。2、单色器部件一狭缝：入射狭缝与出射狭缝安装在同一狭缝机构上，可同时关闭，再通过蜗轮蜗杆带动一个偏心双面凸轮，使狭缝做横向移动来达到从0一2mm连续变化，使狭缝可调，还有准直镜、石英棱镜等部件组成。3、试样室：可同时装置四只规格的比色皿，光程分别为5、10、20和30mm并备有夹形件，以使比色皿不致歪斜。拉动手柄，使各比色皿依次进入光路中就可以进行测量，注意一定要互相匹配，否则产生误差。 4、检测器：即光电换能器，是将所接收到的光信息转变成电信息。紫敏光电管为铯阴极，适用于波长200-625nm；红敏光电管为银氧化铯阴极，适用于625一1000nm。5、讯号处理与显示器：通过读数盘直接读取透过率或吸收度。【使用方法】1.接通电源，打开稳流稳压电源和主机电源开关，预热20分钟。2.择合适的波长、光源、光电管及比色皿。 1）光源的选择：200一300nm用氘灯，将手柄搬到“H”位置，320一1000nm用钨灯；将手柄搬到“W”位置，使用钨灯时，波长小于400nm时，可将主机滤光片拉出一档，大于590nm时，拉出两档。 2、）电管的选择：625nm以下，用兰敏管，625nm以上用红敏管，仪器稳定工作时，红、兰敏管转换需5-10分钟的稳定时间。 3）比色皿的选择：一般350nm以下的紫外波段选用石英比色皿，可见及近红外波段用玻璃比色皿. 3.试校测试操作： 1）光门杆置推入位置，即暗电电流状态，按样池CEL1联键，进入工作状态，再按0%键，读数显示00，至此暗电流已扣除。 2）将空白置入光路，拉出光门杆，即亮电流状态，按100键，使读数窗显示T 1000（若达不到100，可按样池CEL清除CE联键，退出工作状态，如果显示值小于1000应开大狭缝如显1999，应关小狭缝，再重新操作）。 3）将样品置入光路，读数显示T值，按A键即可显示A值。4）如需打印，可按打印PRN键即可。【操作】1. 仪器：751GW可见-紫外分光光度计、石英比色皿1cm、玻璃器材、镜头纸等2. 药品：中药标准品、醋酸钾、氯化铝、乙醇、正丁醇、醋酸、中药材等3. 操作：（1） 提取（参见中药化学部分）（2） 薄层鉴别（参见中药化学部分）（3） 测定吸光度（4） 含量计算考核方式题目：现有一中药制剂药品和该制剂的标准品，若对其质量进行分析，需准备那些药品和实验用品？如何进行实验操作。 中药分析分光光度法实践考核评分表 形式项目考 核 内 容分数得分笔答仪器名称测试条件含量计算5520操作试样处理选择仪器条件定性鉴别定量测定20102020合计1002、电位法近年来，电位法广泛用于化学药物分析中。用于溶液的PH值测定。也作为容量法指示终点的方法。【原理】根据待测物质的电化学性质，选择合适的指示电极和参比电极，浸入试样溶液组成原电池，测量原电池的电池电动势，根据电池电动势与有关离子浓度的关系求得待测组分含量。【操作方法】学生自行操作，不记考核成绩。中药化学、天然药物化学中药化学是一门结合中医药基本理论和临床用药经验，主要运用化学的理论和方法及其它现代科学理论和技术等研究中药化学成分的学科。天然药物化学是运用现代科学理论和方法研究天然药物中化学成分的一门学科。中药或天然药物中化学成分十分复杂，为研究并应用其中的有效成分，必须将它们从药材中提取、分离出来。这是对中药或天然药物的化学成分去其糟粕、取其精华的必要手段，也是研究中药或天然药物化学成分，寻找具有生理活性部位的重要步骤。 本门课程的实践考核主要分为提取分离技术和薄层色谱鉴定两大部分。中药化学、天然药物化学提取分离技术 提取一般是指用适宜的溶剂和适当的方法，将原药材中的有效成分提出的过程。所得提取液中，通常包含多种性质相似的化合物，需进一步分离、精制，因此设计合理的提取分离工艺，注重严格操作是尽可能提出有效成分，提高产品质量的重要环节。【实验目的、要求】 1学习并掌握常用提取分离方法的原理和操作技能。2熟悉各种提取分离工艺的适用范围和通常采用的溶剂。 3熟悉常用器皿、仪器的名称、用途及使用方法。 4能够熟练安装与拆卸各种实验装置。实例： 溶剂提取法溶剂提取法是根据中药中各种化学成分在溶剂中的溶解性，选用对有效成分溶解度大，对无效成分溶解度小的溶剂，将有效成分从药材组织中溶解提取出来的方法。1溶剂的种类 常用溶剂分为水和有机溶剂两大类。 水：是典型的极性溶剂 有机溶剂：下列溶剂极性依次增大石油醚、苯、乙醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、丙酮、乙醇、甲醇 2提取方法（1）浸 渍 法【用途】适用于提取有效成分遇热易分解以及含多量淀粉、粘液质和挥发性成分的药材。【原理】静态浸出【常用溶剂】水，乙醇等有机溶剂【装置】烧杯 量筒 搅拌棒 水浴锅 天平 【操作】将药材粗粉置于有盖容器中，加入适量溶剂，浸没药材。在常温或加温(4080)下浸泡35日，或按规定时间。浸泡时应将容器盖严，并经常搅拌或振摇。【注意事项】浸渍过程中，若以水为溶剂，应注意防止霉变。（2）渗 漉 法【用途】适用范围同浸渍法【原理】根据动态浸出原理提取有效成分。渗漉过程中因药材粉末不断与新溶剂接触，造成良好的浓度差，因此提取效率高 (优于浸渍法)。【常用溶剂】水，乙醇【装置】烧杯 量筒 搅拌棒 铁架台 渗漉筒 分液漏斗 锥形瓶 天平【操作】将药材粗粉用适量溶剂润湿后，装入底部垫有棉花的渗漉筒内，装入量约为筒高的34左右，在药材上方置一平整的圆形滤纸，再在滤纸上放些小型、干净的无机重物(如小石子、玻璃球等)，以防轻质药材上浮或溶剂冲毁渗漉液液面。然后在筒的上端不断添加溶剂，使其保持液面距药材顶端5cm以上。当溶剂渗入药材后，溶出的可溶性成分随渗漉液从筒下口流出，用螺旋夹控制流速，一般控制在58ml分钟。【注意事项】装药材时应均匀，松紧适度。 渗漉过程中，保持溶剂的连续性，不得中断。【原理】加热煮沸，使水溶性成分从药材中溶出。【常用溶剂】水【装置】烧杯 天平 量筒 搅拌棒 渗漉筒 铁架台 【操作】将药材饮片置适宜容器中，按规定的加水量充分浸渍药材，然后加热煮沸，每次1小时左右，一般煎煮23次。【注意事项】（3）煎 煮 法【用途】适用于对热稳定的水溶性成分的提取。直火加热应不断搅拌，避免局部受热或糊化。药材宜为碎块，不宜过碎过细。含挥发性成分及含有效成分遇热易被破坏的中药不宜选用。煎煮所用容器，避免使用铁器。（4）简 单 回 流 提 取 法【用途】适用于含有对热稳定并可溶于有机溶剂的有效成分的中药材的提取。【原理】烧瓶中盛有药材和有机溶剂，被加热后(一般用水浴)，溶剂受热气化上升，在冷凝器中冷凝，又成为液体回流到容器中，如此反复气化回流，使有效成分溶出，并可避免有机溶剂的挥散损失。【常用溶剂】各类有机溶剂，乙醇最常用。【装置】烧瓶 冷凝管 乳胶管 水浴锅 铁架台 天平 量筒 搅拌棒 万能夹 自由夹【安装】冷凝管垂直于烧瓶口径正上方与铁支架平行，自下而上安装，注意垂直平衡。烧瓶置于水浴锅内，冷凝管入水口的乳胶管接于自来水龙头，出水口的乳胶管置于水池内。拆卸时应按自上而下的顺序拆卸。【操作】将药材饮片装入烧瓶中，加入溶剂量为容器容积的1/31/2。烧瓶的上方接通冷凝管，冷凝管的上口为出水口，下口为入水口。若所用有机溶剂的沸点低于100，通常用水浴加热。一般保持沸腾约1小时，滤过，药渣再加入新溶剂重新回流，如此反复23次，每次滤液合并即可。【注意事项】回流开始时，要先打开冷却水，后加热，随时观察温度变化及回流沸腾情况，避免暴沸，当产生第一滴回流液时，开始记录时间，并根据回流沸腾情况，注意水浴温度。回流结束，先关闭电源停止加热，待回流液温度降至室温，再关闭冷却水。受热易分解的有效成分的提取不宜选用此法。（5）连 续 回 流 提 取 法【用途】同回流法【原理】烧瓶内溶剂受热气化，经蒸气上升管到达上部的冷凝器中，被冷凝为液体而滴入提取筒中，对药材进行浸泡提取，当提取筒内溶剂液面超过虹吸管高度时，因虹吸作用，将溶有有效成分的提取液经虹吸管吸回至烧瓶，完成一次提取。烧瓶内溶剂继续受热气化、冷凝、回滴、浸泡药材，再虹吸回烧瓶内，如此反复回流提取，直至药材中有效成分提尽为止。此法因药材不断与新溶剂相接触，而始终保持较高的浓度差，故提取效率高于回流法。【常用溶剂】同回流法【装置】烧瓶 冷凝管 乳胶管 水浴锅 铁架台 天平 量筒 搅拌棒 万能夹 自由夹 连续提取部分【安装仪器与操作】仪器名称：连续回流提取器 安装：烧瓶置水浴锅内，上接连续回流提取部分，再上接冷凝管注意上下垂直并与铁架台平行，其余均同回流法。操作：a.加入有机溶剂体积约产生三次虹吸作用量 b.将药材粗粉装于滤纸袋，粗度略小于提取器内径，高度不超过虹吸管，放入提取器内。 c.打开冷却水，通电、加热，注意观察，记录时间。 【注意事项】同回流法3提取液浓缩蒸馏法 用溶剂提取法提取得到的提取液，多为稀溶液，均需进行浓缩，浓缩方法有蒸发和蒸馏。水提取液常用蒸发浓缩和薄膜浓缩，溶剂不再回收。有机溶剂提取液常用蒸馏法浓缩，溶剂可回收。蒸馏法分常压蒸馏和减压蒸馏。在此仅介绍常压蒸馏。常压蒸馏即在常压下进行的蒸馏。【原理】溶液受热气化，气化的溶剂经冷却又凝为液体而回收，回收的液体是较纯净的溶剂，从而使提取液浓缩。【用途】适用于低沸点有机溶剂提取液的浓缩回收。【装置】烧瓶(蒸馏瓶) 冷凝管 弯管 水浴锅 铁架台 天平 溶剂接收器(锥形瓶) 万能夹 自由夹 乳胶管【安装仪器】仪器名称：蒸馏装置安装：烧瓶置水浴锅内，上口连接弯管，弯管的另一端接冷凝管，烧瓶与冷凝管成45角，冷凝管横置于台面，其末端连接收管，接收管下连溶剂接收器。冷凝管上端(连烧瓶端)为出水口，下端(连接收器端)为入水口，二口连接乳胶管，入水口乳胶管接自来水龙头。仪器安装完毕，应平直、协调，符合要求。 【操作】往烧瓶内加入提取液，装量不超过烧瓶容积的23，再加入几粒沸石，以防瀑沸。 检查整个蒸馏系统安装无误时，先通入冷却水，再打开水浴锅电源开关，调节规定温度，注意观察蒸馏情况，严防瀑沸。【加热方法】一般随液体的沸点和性质而定，若液体沸点低于100，通常用水浴加热。考核方式 中药化学实践考核评分表中药化学、天然药物化学化学成分的检识和鉴定经过提取分离得到有效部位或单体，需要进一步进行化学检识及结构研究。结构研究是中药化学或天然药物化学的一项重要的研究内容。从中药或天然药物中分离得到单体即使具有很强的活性与较大的安全性，但如果结构不清楚，则无法进行药效和毒理学研究，也不可能进行人工合成或结构修饰、改造工作。鉴定方法包括化学检识、薄层色谱法及光谱法。本次考核以化学检识和薄层色谱检识为主要考核内容。【实验目的、要求】 1学习并掌握各种检识和鉴定方法的原理。2熟悉和掌握化学检识和薄层色谱法的操作技能。 3熟悉常用仪器的名称、用途及使用方法。 实例：薄层色谱法薄层色谱法是一种现代的物理化学分离、分析技术。它既可用于混合物的分离、成品纯度检查。又可用于化合物的定性和定量，尤其对中药中结构相似成分的分离和鉴定往往可获得较好的效果，色谱法是近代最常用的分离、鉴定方法。色谱法根据操作方式不同，分为薄层色谱，纸色谱和柱色谱。（一）实验目的及要求：1学习并掌握薄层色谱法鉴定中药化学成分的原理和操作技术。2熟悉薄层色谱法用各种仪器、试药，掌握使用方法。3能熟练计算样品的Rf值，并据此对该样品进行初步定性。（二）实验原理薄层色谱是将吸附剂或支持剂均匀地铺在薄层板上，形成薄层，把欲分离的样品点在薄层板上，用适当的溶剂展开，使混合物得以分离的方法。薄层色谱是一种微量、快速的色谱方法。用于纯物质的鉴定，也可用于混合物的分离、提纯及含量测定，还可用来摸索和确定柱色谱的洗脱条件。（三）实验操作1仪器：层析缸 薄层板 毛细管 喷雾瓶 电吹风 格尺 铅笔 2药品：样品 标准品 展开剂 显色剂3操作：（1）上样技术上样量适宜，一般控制在10l以下，不能超过原点位置薄层对试样容积的负载量。若被测成分含量较低而干扰物质含量较大时，应从改进预处理方法和适当提高试样浓度着手。原点直径控制小于3mm。点样时尽量避免对薄层表面的机械损伤。注意除尽残留溶剂。为避免边缘效应引起判断疑点，对照品与供试品应间隔交叉点样；两者的点样体积尽量保持一致，相差不宜过于悬殊；点样时斑点大小相似。（2）色谱展层条件的控制薄层板的活性与分离效果的因果关系是明确的。但活化了的薄层板在点样操作过程中，因实验室环境的相对湿度的影响，薄层板活度改变的现象常被忽视，而这也常是导致薄层色谱重现性差的主要原因之一。不同试样对相对湿度的适应能力各不相同。一般样品在相对湿度3070下得到相对稳定的色谱，而有的试样分离度受其影响较大。如香砂养胃丸厚朴的薄层鉴别在相对湿度66以上分离度明显改善。因此，尽可能在相对湿度可控的条件下进行展层是提高重现性的重要措施。操作方法可将点样后的薄层板置调控好相对湿度的容器内(展开缸或干燥器)，密闭放置1530min，再加展开剂，或移入另一展开缸内展层。使用双槽展开缸效果更好。展开剂所用的溶剂应配制准确，不宜多次重复使用。进行展层时应控制温度、薄层板的相对湿度、预平衡时间及展层方式等实验条件，这些均是保证色谱重现性的措施。（3）显色定位采用显色剂定位时，常遇薄层背景深，干扰鉴别的现象，含硫酸的显色剂更易见。其预防措施有挥干展开剂后再喷显色剂；控制加热温度和时间，为了便于控制，可用电吹风替代红外灯加热；在不影响显色效果情况下，降低显色剂浓度。如香草醛硫酸试剂由5降低到1或0.5；制硬板时将羧甲基纤维素钠溶液的浓度降低至0.1以下，可避免薄层板面炭化。（4） 结果判断薄层色谱法鉴别中药制剂质量的特点是可以直观地比较供试品和对照品、对照药材的整个色谱图，结合特征成分的辩认作出鉴别判断。一般分析依据是取大同弃小异，比较主要的特征成分斑点位置与色泽。（5）比移值(Rf值)计算样品经显色后，确定了斑点位置，测量出距离后，常用比移值（Rf值）来表示某一化合物在薄层板上的相对位置。 根据此公式计算样品的Rf值，然后与文献记载的该化合物的Rf值比较，以鉴定各种化合物。由于各种化合物的Rf值受许多因素的影响，因此在进行薄层色谱时，通常是将样品与标准品同时在一张滤纸上展开，显色后，根据样品的Rf值与标准品对照比较进行定性鉴别。考 核 方 式题目：欲用薄层色谱法鉴定某一样品，现有该样品的标准品和样品，问需备哪些实验用品?并进行实验操作。（样品欲展开9cm左右）中药化学薄层色谱实践考核评分表形式项目考核内容分数分配得分笔试仪器名称药品、试剂20操作点样展开显色75计算Rf值5合计100物理化学操作（一）一、液相反应体系指标的控制实验目的、要求1、液相反应体系的制备；2、液相反应体系PH值的控制；3、液相反应体系温度的控制。4、液相反应体系的应用。基本训练项目（一）溶液的配制：1、固体溶质的称量2、固体溶质的溶解3、定量转移（二）液相反应体系PH值的控制；1、液相反应体系PH值的控制与普通缓冲体系的PH的区别；2、酸碱的选择原则；3、酸碱的用量；4、PH试纸的正确使用5、酸度计的使用方法（三）液相反应体系温度的控制；1、利用温度缓冲体系控制温度；2、利用仪器控制体系温度：（1）温度的一般控制普通水浴锅的使用； 普通水浴锅的使用： 加水量的控制； 普通温度计的配合使用； 升温方法：快速升温步骤与微调升温步骤。（2）温度的精密控制超级恒温水浴及电接点温度计的使用。 超级恒温水浴的使用： 加水的方法及加水量的控制； 普通温度计的配合使用； 电接点温度计的配合使用； 升温方法：快速升温步骤与微调升温步骤； 超级恒温水浴的应用范围。 电接点温度计的使用： 电接点温度计的使用注意事项1安全电压范围； 电接点温度计的使用注意事项2量程的选择； 电接点温度计的设计原理； 电接点温度计的使用方法； 电接点温度计与电子继电器的配套使用。 考核指标1固体溶质的称量2固体溶质的溶解3定量转移4PH试纸的正确使用；5普通水浴锅的使用；6超级恒温水浴的使用；7电接点温度计的使用；8、电接点温度计与电子继电器的连接。二、阿贝折射仪的使用实验目的、要求1、了解阿贝折射仪的构造，熟悉仪器工作原理；2、学习阿贝折射仪的用途，掌握阿贝折射仪的使用方法；3、需要控制的环境因素（如温度）及控制方法4、学习阿贝折射仪的保养及其性能的评价方法。5、掌握一种分析无色透明液体浓度的方法基本训练项目1阿贝折光计的使用范围（1）固体样品检测（一般了解）；（2）液体样品检测（即全面掌握分析无色透明液体浓度的方法）。2了解阿贝折射仪的原理、构造，掌握阿贝折射仪的使用方法； （1）仪器的清洗方法（含水溶液及有机溶液的清洗）；（2）加样方法及注意事项；（3）测定步骤及注意事项；（4）仪器使用后的清洗。3需要控制的环境因素（如温度）及控制方法与超级恒温水浴的连接及有关控温问题。 考核指标1仪器使用前的清洗与调试2液体样品的加样方法3正确调出半明、半暗视野4正确读数；5、阿贝折光计与超级恒温水浴的水路连接。物理化学操作（二）三、旋光仪的使用实验目的、要求 1、了解旋光仪的构造，熟悉仪器工作原理；2、学习旋光仪的用途，掌握旋光仪的使用方法；3、需要控制的环境因素（如温度）及控制方法4、学习旋光仪的保养及其性能的评价方法。 5、掌握一种分析手性物质浓度的方法。 基本训练项目1旋光仪的使用范围（1）乙醇为溶剂的样品特征（一般了解）；（2）水为溶剂的样品特征及样品检测（重点掌握）。2了解旋光仪的原理、构造，掌握旋光仪的使用方法； （1）旋光管的清洗方法、装样方法及注意事项；（2）旋光管的放置方法及注意事项；（3）测定步骤及注意事项；（4）仪器使用后的清洗。3需要控制的环境因素（如温度）及控制方法与恒温箱的配套使用及有关控温问题。4如何正确测定未知溶液的旋光度考核指标1“O”点的较正2将溶液装入旋光管3辩别测定物质的旋光方向4正确读数5选择“O”点视野6三分视野的作用；7旋光管中气泡的处理。四、可调式变压器的使用实验目的、要求 1、了解可调式变压器的构造，熟悉可调式变压器的工作原理；2、学习可调式变压器的用途，掌握可调式变压器的使用方法；3、学习可调式变压器的保养及其性能的评价方法。4、使用时的注意事项。 基本训练项目1可调式变压器的使用；2可调式变压器与沸点仪配合使用；3可调式变压器与外接用电器的连接及注意事项。考核指标1学会找出输出、输入接线组的方法；2接线方法及注意事项；3根据需要选择电压值。五、电导率仪的使用实验目的、要求 1、了解电导率仪的构造，熟悉仪器工作原理；2、学习电导率仪的用途，掌握常用电导率仪的使用方法；3、需要控制的环境因素（如温度）及控制方法4、学习电导率仪的保养及其性能的评价方法。 5、掌握一种分析电解质溶液浓度的方法。 基本训练项目1电导仪的预热、调试及使用方法（1）温度补偿调节；（2）电极常数的校正；（3）量程的选择原则。2纯水及溶液电导值的测定（1）纯水电导值的测定及注意事项；（2）电解质水溶液的配制。（3）电极在使用前的处理及用后清洗考核指标1电极的选择2量程的选择3高周、低周的选择4转换量程及更换待测液的注意事项5电极常数的调节6满刻度的校正7电极在使用前的处理及用后清洗六、离心机在药物动力学实验中的使用方法实验目的、要求 1、了解离心机的构造，熟悉离心机的工作原理；2、学习离心机的用途，掌握常用离心机的使用方法；3、需要控制的环境因素（如温度）及控制方法4、学习离心机的保养及其性能的评价方法。 5、掌握一种分离非真溶液体系的方法。6、掌握离心机在药物动力学实验中的使用方法基本训练项目1、正确掌握使用离心机的操作步骤；2、掌握离心机转速的选择；3、掌握不同体系离心时间的控制；4、掌握对称性原则。考核指标1样品的对称称重及正确放置方法；2正确启动及停止的方法。药剂学检验标准操作规程粒度测定法培训目的：掌握粒度测定方法 熟悉粒度检验的标准操作规程及操作原理培训内容：粒度系指颗粒的粗细程度及粗细颗粒的分布，用于测定药物制剂的粒子大小或限度。中国药典2000年版二部附录IX E“粒度测定法”项下列有两种不同的测定方法，第一法(显微镜法)和第二法(筛分法)；应根据药典品种正文或制剂通则的规定，选用检测方法。第一法 显微镜法： 1简述 11本法中的粒度，系以显微镜下观察到的长度表示。 12本法适用于眼膏剂、气雾剂、混悬型滴眼剂、软膏剂、滴耳剂以及药典品种正文指定的粒度检查。 2仪器与用具 21显微镜 22镜台测微尺和目镜测微尺(直尺式) 23盖、载玻片 24计数器 3操作方法 31 目镜测微尺的标定 用以确定使用同一显微镜及特定倍数的物镜、目镜和镜筒长度时，目镜测微尺上每一格所代表的长度。标定时，将镜台测微尺置于载物台上，对光调焦，并移动测微尺物象于视野中央；取下目镜，旋下接目镜的目镜盖，将目镜测微尺放入目镜筒中部的光栏上(正面向上)，旋上目镜盖后返置镜筒上，此时在视野中可同时观察到镜台测微尺及目镜测微尺的分度小格，移动镜台测微尺和旋转目镜，使两种量尺的刻度平行，并使左边的“0”刻度重合，然后再寻找第二条重合刻度；记录两条刻度的读数，并根据比值计算出目镜测微尺每小格在该条件下所相当的长度(m)。由于镜台测微尺每格相当于10pm，故目镜测微尺每一小格的长度为：10相重合区间镜台测微尺的格数相重合区间目镜测微尺的格数例如：镜台测微尺15格和目镜测微尺34格完全重合，则目镜测微尺在该目镜与物镜的组合下，每小格的长度即为44m(10153444)。当测定时要用两种放大倍数(即该目镜与不同物镜组合)时，应分别标定。32测定法除另有规定外，取供试品，用力摇匀粘度较大者可按该品种项下的规定加适量甘油溶液(1 2)稀释，使颗粒分散均匀，照该品种项下的规定，量取供试品，置载玻片上，盖以盖玻片(注意防止气泡混入)，轻压使颗粒分布均匀；半固体可直接涂在载玻片上；立即在50100倍显微镜下检视盖玻片全部视野，应无凝聚现象，并不得检出超过该品种项下规定的最大颗粒；再在200500倍的显微镜下检视，并用计数器记录该品种规定的视野内的总粒数及规定大小的粒数，并计算其百分率。4注意事项41应注意物镜、目镜的正确选择。42所用器具应清洁。43盖盖玻片时，用镊子夹取一盖玻片，先使其一边与药物接触，慢慢放下，以防止气泡混入，轻压使颗粒分布均匀。44盖、载玻片应平整，光洁、无痕、透明度良好，以免引起散射等现象。45直接取样时，取样量应适量，若量过多时，粒子重叠不易观察、判断；若过少代表性差。46如为混悬液，振摇时要有一定力度，振摇后应快速取样。47如为软膏剂或眼膏剂，在取样混匀过程中应缓慢混匀，以免产生气第二法 筛分法1简述11本法适用于散剂或颗粒剂的粒度测定。2仪器与用具21天平根据称样量选用适当的天平22药筛(各品种项下规定的药筛号)，并备有筛盖和密合的接受容器。3操作方法31单筛分法取各品种项下规定量的供试品，称定重量，置规定号的药筛(筛下配有密合的接受容器)内，筛上加盖，按水平方向旋转振摇至少3分钟，并不时在垂直方向轻叩筛。取筛下的颗粒及粉末，称定重量，计算其百分率。 32双筛分法 除另有规定外，取单剂量包装的供试品5包(瓶)或多剂量包装的供试品1包(瓶)的内容物，称定重量，置该品种规定药筛的上层小号筛中，盖好筛盖，保持水平状态过筛，左右往返，边筛动边拍打3分钟。取不能通过小号筛和能通过大号筛的颗粒及粉末，称定重量，计算其百分率。 4注意事项 41 在筛动时速度不宜太快，否则由于粉末运动速度太快，可筛过的粉末来不及与筛网接触而混于不可筛过粉末之中而影响结果。 42适当增加振动力度，使药粉跳动运动增强，能有效地增加粉末间距，筛孔得到充分暴露而利于筛选。 43振动的力要适当，因为粒径有方向性，通过某一筛孔的粒子的实际长度可能比筛孔的孔径大。如果振动力度较强，此种误差会增大。 44筛动时间不宜过长。若筛动时间长、振动力大，颗粒间互相撞击破碎，也可引起误差。 5记录 记录筛号、称量数据、计算结果。 6结果与判断 61散剂(采用单筛分法)除另有规定外，通过筛网的粉末重量，如不低于供试量的95，判为符合规定；低于供试量的95，则判为不符合规定。 62颗粒剂(采用双筛分法)除另有规定外，不能通过一号筛(2000肚m)和能通过五号筛(180pm)的颗粒及粉末的总和，不超过供试量的15，判为符合规定；超过供试量的15，则判为不符合规定。 63细粒剂(采用双筛分法) 不能通过五号筛(180pm)和能通过九号筛(75肛m)的颗粒及粉末的总和，如不超过供试量的10，判为符合规定；超过供试量的100 9%，则判为不符合规定。崩解时限检查法培训目的：掌握崩解时限的检查方法熟悉崩解时限检验的标准操作规程及相关药剂对崩解时限的要求培训内容：1简述11本法(中国药典2000年版二部附录x A)适用于片剂(包括普通片、薄膜衣片、糖衣片、肠溶衣片及泡腾片)、胶囊剂(包括硬胶囊剂、软胶囊剂及肠溶胶囊剂)，以及丸剂的溶散时限检查。凡规定检查溶出度、释放度或融变时限的制剂，不再进行崩解时限检查。12片剂口服后，需经崩散、溶解，才能为机体吸收而达到治疗目的；胶囊剂的崩解是药物溶出及被人体吸收的前提，而囊壳常因所用囊材的质量，久贮或与药物接触等原因，影响溶胀或崩解；丸剂中不含有崩解剂，故在水中不是崩解而是逐渐溶散，且基质的种类与丸剂的溶解性能有密切关系，为控制产品质量，保证疗效，药典规定本检查项目。13本检查法中所称“崩解”，系指固体制剂于规定条件下在检查时限内全部崩解溶散或成碎粒，除不溶性包衣材料或破碎的胶囊壳外，应通过筛网。2仪器与用具21崩解仪(见中国药典2000年版二部附录x A的仪器装置)22滴丸剂专用吊篮按21项下所述仪器装置，但不锈钢丝筛网的筛孔内径改为O425mm。23烧杯1000ml24温度计分度值13试药与试液31人工胃液(供软胶囊剂和以明胶为基质的滴丸剂检查用) 取稀盐酸164ml，加水约800ml与胃蛋白酶10g，摇匀后，加水稀释成1000ml，即得。临用前制备。32人工肠液(供肠溶胶囊剂检查用) 取磷酸二氢钾68g，加水500ral使溶解，用04氢氧化钠溶液调节pH值至68；另取胰酶10g，加水适量使溶解，将两液混合后，加水稀释成1000ml，即得。临用前制备。4操作方法41将吊篮通过上端的不锈钢轴悬挂于金属支架上，浸入1000ml烧杯中，并调节吊篮位置使其下