苏教版教学课件苏教2011高考生物大一轮复习选修1 第一部分 无菌操作技术实践.ppt

选修1生物技术实践第一部分无菌操作技术实践高频考点突破考点一无菌技术1 无菌技术具体操作 1 对实验操作的空间 操作者的衣着和手进行清洁和消毒 2 将用于微生物培养的实验用具和培养基等进行灭菌 3 为避免周围环境中微生物的污染 实验操作应在酒精灯火焰附近进行 4 实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触 2 消毒和灭菌的区别 特别提醒酒精消毒时 体积分数为70 的酒精杀菌效果最好 原因是浓度过高 使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜 乙醇分子不能渗入其中 浓度过低 杀菌力减弱 对位训练1 2008 江苏生物 25 某组织培养实验室的愈伤组织被真菌严重污染 为查找污染原因设计了4个实验 实验条件除图示外其他均相同 下列各图表示实验结果 据图可得出的初步结论是 多选 A 污染主要不是培养基灭菌时间短造成的B 污染主要来源于组织培养所用的离体组织C 调节培养基pH不能解决污染问题D 调节培养温度不能解决污染问题解析由 a c d 曲线较为平缓可知 灭菌时间 pH 温度等对污染率影响不大 离体组织的灭菌时间与污染率呈反相关关系 影响较大 答案ABCD 2 培养基 培养皿 接种环 实验操作者的双手 空气 牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是 化学消毒 灼烧灭菌 干热灭菌 紫外线消毒 高压蒸汽灭菌 巴氏消毒法A B C D 解析培养基用高压蒸汽灭菌 培养皿能耐高温 需用干热灭菌 接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果 实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒 如用酒精擦拭双手 空气可用紫外线消毒 牛奶为不破坏其营养成分可采用巴氏消毒法 A 考点二大肠杆菌的培养和分离1 大肠杆菌 1 特性 革兰氏阴性 兼性厌氧的肠道杆菌 2 用途 是基因工程技术中被广泛采用的工具 2 培养 实验中用LB液体培养基扩大培养大肠杆菌 3 分离 实验部分 4 菌液划线分离的方法 5 保存菌种用接种环取出单个菌落 用划线法接种在斜面培养基上 37 培养24h后 4 冰箱保存 1 在倒平板过程中 不能将培养基溅在皿壁与皿盖上 防止杂菌污染 2 本实验需设置空白培养基在相同条件下一起培养 以确定是否有杂菌污染 3 培养皿倒置的目的是防止皿盖上的水珠落入培养基中 造成污染 对位训练3 下表是某同学设计的三组培养基 1 其中B组培养基可培养 A组培养基可能用于培养 但在分化阶段必需添加有关的 2 C组培养基可用于大肠杆菌的培养和分离 蛋白胨能提供的营养素有等 琼脂的作用为 培养基中加入一定量的氯化钠的目的是 3 以上三种不同的培养基在用于培养之前都必须进行操作 而且不同的培养基都必须有相应的适宜 4 用划线法在LB固体培养基上分离大肠杆菌 当接种完成后 盖好培养皿盖 将培养皿 放在37 恒温箱中培养12 24h 当看到划线末端出现时 表明细菌已被分离 答案 1 动物细胞植物离体组织植物激素 2 碳源 氮源 生长因子使培养基凝固维持一定的渗透压 3 灭菌pH 4 倒置不连续的单个菌落 考点三微生物培养基的配制1 培养基的种类 1 按物理性质分类 2 按功能分类 2 培养基的配制原则和营养构成目的要明确 根据微生物的种类 培养目的选择不同的原料配制培养基营养要协调 配制培养基时要注意各营养物质的浓度和比例 pH要适宜 2 培养基的营养构成 各种培养基的具体配方不同 但一般都含有水 碳源 氮源和无机盐 不同培养基还要满足不同微生物对pH 特殊营养物质以及氧气的要求 培养基的配制原则 1 3 配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤及注意事项 1 步骤 计算 称量 溶化 灭菌 倒平板 2 注意事项 倒平板的温度一般50 左右适宜 温度过高会烫手 过低培养基又会凝固 平板需倒置 这样既可使培养基表面的水分更好地挥发 又可防止皿盖上的水珠落入培养基 造成污染 4 纯化大肠杆菌的操作过程及注意事项 1 原理 在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞 使其长成单个的菌落 这个菌落就是一个纯化的细菌菌落 2 方法 平板划线法 稀释涂布平板法 3 平板划线操作的注意事项 第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌 灼烧接种环之后 要冷却后才能伸入菌液 以免温度太高杀死菌种 划线时最后一区域不要与第一区域相连 划线用力大小要适当 防止用力过大将培养基划破 拓展提升1 自养微生物和异养微生物的营养比较2 划分依据 自养微生物与异养微生物类型划分的主要依据是能否以无机碳作为生长的主要或唯一碳源 而与氮源无关 自养微生物以CO2或碳酸盐为唯一碳源进行代谢生长 异养微生物必须以有机物作为碳源进行代谢生长 3 自养微生物的能源 利用光能 如蓝藻等 依靠物质氧化过程中释放的能量 如硝化细菌 能利用NH3氧化过程中释放的化学能 NH3既作为氮源 又作为能源 4 异养微生物的能源主要来源于有机物的氧化分解 碳源不仅为异养微生物提供构成细胞的物质 而且提供完成整个生命活动所需的能量 5 微生物的类型 对位训练4 采用干热灭菌 灼烧灭菌 高压蒸汽灭菌 紫外线照射等几种方法 可分别杀死哪些部位的杂菌 A 吸管 接种环 培养基 接种室 B 接种环 吸管 培养基 接种室 C 培养基 接种环 吸管 接种室 D 培养皿 吸管 培养基 双手 B 5 有关稀释涂布平板法的叙述中 错误的是 A 首先将菌液进行一系列的梯度稀释B 然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面C 适宜条件下培养D 结果都可在培养基表面形成单个的菌落 D 考点四植物组织培养的基本过程1 原理 细胞全能性2 菊花组织培养过程菊花组织丛状苗生根苗健壮后定植到土壤中3 无菌技术在植物组织培养中的应用 1 进行严格的无菌操作 植物材料体积小 抗性差 防止一些细菌 真菌等的生长 2 无菌技术包括培养基消毒灭菌和植物材料 外植体 的消毒灭菌 对培养材料进行表面灭菌时 一方面要考虑药剂的消毒效果 另一方面还要考虑植物材料的耐受能力 发芽培养基 生根培养基 移至草炭土或蛭石中 移栽 3 对接种操作中污染情况的分析 接种3 4d后 被污染的原因可能是由接种人员造成的 如未戴口罩 接种时说话 或手及器械消毒不严等 真菌污染可能是植物材料灭菌不当 4 妥善处理被污染的培养物 操作后常出现培养物被污染的情况 一旦发现培养材料被污染 特别是真菌污染 一定不要打开培养瓶 应先将所有被污染的培养瓶统一放在高压蒸汽锅内进行高压蒸汽灭菌 然后再打开培养瓶 进行清洗 5 对有毒药品的用后处理 外植体灭菌用过的有毒药品要妥善处理 如氯化汞等 以免引起环境污染 4 MS培养基与微生物培养基的比较微生物培养基以有机营养为主 而MS培养基则需提供大量无机营养 无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类 MS培养基中微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐 蔗糖提供碳源 同时能够维持细胞的渗透压 甘氨酸 维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求 对位训练6 植物细胞表现出全能性的必要条件是 A 导入其他植物细胞的基因B 将成熟筛管的细胞核移植到去核的卵细胞内C 用适当浓度的秋水仙素处理D 脱离母体后 给予适宜的营养和外界条件解析植物细胞只有脱离了植物体 在一定的外部因素作用下 经过细胞分裂形成愈伤组织 才能表现出全能性 由愈伤组织细胞发育 分化出新的植物体 D 7 无菌技术是植物组织培养能否获得成功的关键 以下说法正确的是 由于植物组织培养所利用的植物材料体积小 抗性差 对无菌操作的要求非常严格 对培养基及器械用高压蒸汽灭菌 对培养材料进行表面灭菌时 一方面要考虑药剂的消毒效果 另一方面还要考虑植物材料的耐受能力 培养中不同药剂 不同植物材料 甚至不同器官区别对待 对培养材料可用高压蒸汽灭菌 如果不小心引起污染 将可能造成培养工作前功尽弃A B C D 解析培养材料只能进行消毒处理 前提是对组织细胞没有损坏 而高压蒸汽灭菌可以杀死组织细胞 C 思维方法探究思维误区警示易错分析1 将消毒和灭菌混为一谈提醒酒精消毒时 体积分数为70 的酒精杀菌效果最好 原因是 浓度过高 使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜 乙醇分子不能渗入其中 浓度过低 杀菌力减弱 2 对题目中给出的信息 材料不会推断分析 1 例如选择培养基 特定条件或特定C N源只有该种或该类微生物能存活或利用 如纤维素粉做碳源时选择分离出分解纤维素的微生物 无任何氮源的培养基选择固氮微生物 高盐 强酸 无氧等特定条件选择耐盐 耐酸 厌氧的微生物 加抗生素的培养基选择真菌 根据是否含有机碳选择自养 异常微生物 2 根据划线法得到的培养基上菌落的生成及分布情况 推断分析微生物是否产生抗生素及相互抑制现象 纠正训练1 关于灭菌和消毒的理解 不正确的是 A 灭菌是指杀死环境中的一切微生物的细胞 芽孢和孢子B 消毒和灭菌实质上是相同的C 接种环用烧灼法灭菌D 常用的灭菌方法有加热法 紫外线法 化学药品法 解析灭菌和消毒的实质相同 都是破坏菌体蛋白的活性而使其失去生命力 但二者的程度不同 灭菌是杀死环境中的一切微生物的细胞 芽孢和孢子 消毒不能杀死芽孢和孢子 常用的灭菌法有干热灭菌法 高压蒸气灭菌法 灼烧灭菌法等 而消毒有加热法 紫外线法 化学药品法 所以D项不正确 答案D 2 现有两种固体培养基 已知其配制时所加的成分如下表 用这两种培养基分别分离土壤中的两种微生物 你认为它们适于分离 A 甲培养基适于分离自养型自生固氮菌 乙培养基适于分离异养型自生固氮菌B 甲培养基适于分离酵母菌 乙培养基适于分离真菌C 甲培养基适于分离异养型自生固氮菌 乙培养基适于分离自养型自生固氮菌D 甲培养基适于分离异养型共生细菌 乙培养基适于分离异养型共生固氮菌 解析根据所提供的甲 乙两种培养基的成分分析 两者之间的主要差别是 甲培养基以葡萄糖和淀粉作为有机碳源和能源 也有少量的无机碳源 CaCO3 乙培养基无有机碳源和能源 两者之间的共同点是 都不含氮源 说明这两种培养基只能培养具有固氮能力的细菌 答案C 3 抗生素可由微生物产生 具有抑菌作用 能在琼脂培养基中扩散 在筛选产生抗生素的菌种时 先在琼脂培养基平板上划线接种一种从土壤中获得的甲菌 在27 下培养3天 形成菌落 然后接种乙 丙 丁三种致病菌 图A 继续在同样条件下培养3天 结果如图B 分析结果 得出的结论是 甲菌产生了抗生素 丁菌的生长被丙菌产生的抗生素抑制 乙菌的生长被甲菌产生的抗生素抑制 丙菌产生的抗生素抑制了乙菌的生长A B C D 解析乙 丙 丁三种致病菌不会产生抗生素 否则靠近乙 丙 丁的甲菌落不能生长 从图B来看 乙菌的生长被抑制 最可能的原因是甲菌产生了抗生素 此种抗生素只能抑制乙菌的生长 而对丙 丁两种菌没有影响 答案A 知识综合应用重点提示通过 探究土壤微生物对尿素是否有分解作用 的考查 提升 对一些生物学问题进行初步探究 的能力 典例分析同学们为了探究土壤中的微生物对尿素是否有分解作用 设计了以下实验 并成功筛选到能高效降解尿素的细菌 目的菌 培养基成分如下表所示 实验步骤如下图所示 请分析回答问题 1 简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理 2 培养基中加入尿素的目的是筛选 这种培养基属于培养基 3 目的菌 生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的和 实验中需要振荡培养 原因是 4 转为固体培养基时 常采用接种 获得单菌落后继续筛选 5 实验结束后 使用过的培养基应该进行处理后 才能倒掉 解析尿素是培养基中的唯一氮源 因此原则上只有能够利用尿素的微生物才能够在此培养基上生长 由于细菌合成的脲酶将尿素分解为氨 pH升高 故在以尿素为唯一氮源的培养基中加入的酚红指示剂将变成红色 这种培养基属于选择培养基 可筛选目的菌 其生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的尿素和葡萄糖 振荡培养的目的是提供氧气 固体培养基培养时的接种方法常用稀释涂布平板法或平板划线法 最后 别忘记如果倒掉培养基 之前应灭菌处理 答案 1 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂 细菌合成的脲酶将尿素分解为氨 pH升高 使酚红指示剂变为红色 2 目的菌选择 3 尿素葡萄糖为目的菌提供氧气 4 稀释涂布平板法 或平板划线法 5 灭菌 定时检测1 下表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的培养基的配方 请根据已有知识回答下列问题 1 培养基种类很多 但培养基中一般都含有水 和无机盐 2 该培养基配制完成后 一般还需调pH并对培养基进行处理 实验过程中为避免周围环境中微生物的污染 实验操作应在附近操作 3 在土壤中分离纯化细菌最常用的方法是和 在分离纯化前需将菌体放入液体培养基中 在固体培养基上划好线后须将培养皿倒置的原因是 4 实验结束后 使用过的培养基应进行灭菌处理才能倒掉 这样做的目的是 解析 1 各种培养基的具体配方不同 但一般都含有水 碳源 氮源 生长因子和无机盐 2 获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵 培养基配制完成后 需进行灭菌处理 在实验过程中 为避免周围环境中微生物的污染 实验操作应在酒精灯火焰附近操作 3 在土壤中分离纯化微生物最常用的方法是划线分离和涂布分离 在分离纯化前需将菌体放入液体培养基中扩大培养 划线后将培养皿倒置的原因是防止皿盖上的水珠落入培养基中 造成污染 4 用过的培养基不可随便丢弃 一定要灭菌后方可丢弃 以免污染环境 答案 1 碳源氮源生长因子 2 灭菌酒精灯火焰 3 划线分离涂布分离扩大培养防止皿盖上的水珠落入培养基中 造成污染 4 防止造成环境污染 2 科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白 这种蛋白质具有极强的抗菌能力 受到研究者重视 1 可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的抗菌特性 抗菌实验中所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供和 2 分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液 培养一定时间后 比较两种培养基中菌落的 确定该蛋白质的抗菌效果 3 细菌培养常用的接种方法有和 实验结束后 对使用过的培养基应进行灭菌处理 腐乳是我国民间传统发酵食品 营养丰富 味道鲜美 请回答有关问题 1 腐乳制作中 起主要作用的生物是 它与乳酸菌在结构上的主要区别是 2 在腐乳制作中 加盐的目的是 写三个 答案 1 碳源氮源 2 数量 3 平板划线法稀释涂布平板法 1 毛霉毛霉有成形的细胞核 2 抑制微生物的生长 避免豆腐块腐败变质加盐析出豆腐中的水分 使豆腐块变硬 在后期制作过程中不会过早酥烂有调味作用 3 下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基 据表回答下列问题 1 该培养基中含有的最主要碳源是 2 该培养基按物理性质划分 属于培养基 该培养基具有选择作用的原因是 3 在该培养基中 可以通过检测pH的变化来判断尿素是否被分解 所依据的原理是 所用方法是在培养基中加入 若尿素被分解 则培养基变成色 4 如果将此培养基改为用来分离分解纤维素的微生物的培养基 则主要提供碳元素的物质应改为 解析培养基中葡萄糖 尿素和琼脂都含有碳元素 其中葡萄糖是最主要的碳源 尿素主要提供氮元素 琼脂是凝固剂 由于琼脂的存在 该培养基属于固体培养基 由于尿素是该培养基的唯一氮源 只有能分解尿素的微生物才能在上面生存 因此该培养基具有选择作用 尿素分解会产生氨 氨能使酚红指示剂变红色 据此可以推测培养基中的尿素是否被分解 若该培养基改为用来分离分解纤维素的微生物的培养基 纤维素应作为唯一碳源 因为只有这样才具有选择作用 答案 1 葡萄糖 2 固体该培养基中唯一的氮源是尿素 只有能分解尿素的微生物才能在此培养基上生长繁殖 3 微生物产生的脲酶能将尿素分解成氨 氨会使培养基的pH升高酚红指示剂红 4 纤维素 4 生物乙醇是以生物为原料生产的可再生能源 我国利用农作物废弃物 秸秆 生产乙醇 其技术流程为 纤维素酶解 酵母发酵 蒸馏 成品 1 纤维素酶的成本能否下降 是能否实现乙醇工业化生产的关键因素 纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取 某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程 土壤取样 选择培养 梯度稀释 鉴别培养 最好选择怎样的环境采集土样 以下是一种培养基配方 纤维素粉5g NaNO31g Na2HPO4 7H2O1 2g KH2PO40 9g MgSO4 7H2O0 5g KCl0 5g 酵母膏0 5g 水解酪素0 5g 蒸馏水定容到1000mL 该培养基能够增加样品中纤维素分解菌的浓度 其原理是 为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种 可以在鉴别培养基上加入染液 将筛选获得的菌液稀释后用接种到鉴别培养基上 然后挑选产生的菌落作为菌种进行扩大培养 纤维素分解菌培养液中的纤维素酶产量如何呢 请设计实验进行检测 2 进行工业化酶解时 为了使纤维素酶能反复使用 可以采用技术 3 乙醇是酵母菌的发酵产物 发酵时酵母菌直接利用的物质是 4 发酵时乙醇浓度升高会对酵母菌产生毒性 从而影响进一步的发酵 科学家利用基因工程方法创造出一种对乙醇浓度有高耐受力的酵母菌新菌种 该过程需要采用PCR技术扩增目的基因 与体内DNA复制相比 PCR反应体系需加入哪两种特别的物质 解析分离土壤中的纤维素分解菌应从纤维素丰富土壤环境中取土样 这样的土壤中纤维素分解菌较多 在所给培养基中 纤维素是碳源 只有能利用纤维素的微生物能生长 其他微生物不能生长 鉴别纤维素分解菌可在培养基中加入刚果红染料 将筛选获得的菌液稀释后用涂布平板法接种到鉴别培养基上 纤维素分解菌产生的纤维素酶能分解纤维素 产生透明圈 检测纤维素酶产量可根据葡萄糖产量确定 工业化酶解时 为了使纤维素酶能反复使用 可以采用固定化酶技术 酵母菌利用葡萄糖 或纤维素酶解产物 发酵产生酒精 PCR技术扩增目的基因时需加入两种引物 耐热的DNA聚合酶 答案 1 选择纤维素丰富的土壤环境 培养基中纤维素是主要碳源 有利于纤维素分解菌生长 同时抑制其他微生物生长 刚果红涂布平板法透明圈 向定量纤维素分解菌培养液中加入定量纤维素 定时测定葡萄糖产量的变化 2 固定化酶 3 葡萄糖 或纤维素酶解产物 4 两种引物 耐热的DNA聚合酶 TaqDNA聚合酶 5 从自然菌样筛选较理想生产菌种的一般步骤是 采集菌样 富集培养 纯种分离 性能测定 1 不同微生物的生存环境不同 获得理想微生物的第一步是从合适的环境中采集菌样 然后再按一定的方法分离 纯化 培养嗜盐菌的菌样应从环境采集 2 富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件 使群落中其数量大大增加 从而分离出所需微生物的培养方法 对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择的培养基 并在条件下培养 3 下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解 请分析接种的具体方法 获得图A效果的接种方法是 获得图B效果的接种方法是 4 配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行 接种前要进行 在整个微生物的分离和培养中 一定要注意在条件下进行 解析 1 嗜盐菌就生活在高盐环境中 如 海滩等环境 2 耐高温淀粉酶应存在于以淀粉为唯一碳源且在高温环境中生存的微生物体内 3 从不同菌落之间的关系可以看出 A纯化微生物的接种方法是稀释涂布平板法 B纯化微生物的接种方法是平板划线法 4 培养基配制时应先溶化 再调整pH值 然后灭菌 答案 1 海滩等高盐 2 以淀粉为唯一碳源高温 3 稀释涂布平板法平板划线法 4 pH调整高压蒸汽灭菌无菌 6 为了研究微生物的抗药性突变是自发产生的还是在环境因素的作用下产生的 1952年Lederberg夫妇利用大肠杆菌设计了一个影印培养法实验 影印培养法的实验原理是 把长有数百个菌落的细菌母种培养皿倒置于包有一层灭菌丝绒布的木质圆柱体 直径略小于培养皿平板 上 使其均匀地沾满来自母种培养皿平板上的菌落 然后通过这一 印章 把母板上的菌落 忠实地 一一接种到不同的其他培养基上 下图就是利用影印培养技术证明大肠杆菌产生抗链霉素突变基因的实验 具体方法是 首先把大量对链霉素敏感的大肠杆菌涂布在不含链霉素的培养基的平板1的表面 待其长出密集的小菌落后 用影印法接种到不含链霉素的培养基平板2上 随即再影印到含有链霉素的培养基平板3上 经培养后 在平板3上出现了个别抗链霉素的菌落 对培养皿2和3进行比较 在平板2上找到与平板3上那几个抗性菌落的 孪生兄弟 把平板2上与平板3上菌落相应的一个部位上的菌落挑至不含链霉素的培养液4中 经培养后 再涂布在平板5上 重复以上各步骤 最后在试管12中获得了较纯的抗性菌落 根据以上材料回答下列问题 1 若要仅获得抗链霉素的大肠杆菌 则该如何操作 2 大肠杆菌抗链霉素基因存在于细胞的结构上 在基因工程中 该结构常作 3 3号 7号 11号培养皿中加入链霉素的作用是 3号培养皿中的菌落比1号 2号中的菌落少很多 这说明了 4 该实验最关键的设计思路是 你认为该实验设计的巧妙之处是 5 你认为该实验得到的结论是 解析 1 若要获得抗链霉素的大肠杆菌 用含链霉素的选择培养基进行培养即可 2 细菌的抗药性基因一般存在于质粒上 质粒在基因工程中常用作载体 3 链霉素起选择作用 大部分的大肠杆菌被杀死 少数具有抗性的个体保留下来 4 实验中最关键的设计思路是对照 即在含有链霉素和不含链霉素的培养基中培养 答案 1 将原始菌种涂布到含有链霉素的培养基中进行选择培养 生长出的菌落即为抗链霉素的大肠杆菌 2 质粒载体 3 选择作用通过链霉素的选择作用 具有抗药性的大肠杆菌保留下来 数量较少 4 对照实验最终获得的抗药性细菌一直没有接触链霉素 5 微生物的抗药性突变是自发产生的 而不是在链霉素的作用下产生的 7 如图为植物 菊花 组织培养过程示意图 请据图回答 1 培养基 和培养基 分别为和 两者最主要的区别是 2 若该培养基是MS固体培养基 则其基本组成是 和有机成分 3 愈伤组织发