生物饵料培养学习题.doc

生物饵料培养学习题绪论：1.比较生物饵料、饵料生物的区别。饵料生物：指在海洋、江河和湖泊等水域中自然生活的各种可供水产动物食用的水生动、植物。生物饵料： 指经过筛选的优质饵料生物，进行人工培养后投喂给养殖对象食用的活饵料，它们和养殖对象共同生活在一起，在水中正常生长、繁殖，是活的生物。2.生物饵料培养学的含义和内容是什么？生物饵料培养学：主要是研究生物饵料的筛选、培养及其营养价值评价的一门应用性学科。1）、生物饵料的筛选；2）、生物饵料的规模化或大量培养技术研究（基础生物学研究形态、生理生态、生殖性能、抗逆性能、分类和自然分布等，获取大量培养的技术性指标）；3）、生物饵料的营养价值评价（营养价值常随培养条件的变化而变化，常规培养存在营养缺陷，需要进行定向培养和营养强化，以获得符合需要的、营养全面和饵料效果好的生物饵料。应逐步建立生物饵料的营养价值评价体系，研究提高生物饵料营养价值的培养方法和技术。）3.生物饵料必须具备哪些条件？大小适口（微藻5-25m，轮虫100-340m，卤虫初孵幼体400-500m，小型枝角类和桡足类600-1800m，桡足类无节幼体100-400m，大多海鱼和虾蟹类幼体口径为280-360m）。B、便于被摄食（运动能力和分布水层）。C、营养价值高（高含量优质蛋白质、游离氨基酸、维生素和矿物质等），易被消化吸收；D、无毒或毒性小，养殖动物成活率高。E、生命周期短，易爆发性增殖；F、对环境的适应性和抗逆性强，易于大量培养，产量高。G、营养级低（食物链短，培养成本低）。第一章：1.名词解释：光合细菌是地球上最早出现的具有原始光能合成体系的原核生物，是一大类在厌氧条件下进行不放氧光合作用的细菌的总称。2.光合细菌的特点。1、含有光合色素（菌绿素a、b、c、d、e及类胡萝卜素）；2、大多在有光厌氧和无光有氧条件下都能生长，以有光厌氧生长好。3、大多红螺菌科主要以有机物作为供氢体和碳源，在培养过程中不产生氧气。而着色菌科只能利用硫化氢及其他的硫化物为供氢体，以CO2为碳源。4、能够利用水体中的硫化氢，不产生硫沉淀，形成硫酸盐；因固氮酶的存在具有固氮能力。氮源主要是铵盐、氨基氮和氮气，少数利用硝酸盐和尿素。5、营养丰富；维生素B特别多，特别是维生素B12，且含丰富的类胡萝卜素、Co Q和蛋白质；缺陷是几乎不含DHA、EPA。6、繁殖快；7、无毒。3.影响光合细菌大量培养的因子有哪些？如何管理？因子：温度、盐度、淡水或海水、光照、 pH。管理：、搅拌或充气； 、调节光照； 、调节温度； 、测定菌液的光密度值 (O.D.)。 、测定和调整pH；2）、生长情况的观察检查。3）、出现问题的分析和处理。4.光合细菌在水产养殖上的作用有哪些？应注意哪些问题？应用：1）、净化水质；（降低氨氮含量）2）、作为水产动物幼体的饵料；3）、作为饲料添加剂；4）、防治疾病。注意问题：1）、菌种的特异性问题；2）、培养方法和生产工艺不同影响菌的质量。3）、具体使用时的问题：使用环境和使用对象要符合其生理生态特性。（A、用“早潜伏期法”； B、选择指数生长期C、考虑水交换量； D、尽可能避免与抗生素同时使用； E、用固定化方式培养的菌则可换水。）第二章：1.什么是纯培养？什么是单种培养？它们有什么区别？纯培养：即无菌培养，是指排除了包括细菌在内的一切生物的条件下进行的培养。单种培养：在培养过程中不排除细菌存在的一种培养方式。2.一次性培养、半连续培养与连续培养三者之间有何异同？一次性培养：在各种容器中，配制培养液，把少量的藻种接种进去，在适宜的环境下培养，经过一段时间（一般5-7d），藻细胞生长繁殖达到较高的密度，一次性全部收获。微藻培养最简单的方法。半连续培养：是在一次性培养的基础上，当培养的藻细胞达到或者接近收获的密度时，每天收获一部分藻液并补充等量的培养液，继续培养。生产上常用方法，每天收获量根据育苗的需要来决定。连续培养：分恒浊培养和恒化培养。恒浊培养：先确定收获中的藻细胞密度，由光电仪器自动监测，当培养容器中藻细胞密度超过规定数值时，藻液自动流出，新的培养液同时流入，自动化仪器不断地调整流出率，保持藻细胞密度相对稳定。恒化培养，以一种重要的营养盐（如硝酸盐）的浓度为指标，当这种营养物质的浓度降低到某一水平时，收获一定的藻液，同时加入等量的含有一定数量的营养物质的培养液，保持培养容器中藻细胞生长率的稳定。连续培养能使藻细胞生长繁殖的环境条件稳定，藻细胞始终处于指数生长期，生长迅速，产量高。3.微藻培养的工艺流程包括哪些环节？试简述之。1、消毒：通过物理或化学方法对容器、工具、海水进行消毒；2、配制培养液：配方的选择、营养盐母液的配制；3、接种：选取无污染、生命力强、生长旺盛的藻种来接种，接种的藻液量与新配制的培养液量的比例，一级培养为1：21：4，二级培养和三级培养比例最少不低于1：50，一般以1：101：20为宜，接种的时间在上午8：0010：00为宜；4、培养管理：1）气体供应 2)、调节光照 3)、调节温度 4)、注意酸碱度的变化5)、防虫、防雨 6）对藻生长情况的观察和检查7）问题的分析和处理；5、采收：一般用水泵直接抽取藻液。4.微藻在一次性培养中的生长具有哪些特征？试简述之。微藻在一次性培养中的生长呈现为五个时期：延缓期：细胞数目没有明显变化，呈暂时静止状态；指数生长期：细胞迅速生长繁殖，细胞数目以几何级数增加；相对生长下降期：细胞生长繁殖的速度与指数生长期相比逐步下降；静止期：细胞数目保持稳定；死亡期：藻细胞大量死亡，细胞数目迅速减少。5.光是如何影响微藻生长的？藻类在光合作用中吸收的光谱是不同的，不同的光质对藻细胞的生长繁殖和细胞物质的合成产生明显影响；不同的藻类各有其适宜的光照强度，超出适光范围，光照强度增加，光合作用反应减弱甚至受到抑制；光在细胞液中的穿透也会影响微藻对光的吸收；不同的藻类有不同的光周期，过强和过长时间的光照会引起光抑制，不利于藻类的生长。6.从自然界中如何分离获得目的藻种（株）？1、采样；2、预培养：1）、营养盐浓度应低些；2）、藻的种类多，尝试多种不同的培养液；3）、培养浓度尽量高；4）、藻类不繁殖，则加入辅助生长有机物质如葡萄糖、蛋白胨等；5）、勤观察，勤检查，及时分离。3、分离 ：1）、初分离：据藻的生物学特性（集群、趋光等）进行分离。2）、微吸管分离法适于个体较大的种类；3）、水滴分离法：（1、制作、选择微吸管；2、消毒工作台、工具；3、稀释藻样；4、试管中加少量培养液，镜检，分离；5、补充培养液至1/4，封口培养。）4）、平板分离法A、制备平板培养基；B、喷雾法或划线法分离。7.微藻藻种应如何保藏？单用固体培养基保藏的藻种，接种后首先放在适宜的光照条件下培养，待藻细胞生长繁殖达到较高的密度，在平板上可看到颜色明显的条状或好块状的藻细胞群，再移置低温、弱光的条件下保藏。双相培养基保藏的藻种，接种后可直接移置低温、弱光的条件下保藏。低温、弱光的条件，通常是指放在冰箱内，温度控制在45之间，冰箱内装一支8W的日光灯管，开光设在冰箱外，每天照明12小时，也可长期连续照明。8.在微藻培养中，二氧化碳是怎样补给的？1）、通过搅拌增加水与空气的接触面，使空气中的二氧化碳溶入培养液中。2）、把普通空气从管道通入培养液中，通过微小气泡增加水与空气的接触面，使空气中的二氧化碳溶入培养液中。3）、把二氧化碳含量为1-5%的混合空气，从管道通入培养液中，可少量连续充气或较大量地间歇充气。4）、在培养液中加碳酸氢钠作为补充碳源。9.藻种水滴分离法的具体操作。1、制作、选择微吸管；2、消毒工作台、工具；3、稀释藻样；4、试管中加少量培养液，镜检，分离；5、补充培养液至1/4，封口培养。绪论与第二章总结:一、名词解释：海泥抽出液：取海滩上沙质较少，有机质较多而又不是过分淤黑的上层软泥，清除其中的小树枝和小石块等杂物，以容量计算一份泥加两份水，充分搅拌均匀，静置12min，待粗沙、小石下沉后，把上层泥浆倾入铝锅中，弃去底部粗沙、小石等杂物，按每1000ml泥浆加入1g的量加入NaOH，煮沸2030min，煮时需不断地搅拌。煮后静置24h，吸取上清液使用。这上清液即为海泥抽出液。人工选育：人工选育是在培养过程中，不经过特殊处理，利用自然变异，有目的地定向选择优良性状的藻种。诱变育种：诱变育种是指人为地利用物理的或化学的因素，诱发微藻产生遗传变异，通过对突变体的选择和鉴定，培育出有利用价值的新品种或新的种质资源。饱和光强（最适光强）：光合作用或细胞分裂速度达到最高值时的光强。光补偿点：光合作用产生的氧气量和呼吸作用消耗的氧气量相等时，细胞只能维持基础代谢而不能生长，这时的光强称。二、简答：如何预防澡液守污染。1、防：1）、思想重视，严格防止污染，藻种要纯；2）、保持培养藻类的生长优势和数量优势；A、接种指数生长期藻种；B、培养条件较适宜于藻种；C、接种量大。3）、做好藻种的分离、培养和供应工作。2、治：1）、过滤；2）、使用药物抑制或杀灭敌害生物（0.03%的医用浓氨水有效杀死尖鼻虫）；3）、改变生态条件（扁藻-73.178.3；盐藻-70100g/L；酸化扁藻-pH3 0.51h）；4）、生物学方法 。三、叙述：1.单胞藻的一般培养方法。一、容器、工具的消毒：1、加热消毒法：1）灼烧 2）煮沸 3）烘箱 4）高压蒸汽灭菌锅；2、化学药品消毒法：1）酒精；2）高锰酸钾；3）含氯消毒剂；二、培养液的配制：1、海水的处理：1）用超滤膜；2）煮水；3）含氯消毒剂处理； 4）超声波处理；2、培养液的配制（施肥）：3、接种：1）考虑藻种的质和量；2）考虑接种的时间。4、培养管理：1）日常管理：A、气体供应；B、调节光照；C、调节温度；D、注意酸碱度的变化；E、防虫、防雨。2）对藻生长情况的观察和检查；A、肉眼观察；B、显微镜检查。3）问题的分析和处理：A、内因；B、外因。2.比较各藻培养的生态条件及形态特征。3.影响微藻生长的因子有哪些？如何影响？影响微藻生长的主要因子有光、温度、营养盐、酸碱度、碳源、有机营养物质和生物因子。光：当营养和温度不限制微藻的生长时，光就成为光能自养微藻的生长的限制因子；温度：微藻只有在适应的温度范围内进行正常生长，超出适应温度范围的底限和高限，微藻的生命活动就受到影响；盐度：盐度对微藻的影响主要表现在渗透压方面，微藻对生活环境的盐度变化有一定的适应范围和最适范围；矿物质营养：微藻需要从外界吸收无机矿物质元素来制造有机物；二氧化碳：二氧化碳是微藻培养中的主要碳源供应形式；有机营养物质：有些微藻在得到有机质后，生长更适宜，在黑暗中进行异养培养时，葡萄糖是常用的碳源；大多数情况下微藻培养中有细菌等其他生物的存在。第三章:1.简要叙述轮虫一次性培养、半连续培养和大面积土池培养方法。一次性培养：在轮虫培养中，先培养微藻饵料，待浓度较大后，接种轮虫进去，补投酵母菌饵料培养，经4-7d，繁殖达到一定的密度，一次全部采收，采收后再清池重新培养。半连续培养：半连续培养又称间收法培养，在轮虫培养池中，先培养藻类饵料，后接种轮虫，培养中补投酵母菌饵料。待轮虫繁殖达一定密度后，每天将一部分轮虫用虹吸法采收。采收后，把藻类培养池的藻液抽入轮虫培养池，补回采收的部分，恢复原来水位。大面积土池培养法：大面积土池培养法也是半连续培养方法的一种。先选定几亩到十几亩。泥质或泥沙质，不渗漏，池底平整，堤坚固的培养池，进行清池处理，待清池药效消失后，即可灌水入池，紧接着即施肥培养微藻饵料，随后进行接种，一般以0.51个/ml较为适宜。维持藻类饵料的数量在适宜的范围，待轮虫繁殖达一定密度后，可用200目筛绢做成拖网沿池边拖曳采收，也可用光诱使轮虫聚集在强光处，直接用水桶舀取。2.试述诱发轮虫两性生殖的主要因子。产生休眠卵有何意义？主要因子：（1）外源因子：生育酚，可能直接作用于轮虫胚胎发育的后期而诱导混交雌体的形成；种群的密度，密度的自我调节是轮虫种群保持稳定的一个重要特点；食物，食物资源组成、丰度和食物的成分对轮虫的混交雌体的形成具有明显的诱导作用；温度，温度对轮虫混交雌体形成的百分率有显著影响；光照，光照对轮虫混交雌体的形成具有诱导的作用；盐度，盐度是影响咸水性种类褶皱臂尾轮虫混交雌体形成的主要外源性因子之一;pH，pH的高低直接影响轮虫混交雌体的产生。（2）内源因子：遗传因素，混交雌体的形成常因同种轮虫不同品系间的遗传差异而存在较大的差异；母体的年龄，母体的年龄与轮虫混交雌体的形成有密切的关系；轮虫孤雌升值的累积世代数，轮虫的有性生殖至少经两个阶段完成。3.轮虫的发育过程可划分为哪些阶段？轮虫的个体发育划分为4个阶段 ，即胚胎发育期、生殖前期、生殖期和生殖后期。胚胎发育期：即卵的发育期，指卵的产出到幼体的孵出所经历的时间；生殖前期：又称幼体阶段或胚后发育，指幼体孵出到其产出第一个卵所经历的时间；生殖期：指第一个卵产出后到最后一个卵产出所经历的时间；生殖后期：又称衰老期，指轮虫最后一个卵产出到其死亡所经历的时间。4.图示3种轮虫休眠卵的主要结构。第四与六章:1.影响桡足类和枝角类生长繁殖的生态条件是什么？桡足类：温度、盐度、溶解度、水质；枝角类：分布状况、温度、盐度、pH值、溶解氧。2.各列举3种能大量培养的枝角类与桡足类。枝角类：多刺裸腹溞、蒙古裸腹溞、僧(seng)帽溞、鸟喙（hui）尖头溞；桡足类：中华哲水蚤、墨氏胸刺水蚤、小拟哲水蚤、太平洋纺锤水蚤。3.桡足类与枝角类在水产养殖的应用。桡足类：桡足类能提高海水鱼幼体的成活率和促进生长：（1）桡足类是鱼虾蟹的天然饵料，摄食桡足类无节幼体能刺激或诱发其开口阶段的摄食反应；（2）海水幼鱼对其他生物饵料的利用率比较低；（3）桡足类的营养与其他生物饵料相比，营养价值高、能满足鱼虾幼体的生长要求。枝角类：（1）作为水产经济动物的幼体饵料；（2）作为饲料的动物蛋白原和幼食剂；（3）在水产养殖水体中起净化水质的作用。第五章:1、名词解释夏卵：夏卵也叫非滞育卵，胚胎发育过程中无滞育阶段，卵外无厚的硬壳，在适宜的温度、盐度条件下，无需特殊处理24h内即能发育成自由泳动的无节幼体。冬卵：也叫滞育卵、休眠卵，卵外有厚的棕色硬壳，胚胎发育过程中有滞育现象，需特殊的滞育终止处理才能发育成无节幼体。孵化率：即孵化百分率或孵化百分比。指每百粒卤虫卵能够孵化出的无节幼体的只数。孵化效率：指每克卤虫卵能够孵化出的无节幼体的只数。孵化产量：指每克卤虫卵能够孵化出的无节幼体的总干重。卤虫滞育卵：是由内源性、生理性或结构性机制引起的发育暂时停止。卤虫静止期：指由于外界不良环境条件导致的低代谢水平的状态。2、比较轮虫和卤虫的生态条件。答：轮虫：（1）温度：10-40C均能生活，25-35C是繁殖的适温范围；（2）盐度：对盐度的突然变化耐力较差，适宜的繁殖盐度在15-25为宜；（3）光照：轮虫繁殖的适宜光照范围为88-200umol/cm*s；（4）PH：对PH适应范围广，在PH5-10均能正常生长繁殖；（5）溶解氧：对低氧甚至段时间缺氧的耐受力很强，培养中应保持溶解氧量1.5mg/L以上；（6）非离子氨：可容忍范围为6-10mg/L，培养中不宜超过1mg/L。卤虫：（1）温度：活体成虫可在-3-42C之间存活，最适温度25-30C；（2）盐度：具有较高的渗透压调节系统，耐高盐，可容忍盐度范围1-340，最适盐度30-50.；（3）水中的离子浓度：卤虫对水域中的离子组成及浓度的耐受范围很广；（4）溶解氧：卤虫具有高效的呼吸色素-血红素，可以在极低溶解氧状态下（1mg/L）生存，也可以生活于溶解氧为饱和溶解度150%的超富氧水体中；（5）酸碱度：适应中性到碱性，孵化过程要求PH8-9。3、如何判别卤虫卵的质量优劣.答：1色泽和气味：好的卤虫卵颜色一般为棕色或棕褐色，有光泽，无霉腥臭味。2泥沙含量：好的卤虫卵无泥沙或极少泥沙。3破壳与碎壳：好的卤虫卵破壳和碎壳的比例极小。4空壳：好的卤虫卵空壳的比例极小。5含水率：优质卵的含水率在5%-8%之间。6大小判别：卤虫卵的大小一定程度上与孵化出的无节幼体的大小呈正相关。4、简述卤虫卵加工的工艺流程。答：1原料卵收集；2用饱和卤水进行比重分离；3饱和卤水的冲淋筛分；4滞育终止处理；5淡水冲洗去盐；6用淡水进行比重分离；7离心脱水；8干燥；9分级；10包装。5、如何制作卤虫去壳卵。答：1卤虫卵的冲洗，浸泡，使卤虫卵充分吸水呈圆球形。2配制去壳液：用次氯酸钠溶液，氢氧化钠和海水按一定比例配制而成。3去壳：卤虫卵的颜色由棕色变成灰白色，最后呈橘红色。4冲洗，脱氢。6、试述卤虫卵的孵化流程及无节幼体的收获方法。答：（1）卤虫卵的孵化流程：1准备工作：包括孵化容器的安装，消毒及孵化用水的准备。2卤虫卵的清洗：浸泡与消毒。3卤虫卵的孵化：把消毒好的卤虫卵放入孵化容器，控制各孵化参数。4幼体适时采收分离。(2)收获方法：静置和光诱相结合的方法。第十章:1.名词解释：营养强化。营养强化即针对生物饵料的营养缺陷，有意识地通过其摄食特定食物进行改善和补偿，达到营养平衡和满足鱼虾幼体发育的需求2.强化轮虫和卤虫HUFA的方法有哪些？轮虫：A。微藻营养强化。B.油脂酵母法 C.油脂乳虫法 D.配合饵料进行强化卤虫：A.微藻强化法 B.乳化油强化法 C.饲料中添加富含HUFA的