UV2450紫外可见分光光度计.doc

UV2450紫外可见分光光度计A、光谱分析（1）开机：分别打开交流稳压电源、UV2450紫外分光光度计主机电源、电脑开机。双击桌面UVProbe图标，打开主窗口，在工具栏上有四个模块：Report（报告）、Kinetic、Photometric（光度测量）、Spectrum（光谱）。点击Spectrum，进入Spectrum模块，这个模块包含三个窗格：Operation（操作）、Method（方法）、Graph（曲线）。（2）基线校正：基线校正就是将所选波长范围内的测量背景设置为0，消除溶剂吸收紫外光的影响，在基线校正结束后，我们将在Instrument history看到包括分析者、数据及时间等内容。在进行基线校正之前应检查样品池中是否有物品遮挡。在窗口中选择了Spectrum，打开Spectrum模块，点击光度计上的连接（Connect）按键条，连接仪器。此时，仪器开始初始化，此过程约需4分钟。初始化结束后，将样品及参比吸收池中装上空白溶剂，放入样品池中，关好样品池盖。点击基线（baseline）按键条，出现基线参数对话框，设定扫描开始波长为500nm，结束波长为190nm。点击OK，进行基线校正。在基线校正过程中，注意光度计状态窗口的内容。注意：取放吸收池时，不得接触吸收池的透光面，以免将其磨毛。吸收池插入样品池架前，需将其外壁的液体擦干，否则溶剂带入，会将样品池腐蚀。擦吸收池应用擦镜纸，向一个方向擦，不要来回擦，以免磨毛吸收池。样品插入样品池架时，应注意方向。基线扫描结束后，点击Instrument history标签，观察基线校正的列表内容。（3）创建一个数据采集方法：选择编辑（Edit）菜单下的方法（Method）,或点击光谱窗口中的方法按钮，显示光谱方法对话框。选择测定（Measurement）标签，进行参数设置。波长范围(Wavelength Range)：开始波长500nm、结束波长190nm；扫描速度(Scan Speed)：中速（Medium）；采样间隔（Sampling Interval）：选择自动采样间隔或每隔1nm采样，扫描方式（Scan mode）选择单一（Single）。其它不做选择，点击OK。选择仪器参数（Instrument Parameters）标签，进行参数设置。测量方式（Measuring mode），选择吸光度（Absorbance），狭缝宽度（Slit Width），选择2.0，其它不做选择，点击确定。保存数据采集方法。选择文件（File）菜单下的另存为（Save As），出现保存光谱文件对话框。选择保存路径，如D：/盐酸小檗碱 文件夹，文件名下输入文件名，如盐酸小檗碱，保存类型选择方法文件（Meathod File(*.smd)）。点击保存按钮，保存数据采集方法。（4）采集数据：待测样品的吸光度可以用上面保存的方法进行测定，首先，在Overly图表下，设定Y轴，点击Y轴最小吸收度值，设定一个值，如-0.2，点击最大吸收度值，设定一个值，如1。X轴的值为创建方法时设定的起始波长。在任何时候，只要开始测定，UVProbe 都会自动地转到Overly图表。测量完成后，如果整个曲线显示不合适，可以点右键，选择自动标记（Auto scale），以调整曲线座标。将待测样品放入样品池。点击开始（Start）按钮，开始扫描。扫描结束后，弹出对话框，将data作为文件名，保存类型选择光谱文件（Spectrum File(*.spc)），点击保存。此时文件只储存于仪器记意中，未存入磁盘，关机后文件会丢失。保存文件。选择文件（File）菜单下的另存为（Save As），将data作为文件名，保存类型选择光谱文件（Spectrum File(*.spc)），D：/盐酸小檗碱作为保存路径，点击保存。（5）显示、打印曲线及图表：运行（Operation）菜单下，选择Peak Pick。在Peak Pick table处点右键