C反应蛋白及其多态性与冠心病.doc

C反应蛋白及其多态性与冠心病作者：韩轩茂（HAN Xuanmao），徐 宁（,XU Ning）综述，贺其图（He Qitu）审校 作者单位：包头医学院 第一附属医院 血液科，包头 014010 冠心病（coronary heart disease，CHD）是人类发病率和死亡率最高的疾病之一。研究显示，炎症反应与CHD的发生、发展密切相关，而C反应蛋白（Creactive protein，CRP ) 是系统性炎症的一个标志物，现仅就其多态性与冠心病的相关性予以综述。 1 CRP的特性 CRP 于1930年被发现，是一种能与肺炎球菌C多糖体反应形成复合物的急性时相反应蛋白。CRP 检测在上世纪80年代以前作为炎症和组织损伤的非特异性标志物大量应用于临床。 在兔模型通过 Northern blot 和 RTPCR，对CRP mRNA进行检测发现，CRP mRNA 只能在肝脏中检测到，而血细胞或巨噬细胞中都没有。人体组织中，这个结果也得到确认，血清 CRP 由肝脏合成。白细胞介素1b、6 以及肿瘤坏死因子为 CRP 合成的最重要的调节因子13。CRP 分子质量105 500 u，由5个相同的未糖基化的多肽亚单位组成，每个亚单位含有187个氨基酸，这些亚单位通过非共价键连结成环状的五聚体，并有一个链间二硫键。CRP 不耐热，66、30 min 即可被破坏。 CRP与磷酸胆碱及半乳糖残基结合，可激活补体的经典途径并充当调理素的作用。CRP还有调节炎症过程和防御感染性疾病的作用。正常健康人血清CRP值较低，一般0.8 g/L，90%的正常人0.3 g/L，99%的正常人CRP1.0 g/L4。而在炎症或急性组织损伤后，CRP 的合成则在 46 h 内迅速增加，3650 h 达高峰，峰值可为正常值的1001 000倍，半衰期较短，约46 h1。经合理治疗后，37 d 降至正常。CRP 的水平与组织损伤后修复程度密切相关。 2 CRP 与 CHD CRP 是炎症和组织损伤的标志物，也是心血管疾病的标志物。而且，CRP不仅是一个危险性指标，还是心血管病发生中起作用的一个因素。动脉粥样硬化演化过程中 CRP 的生物学效应包括免疫和炎症多方面的复杂相互作用，如补体系统，它同样也是斑块发展和演变的病变部位细胞产生的 CRP 的直接效应。 Sun等3在兔动脉硬化模型上检测了CRP 的作用。选择兔模型的原因是，它们能很快对高血脂有反应，形成动脉硬化斑块，且兔 CRP 与人 CRP 有70%的同源性。经研究发现，血液中 CRP 水平与斑块大小具有相关性。CRP 能够在斑块形成的不同时期发现，而且 CRP 与巨噬细胞无关。在人体内也有相同发现。这些资料表明，肝脏生产 CRP 与动脉硬化损害是有相关性的。而 CRP 本身不只是一个指标，其本身就直接参与血管内皮细胞的数种附着蛋白质的基因表现过程。CRP 会影响到这些血管内皮细胞的特性，更明确地说，它会直接引起动脉硬化。据研究，CRP 会增加 vascular cell adhesion molecule (VCAM1)， intercellular adhesion molecule (ICAM1)，和 Eselectin 等3种不同蛋白质血管内皮细胞分子的基因表达。人类 CRP 增高可使患心脏病的实验模型组织受到严重损伤。这些疾病的一个重要特征就是 CRP 与受损细胞结合，引起其补体介导的炎症，这些炎症会引起组织的缺血坏死加剧。部分研究显示，内皮细胞也能够制造CRP， CRP 能够进入人类动脉内皮细胞。Devaraj等5的研究进一步发现了CRP影响内皮细胞的机制：CRP能与Fc受体的免疫球蛋白加工受体家族结合。即 CRP 能够与 Fc 受体家族的 CD 64 和 CD 32 结合，并通过用特定的抗体来抑制这些受体能够逆转CRP对内皮细胞的有害作用。CRP 激活调节补体的能力可能是联系 CRP 与动脉粥样硬化炎症的重要特性。最近的发现表明，除了经典的五聚体 CRP 外，另一种 CRP 异构体即 CRP 亚基（mCRP）在动脉粥样硬化过程中可能也发挥着重要作用。mCRP与纯化的 C1q 具有很强的亲和力，此结合主要由 C1q 的胶原样区域介导。游离状态的 mCRP 可以通过阻止 C1q与其他补体激活物的结合来抑制补体链的激活。而如果与经过氧化或酶解修饰的氧化低密度脂蛋白结合，则 mCRP 可以激活经典的补体途径。值得注意的是，在这种条件下只会产生很低水平的 sC5b96。 许多前瞻性研究发现，在健康个体，CRP 水平与其后来发生的冠状动脉事件有很强的相关性79 。可以说，CRP测定是冠心病危险性评估的一个有用的辅助指标，CRP可能参与了动脉粥样硬化10。但是，CRP浓度与年龄、性别、吸烟、血压、肥胖、糖尿病、生理活性、出生时低体重、激素替代治疗和炎症反应的其他产物有关；心血管病患者 CRP 水平也升高1114。尽管如此，仍然有许多研究证实，个体血浆 CRP 浓度具有遗传特性。估计遗传率对CRP 水平影响范围在 27% 40% 之间，也即 DNA 序列的变化可影响血浆 CRP 水平15,16。 3 CRP 基因多态性与血浆 CRP 水平及 CHD 相关性 已明确编码 CRP 基因总长度为 6.8 kb，包括所有外显子、内含子、1.7 kb上游区和 2.8 kb下游区。现发现 CRP 基因的30多个位点单核苷酸多态性（singlenucleotide polymorphisms，SNPs），如rs3093058、rs3091244、rs1417938、rs3093066、rs1205、rs2808630、Leu184Leu （rs1800947）、Pro133Lys（rs34200896）和Gly166Glu （rs34340208）等。这些多态性中，无论是正常人群还是血栓性疾病患者，部分SNPs或其单倍型都与血浆 CRP 水平有相关性。这种相关性已在一些大样本的研究中得到证实，而 CRP 基因 SNPs与 CHD 的关系尚未完全明了1720。Casas等18通过对有 6 201 例欧洲男性参加的6个研究行meta分析发现， CRP/+1444CT (rs1130864) 多态性与血浆CRP有相关性，但不增加非致命性心肌梗死的危险性。Kathiresan等19对3 301例个体CRP基因13个SNPs位点（rs3116653、rs3116654、rs2794517、rs3122012、rs3091244、rs1417938、rs1800947、rs1130864、rs1205、rs2808630、rs3093077、rs12029262和rs876538）检测，发现其中的9个 SNPs（rs3116653、rs3116654、rs3122012、rs3091244、rs1417938、rs1130864、rs1205、rs3093077和rs12029262）与血浆CRP浓度相关；而 SNP rs3091244 （CTA）与血浆CRP浓度关系更密切，且 SNP rs3091244与另外2个 SNPs （rs1205和rs2808630）组成的单倍型有很高相关性。SNPs rs1205和rs2808630与血浆CRP浓度也相关。Crawford等20在 7 159 例不同种族组成的正常人群中，对CRP基因6个SNPs（rs3093058、rs3091244、rs1417938、rs1800947、rs3093066、rs2808630）与血浆 CRP水平的关系进行了分析，其中，在非西班牙裔黑种人，SNPrs3093058 和 SNPrs3091244（2者存在紧密连锁不平衡）与血CRP 水平升高有相关性；在非西班牙裔黑种人及墨西哥美洲人 SNP rs3091244 （CTA）与血CRP水平升高有相关性；非西班牙裔黑种人 SNPrs1205、SNP rs2808630，墨西哥美洲人 SNP rs1205与血浆 CRP 水平升高有相关性；非西班牙裔黑种人3个 SNPs（ATTGCGA、TTAGCGA，和AAAGAGA）组成的单倍型与血浆 CRP 水平升高有相关性；墨西哥美洲人2个单倍型（ATTGCGA 和 AAAGCGA) 与血浆 CRP 水平增加有相关性；非西班牙裔白种人1 个单倍型(AAAGCGA) 与血浆 CRP 水平增加有相关性，SNP rs3091244 中AA单倍型在可能与冠心病相关。国内方发面的相关研究较少，多数研究样本量不大，且SNPs位点较单一，尚未见大样本、多位点的相关报道。 4 展 望 由于种族、民族和地域的差异，在不同种族正常人群中，血浆 CRP 水平可能不尽相同，CRP 基因 SNPs分布也存在差异，目前这方面的大样本研究尚少，有待进一步加强流行病学调查，以丰富人类基因库，为研究 CRP 基因 SNPs 相关的疾病提供基础资料。而在血浆 CRP 水平及其基因 SNPs 与疾病的研究中，还要严格选择病例，排除混杂因素，尤其是引起血浆CRP水平升高的亚临床疾病；通过多中心、大样本的临床研究，筛选与疾病相关的 CRP基因 SNPs 及其单倍型；对 CRP 基因 SNPs 研究也应该多个位点同时检测，才能对 CRP 基因SNPs 与疾病的相关性有更全面的了解，筛选出疾病的易感 SNPs。目前，关于血浆 CRP 水平及其基因 SNPs 与疾病种类的研究，大多集中于冠心病，而与高血压、周围动脉血栓性疾病、缺血性脑卒中和静脉血栓栓塞的相关研究较少，相信随着研究的深入，这些研究会得到加强。也许会出现随机控制的临床研究，选择性地降低 CRP 浓度，为研究 CRP水平和疾病的相关性提供无偏倚的结果；同时通过 CRP 基因 SNPs 与疾病研究，提供某种位点靶向治疗的药物。【参考文献】 1STEEL DM,WHITEHEAD AS.The major acute phase reactants:Creative protain,serum amyloid P component and serum amyloid A proteinJ. Immunol Today,1994,15:8188.2BUCK C,BUNDSCHU J,GALLATI H,et al.Interleukin6:a sensitive parameter for the early diagnosis of neonatal bacterial infectionJ. Pediatrics, 1994,93:5458.3SUN H, KOIKE T, ICHIKAWA T, et al. Creactive protein in atherosclerotic lesions: its origin and pathophysiological significanceJ. Am J Pathol, 2005,167:11391148.4TEJANI NR,CHONMAITREE T,RASSIN DK,et al.Use of Creactive protein in differentiation between acute bacterial and viral otitis mediaJ. Pediatrics,1995,95:664669.5DEVARAJ S, DU CLOS TW, JIALAL I.Binding and internalization of Creactive protein by Fcgamma receptors on human aortic endothelial cells mediates biological effectsJ. Arterioscler Thromb Vasc Biol, 2005,25:13591363.6JI SR, WU Y, POTEMPA LA, LIANG YH,et al. Effect of modified Creactive protein on complement activation: a possible complement regulatory role of modified or monomeric Creactive protein in atherosclerotic lesionsJ. Arterioscler Thromb Vasc Biol, 2006,26:935941. 7RIDKER PM, CUSHMAN M, STAMPFER MJ, et al.Inflammation, aspirin, and the risk of cardiovascular disease in apparently healthy menJ. N Engl J Med,1997，336:973979.8RIDKER PM, HENNEKENS CH, BURING JE, et al. Creactive protein and other markers of inflammation in the prediction of cardiovascular disease in womenJ. N Engl J Med,2000,342: 836843.9KULLER LH, TRACY RP, SHATEN J, et al. Relation of Creactive protein and coronary heart disease in the MRFIT nested casecontrol study. Multiple Risk Factor Intervention TrialJ. Am J Epidemiol, 1996,144:537547.10 PEARSON TA, MENSAH GA, ALEXANDER RW, et al. Markers of inflammation and cardiovascular disease: application to clinical and public health practice: A statement for healthcare professionals from the Centers for Disease Control and Prevention and the American Heart AssociationJ. Circulation ,2003,107:499511.11 PEPYS MB, HIRSCHFIELD GM. Creactive protein: a critical updateJ. J Clin Invest, 2003,111:18051812.12 DANESH J, WHINCUP P, WALKER M, et al. Low grade inflammation and coronary heart disease: prospective study and updated metaanalysesJ. BMJ, 2000,321:199204.13 FREEMAN DJ, NORRIE J, CASLAKE MJ, et al. West of Scotland Coronary Prevention Study. Creactive protein is an independent predictor of risk for the development of diabetes mellitus in the West of Scotland Coronary Prevention StudyJ. Diabetes, 2002,51:15961600.14 SATTAR N, MCCONNACHIE A, OREILLY D, et al. Inverse association between birthweight and Creactive protein concentrations in the MIDSPAN family studyJ. Arterioscler Thromb Vasc Biol,2004,24:583587.15 PANKOW JS, FOLSOM AR, CUSHMAN M,et al. Familial and genetic determinants of systemic markers of inflammation: the NHLBI family heart studyJ. Atherosclerosis, 2001,154:681689.16 DUPUIS J, LARSON MG, VASAN RS, et al. Genome scan of systemic biomarkers of vascular inflammation in the Fram