大肠埃希菌产超广谱β内酰胺酶的检测与耐药性分析.doc

大肠埃希菌产超广谱内酰胺酶的检测与耐药性分析作者：谢裕达单位：广东省佛山市南海区黄岐医院检验科, 广东佛山【摘要】 目的 通过对临床上分离出的大肠埃希菌株和产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)菌株进行检测及其耐药性分析。方法 临床上用API20E自动细菌分析仪分离出232株大肠埃希菌，经过鉴定确认ESBLs菌株，并用纸片扩散法做药敏试验。结果 共检出产ESBLs108株。产ESBLs菌呈多重耐药，其耐药率明显高于非产ESBLs菌，对产ESBLs菌具较高抗菌活性的抗生素有亚胺培南或美洛培南。结论 临床上出现的产ESBLs大肠埃希菌的耐药率较高，应引起临床高度重视。 【关键词】 β内酰胺酶类；大肠埃希菌；耐药性超广谱β内酰胺酶（ESBLs）是一种由细菌质粒介导，广谱β内酰胺酶突变而来，可水解青霉素、灭活头孢菌类及单环类抗生素等β内酰胺抗生素类的丝氨酸蛋白酶衍生物，它是对β内酰胺酶酶抑制剂、碳青霉烯类、头霉烯类药物敏感的一类酶12。随着包括各类头孢菌素在内的β内酰胺抗生素在临床的广泛使用，能产ESBLs的细菌种类不断增加，具ESBLs表型的基因种类也不断增加。而大肠埃希氏菌(Escheriichia co1i，E.coli)是产ESBLs主要的一种病原菌，同时也是医院内感染的主要病原菌之一。为此，为指导临床更有效地用药，现对我院临床感染病例中分离出的产ESBLs菌株进行分析。1 材料和方法1.1 菌株实验检测的大肠埃希菌菌株来自2006年7月至2007年6月我院住院患者送检的各类临床标本，包括中段尿、痰液、血液、伤口分泌物、胆汁、引流物及其它标本，共分离出232株。质控菌株为肺炎克雷伯ATCC700603(ESBLs产生株)，大肠埃希菌ATCC25922(ESBLs阴性株)，均为本室保存。 1.2 仪器及药敏纸片 API20E鉴定系统及其配套鉴定卡条为法国梅里埃公司产品，MH琼脂为北京天坛生物制品研究所产品。抗生素药敏药片由杭州天和微生物试剂公司提供。1.3 药敏实验 采用MIC法，判定标准遵照美国临床实验室标准化委员会(NCCLs，1999)规定执行。计算中将“中敏”归于“耐药”统计。ESBLs表型确证试验：受试菌配0.5麦氏单位菌液，涂于水解酪氨酸蛋白(MH)平板上, 贴上头孢他啶，头孢他啶/棒酸；头孢噻肟，头孢噻肟/棒酸纸片。置于37培养24h后观察结果，任何一组纸片加棒酸和不加棒酸的抑菌环直径大于5mm为阳性，否则为阴性。质控结果均在NCCLs规定的范围内。 2 结果 在分离出的232株大肠埃希菌，产ESBLs的菌株108株，占46.6%；非产ESBLs的菌株124株，占53.4%。大肠埃希菌ESBLs阳性菌株与阴性菌株耐药情况见表1。 表1 大肠埃希菌ESBLs阳性菌株与阴性菌株的耐药率（略）3 讨论临床抗菌药物的大量和不合理应用是细菌整合子分子进化和捕获更多耐药基因的重要原因。近年来，国内有关超广谱β内酰胺酶细菌检出率的报道出现逐年上升，并成为医院感染的重要病原菌13。为了防治产ESBLs细菌的流行，首先要尽早检出产ESBLs细菌，才能有助于控制此类耐药细菌及其耐药质粒的传播。本次研究结果显示，在分离出的232株大肠埃希菌，产ESBLs的菌株有108株，占46.6%；而非产ESBLs的菌株有124株，占53.4%。表明产ESBLs 的菌株已经开始在临床分离的大肠埃希菌中占有较高比率。由表1可以看出，头孢菌素类的耐药性均较低，只有大概10%以内的耐药，可见产ESBLs菌株的多重耐药性，耐药率也高，对临床有效用药造成严重影响。因此，要对临床上分离出的革兰阴性杆菌做ESBLs确证试验，得到产ESBLs菌株的药敏情况，结合其耐药的特点，合理地指导临床用药，以免延长住院时间，延误病情和造成浪费。治疗时应选用对 ESBLs稳定的抗菌药物,亚胺培南或美洛培南等碳青霉烯类抗生素为首选 ，对一般感染或严重感染病情稳定后改药的，可根据药敏结果选用氨基糖甙类(阿米卡星)、喹诺酮类(环丙沙星)联合亚胺培南。 但本组108株产ESBLs的大肠埃希菌耐药情况较严重，且呈多重耐药，头孢菌素类抗生素，如头孢唑啉、头孢曲松、头孢噻肟和头孢他啶都产生了耐药性,而氨苄西林和哌拉西林的耐药性也较为严重，产ESBLs的菌株对亚胺培南、美洛培南及阿米卡星仍较敏感，与相关研究结果相似45。【参考文献】 1李晨,周树清,高军,等.临床产超广谱β内酞胺酶菌株的耐药性分析J.中国康复理论与实践,2005,11(4):297298.2杨立军,朱立华,徐国宾,等.产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌耐药株中整合子基因研究J.中华检验医学杂志,2003,26(7) :436438.3廖晚珍.哪些菌需检测超广谱β内酰胺酶有何意义J.江西医学检验, 2001，19(1):3. 4赵爱农，褚云卓.医院内产超广谱β内酰胺酶菌株的调查及耐药性分析J.中国实验诊断学,2006,10(6):270271.5赵旺胜,许乃顺,