SC-TP-017-02 生长抑素生产工艺规程.doc

双成药业 GMP管理文件 编码：SC-TP-017-02 文件名称生长抑素工艺规程编 制 者审 核 者批 准 者编制日期审核日期批准日期编制依据中华人民共和国药典2005年版药品生产质量管理规范1998年修订药品生产质量管理规范1998年修订药品注册批件2006S05219颁发部门质量管理部制作备份分发部门质量管理部、生产技术部 实施日期一、目的：本工艺规程是经过验证并对生长抑素的设计、生产、包装、标准及质量控制进行全面描述的基准性技术文件，是制定岗位SOP、批生产记录和批生产指令的重要依据。二、范围：本规程适用于生长抑素的生产和质量管理，以及相关物料的供应。三、职责：生产技术部和质量管理部对本规程实施负责。四、依据：中华人民共和国药典2005年版药品生产质量管理规范1998修订药品注册批件2006S05219 五、目录1. 产品概述2. 制备方法3. 工艺流程4. 操作过程及工艺条件5. 原料质量标准6. 辅料质量标准7. 中间产品质量标准 8. 成品质量标准9. 质量监控10. 物料消耗定额11. 设备12. 技术安全及劳动保护13. 卫生14. 劳动组织与岗位定员、生产周期15. 技术经济指标的计算六、内容1 产品概述1.1通 用 名：生长抑素1.2英文名/拉丁名：Somatostatin 结 构 式：分子式：C76H104N18O19S2分子量：16381.3性 状：本品为白色粉末1.4有 效 期：24个月1.5贮 藏：遮光，密封，2-8保存1.6包 装：PVC瓶1.7制 剂：注射用生长抑素1.8 批准文号：国药准字号H20066874 2.制备方法 生长抑素的制备是采用多肽固相合成技术，在树脂上按生长抑素的一级结构依次连接氨基酸，形成多肽，然后用三氟醋酸（TFA）将多肽从树脂上分离下来，得到二氢生长抑素，使用空气氧化法氧化得到生长抑素粗品，再采用高效液相色谱技术对进行分离纯化，最终得到纯度为98%以上的生长抑素。3三氟醋酸生长抑素工艺流程图原料 脱去树脂上N一端的Fmoc保护基因 激活下一个Fmoc保护氨基酸，进行偶联反应以上三步为一周期，重复13次 配液 去保护 氨基酸活化偶联二氢生长抑素粗品 粗品乙醚沉淀切割十万级区空气氧化浓缩、冻干冷冻干燥 检验合格粗 品一般区粗品溶解 RP-HPLC纯化 检验合格 装格半成品RP-HPLC转化为醋酸盐浓 缩入库检验合格包 装冷冻干燥冷冻干燥4. 操作过程及工艺条件4.1合成4.1.1准备4.1.1.1 根据合成指令分别领取合成所需的原料、辅料、试剂等，核对原料、辅料、试剂的名称、批号、物料编码、规格，准确无误后方可领取。在物净间去除外包装，用75%乙醇擦拭后，经传递窗送至合成室。4.1.1.2 检查合成所需氮气是否已准备好，压力、阀门、管道状态是否正常。 4.1.1.3 按规定进行清场，将合成所需容器具清洗干净，自然晾干后备用。 4.1.2 溶液的配制4.1.2.1 20%六氢吡啶（PIP）的配制：用量筒量取200ml六氢吡啶溶解于二甲基甲酰胺（DMF）中并定容至1000ml，将配好的试剂倒入指定的试剂瓶中，贴上标签。 4.1.2.2 40% DIEA溶液的配制：用量筒量取DIEA400ml，加入DCM 400ml，摇匀；加入DMF至1000ml，摇匀即得，将配好的试剂倒入指定的试剂瓶中，贴上标签。4.1.2.3 0.05mol/L 醋酸铵溶液的配制：称取7.7g醋酸铵，用去离子水溶解，定容至1000ml使成0.1mol/L 醋酸铵溶液，然后用去离子水稀释配制成0.05mol/L 醋酸铵溶液。4.1.2.4 Kaiser检测试液的配制试液A：2.5茚三酮/丙酮（重量/体积）试液B：1克醋酸钙/50毫升醋酸/100毫升水4.1.2.5 将配制好的溶液倒入指定的试剂瓶中，帖好标签，填写配制记录。4.1.3 投料量的计算：4.1.3.1根据合成树脂的量以及树脂的取代值求出理论产量，以及各种氨基酸和其他试剂的用量。其中树脂载量与氨基酸的摩尔比= 1：3。4.1.3.2各个氨基酸投料量为：Fmoc-Aa用量(g)树脂质量树脂取代值Fmoc-Aa分子量摩尔比/1000；精确称量保护氨基酸，并做好记录。4.1.3.3 氨基酸：HBTU：DIEA的摩尔比=1：1：2。4.1.4 树脂的检测：取树脂1030粒，加入一滴试液A，再加入一滴试液B，在70下加热5分钟，观察树脂的颜色。若结果为淡黄色或灰白色，则可用于合成反应；若结果不是淡黄色或灰白色，表明树脂不符合要求，不得使用。 4.1.5 按合成指令准确称量树脂倒入反应器中，将反应器接到合成仪正确位置。向反应器中加入适量的DMF（树脂质量/g2.5ml/g），树脂在其中浸泡1小时后，排空DMF。4.1.6 开启合成仪启动氨基酸连接程序，加入20%的PIP溶液适量（树脂质量/g2.5ml/g），室温搅拌反应30分钟。待去保护后，再取出少量树脂作Kaise检测，若结 果为蓝色，则进行下一步，否则需继续进行去保护直至Kaise检测的结果为蓝色为止。 4.1.7 准确称取所需各种氨基酸、HBTU，用适量的DMF溶解后 （树脂质量/g2.5ml/g），再按规定量准确量取DIEA，加入反应器中，将反应器接到合成仪上。4.1.8 继续启动此程序，待连接反应一段时间后（例如0.5小时），取出少量树脂作Kaise检测。若Kaise检测为淡黄色或灰白色，则可进行下一步；若结果显蓝色，则需延长连接反应时间，直至Kaise检测结果为淡黄色或灰白色为止。4.1.9 待该步连接反应结束后，启动清洗程序，使用适量（树脂质量/g2.5ml/g）的DMF连续清洗树脂3次。重新启动该连接程序，连接下一个氨基酸，如此重复，直至氨基酸全部连接为止。 表1 保护氨基酸名称及顺序序号弗马克保护氨基酸名称氨基酸顺序1Fmoc-Cys(Trt)-Wang 树脂12Fmoc-Ser(tBu)-OH23Fmoc-Thr(tBu)-OH3、54Fmoc-Phe-OH4、8、95Fmoc-Lys(Boc)-OH6、116Fmoc-Trp(Boc)-OH77Fmoc-Asn(Trt)-OH108Fmoc-Cys(Trt)-OH129Fmoc-Gly-OH1310Fmoc-Ala-OH144.2 切割4.2.1 将装有合成产物的容器置冰水浴中，配制TFA/EDT/水（95：2.5：2.5）的混合溶液适量（树脂质量/g10ml/g），加入含有合成产物的容器中，使得合成产物能够悬浮在混合溶液中。4.2.2 浓缩： 常温下用磁力搅拌器搅拌2小时后使用砂芯漏斗抽滤，滤液旋转蒸发至约1/4体积（浓缩至出现白色沉淀为佳）。将浓缩后的滤液滴加到-10左右的冰乙醚中，乙醚的体积应约为滤液体积的10倍左右。.4.2.3 将上述产物在-20左右静置30分钟后取出，摇匀抽滤，其沉淀物即为二氢生长抑素三氟醋酸盐。将二氢生长抑素粗品置于真空干燥箱中减压干燥至恒重。4.2.4 氧化：将二氢生长抑素粗品溶解在0.05mol/L的醋酸铵缓冲液中（PH=6-7），得到10mg/ml的溶液，空气氧化24h。4.2.5 浓缩及冻干：将氧化液浓缩至1/10体积，冷冻干燥得到生长抑素粗品。取出称重，并做粗肽含量检验。做好标识置冰箱内保存。4.3纯化 4.3.1 粗品溶解：准确称取所需的生长抑素粗品，倒入锥形瓶或烧杯中。4.3.2 按每0.5g粗品加入醋酸水溶液(1/3，v/v)10ml溶解，在磁力搅拌器上搅拌10分钟。经离心或过滤处理除去不溶物，得到澄清溶液。4.3.3 贴上标签，注明品名、批号、溶解日期、操作人等。4.3.4 纯化设备及条件：制备液相色谱仪：美国VARIAN公司色谱柱：C18（77mm25cm）流动相A：0.1TFA/10乙腈的水溶液流动相B：0.1TFA/90乙腈的水溶液洗脱梯度：（1）0-50min: 15-30流动相B； （2）50-60min: 30%-70流动相B； （3）60-63min: 70流动相B；（4）63-64min: 70%-15流动相B；（5）64-74min: 15流动相B。流速：90ml/min检测波长：215nm4.3.5 操作：按“SD-1型制备高效液相色谱仪标准操作规程”开机、进样。用适宜的容器接收相应吸收峰所代表的样品。4.3.6 浓缩：将纯化后的产品置旋转蒸发器中，在38-40下减压蒸发浓缩，浓缩体积至原体积的1/10。用直径为0.45m微孔滤膜过滤即得生长抑素三氟醋酸盐浓缩液。4.3.7冷冻干燥：将浓缩液置冻干盘中，在超低温冰箱下冷冻12小时以上，然后置冷冻干燥机中干燥48小时以上。4.3.8 将冻干所得的生长抑素三氟醋酸盐称重后，置于PVC瓶中,用封口膜密封，贴上标签，标明产品名称，批号，生产日期，重量等， 置于冰箱中28保存。4.3.9 检验：生产完成后由合成车间填写请验单，QA员取样交化验室检验，合格后签发生长抑素三氟醋酸盐检验报告书。4.4 反相HPLC换盐精制4.4.1 溶解： 将生长抑素三氟醋酸盐从冰箱中取出，放置室温下回温。按精制指令准确称取所需的量，倒入锥形瓶或烧杯中。4.4.2 按每30g生长抑素三氟醋酸盐加入500ml流动相A溶解，用0.5mol/L的NaOH溶液调节pH=6.0，再用0.22m滤膜滤过。贴上标签，注明品名、批号、溶解日期、操作人等，备用。4.4.3 设备及条件：制备液相色谱仪：美国瓦里安公司prepstar SD-1色谱柱：C18（75mm25cm）流动相A：1.0醋酸/水溶液流动相B：1.0醋酸/乙腈溶液洗脱梯度：流动相B： 1、0-30min5%B2、30-31min5-30% 3、31-60min30% 4、60-61min30-5% 5、61-70min5%流速：60ml/min检测波长：215nm进样量：200ml4.4.4 按“SD-1制备高效液相色谱仪标准操作规程”开机、进样、收集相应吸收峰所代表的组分溶液。4.5浓缩：收集到的组分溶液置旋转蒸发器中，在40下减压浓缩，浓缩体积至原体积的1/5,得到产品浓缩液。4.6冷冻干燥4.6.1将浓缩液置冻干盘中，在超低温冰箱下冷冻12小时以上，然后置冷冻干燥机中干燥48小时以上。4.6.2 将冻干所得的生长抑素称重后，置于PVC瓶中,用封口膜密封，贴上标签，标明产品名称，批号，生产日期，有效期、重量等，置于冰箱中28保存。4.7 检验：生产完成后由纯化精制岗位填写请验单，QA员取样交化验室检验，合格后签发生长抑素检验报告书。4.8 质量管理部对批生产记录、批检验记录进行审核，合格后签发原料药批审核放行表，仓库凭审核放行表办理出入库手续5原料质量标准5.1 Fmoc-Ala-OH质量标准氟马克-丙氨酸Fmoc-Ala-OHC18H17NO4 311.3本品为丙氨酸衍生物。按纯度计算含C18H17NO4应不低于98.5%。【性状】本品为白色粉末。熔点 本品的熔点(中国药典2005年版二部附录C)为148.0153.0。比旋度 取本品，精密称定，用N,N-二甲基甲酰胺溶解并配制成每1ml含10mg的溶液，依法测定（中国药典2005年版二部附录E），比旋度应为-17.0-20.0【鉴别】分别取本品和对照品适量，照纯度测定项下方法，本品的保留时间与对照品一致。【检查】溶液澄清度 取本品0.3g，加2ml N,N-二甲基甲酰胺使溶解，溶液应澄清（中国药典2005年版二部附录B）。水分 取本品适量，照水分测定法依法测定（中国药典2005年版二部附录M第一法），水分含量不得过1.0%。【纯度测定】照高效液相色谱法测定（中国药典2005年版二部附录D）系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.05mol/L三乙胺磷酸缓冲液（pH=2.3）为流动相A，以0.05mol/L三乙胺磷酸缓冲液（pH=2.3）-乙腈（30：70）为流动相B，采用梯度洗脱，在30分钟内流动相B由50%增加到100%，并在31分钟时降为50%，用50%B平衡7分钟，检测波长为210nm，理论板数按主峰计算应不低于3000.测定法 取本品适量，加流动相制成每1ml中含0.2mg的供试品溶液。取预试液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，按归一化计算，即得。【用途】肽合成用。【贮藏】密封、阴凉避光处保存。5.2 Fmoc-Asn(Trt) -OH质量标准氟马克-天冬酰胺Fmoc-Asn(Trt)-OHC38H32N2O5 596.7本品为天冬酰胺衍生物。按纯度计算含C38H32N2O5应不低于98.5%。【性状】本品为白色或类白色粉末。熔点 本品的熔点(中国药典2005年版二部附录C)为200（分解）。比旋度 取本品，精密称定，用甲醇溶解并配制成每1ml含10mg的溶液，依法测定（中国药典2005年版二部附录E），比旋度应为-13.0-17.0【鉴别】分别取本品和对照品适量，照纯度测定项下方法，本品的色谱保留时间与对照品一致。【检查】溶液澄清度 取本品0.3g，加2ml N,N-二甲基甲酰胺使溶解，溶液应澄清（中国药典2005年版二部附录B）。水分 取本品适量，照水分测定法依法测定（中国药典2005年版二部附录M第一法），水分含量不得过1.0%。【纯度测定】照高效液相色谱法测定（中国药典2005年版二部附录D）系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.05mol/L三乙胺磷酸缓冲液（pH=2.3）为流动相A，以0.05mol/L三乙胺磷酸缓冲液（pH=2.3）-乙腈（30：70）为流动相B，采用梯度洗脱，在30分钟内流动相B由50%增加到100%，并在31分钟时降为50%，用50%B平衡7分钟，检测波长为210nm，理论板数按主峰计算应不低于3000。测定法 取本品适量，加流动相制成每1ml中含0.2mg的供试品溶液。取预试液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，按归一化计算，即得。【用途】肽合成用。【贮藏】密封、阴凉避光处保存。5.3 Fmoc-Cys(Trt)-OH质量标准氟马克-半胱氨酸Fmoc-Cys(Trt)-OHC37H31NO4 585.73本品为半胱氨酸衍生物。按纯度计算含C37H31NO4应不低于98.5%。【性状】本品为白色粉末。熔点 本品的熔点(中国药典2005年版二部附录C)为173.0180.0。比旋度 取本品，精密称定，用N,N-二甲基甲酰胺溶解并配制成每1ml含10mg的溶液，依法测定（中国药典2005年版二部附录E），比旋度应为+19.0+21.0【鉴别】分别取本品和对照品适量，照纯度测定项下方法，本品的色谱保留时间与对照品一致。【检查】溶液澄清度 取本品0.3g，加2ml N,N-二甲基甲酰胺使溶解，溶液应澄清（中国药典2005年版二部附录B）。水分 取本品适量，照水分测定法依法测定（中国药典2005年版二部附录M第一法），水分含量不得过1.0%。【纯度测定】照高效液相色谱法测定（中国药典2005年版二部附录D）系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.05mol/L三乙胺磷酸缓冲液（pH=2.3）为流动相A，以0.05mol/L三乙胺磷酸缓冲液（pH=2.3）-乙腈（30：70）为流动相B，采用梯度洗脱，在30分钟内流动相B由50%增加到100%，并在31分钟时降为50%，用50%B平衡7分钟，检测波长为210nm，理论板数按主峰计算应不低于3000。测定法 取本品适量，加流动相制成每1ml中含0.2mg的供试品溶液。取预试液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，按归一化计算，即得。【用途】肽合成用。【贮藏】密封、阴凉避光处保存。5.4 Fmoc-Gly-OH质量标准氟马克-甘氨酸Fmoc-Gly-OHC17H15NO4 297.3本品为甘氨酸衍生物。按纯度计算含C17H15NO4应不低于98.5%。【性状】本品为白色粉末。熔点 本品的熔点(中国药典2005年版二部附录C)为171.0176.0。【鉴别】分别取本品和对照品适量，照纯度测定项下方法，本品的色谱保留时间与对照品一致。【检查】溶液澄清度 取本品0.3g，加2ml N,N-二甲基甲酰胺使溶解，溶液应澄清（中国药典2005年版二部附录B）。水分 取本品适量，照水分测定法依法测定（中国药典2005年版二部附录M第一法），水分含量不得过1.0%。【纯度测定】照高效液相色谱法测定（中国药典2005年版二部附录D）系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.05mol/L三乙胺磷酸缓冲液（pH=2.3）为流动相A，以0.05mol/L三乙胺磷酸缓冲液（pH=2.3）-乙腈（30：70）为流动相B，采用梯度洗脱，在30分钟内流动相B由50%增加到100%，并在31分钟时降为50%，用50%B平衡7分钟，检测波长为210nm，理论板数按主峰计算应不低于3000。测定法 取本品适量，加流动相制成每1ml中含0.2mg的供试品溶液。取预试液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，按归一化计算，即得。【用途】肽合成用。【贮藏】密封、阴凉避光处保存。5.5 Fmoc-Lys(Boc)-OH质量标准氟马克-赖氨酸Fmoc-Lys(Boc)-OH C26H32N2O6 468.58本品为赖氨酸衍生物。按纯度计算含C26H32N2O6应不低于98.5%。【性状】本品为白色粉末。熔点 本品的熔点(中国药典2005年版二部附录C)为125.0135.0。比旋度 取本品，精密称定，用N,N-二甲基甲酰胺溶解并配制成每1ml含10mg的溶液，依法测定（中国药典2005年版二部附录E），比旋度应为-10.0-15.0【鉴别】分别取本品和对照品适量，照纯度测定项下方法，本品的色谱保留时间与对照品一致。【检查】溶液澄清度 取本品0.3g，加2ml N,N-二甲基甲酰胺使溶解，溶液应澄清（中国药典2005年版二部附录B）。水分 取本品适量，照水分测定法依法测定（中国药典2005年版二部附录M第一法），水分含量不得过1.0%。【纯度测定】照高效液相色谱法测定（中国药典2005年版二部附录D）系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.05mol/L三乙胺磷酸缓冲液（pH=2.3）为流动相A，以0.05mol/L三乙胺磷酸缓冲液（pH=2.3）-乙腈（30：70）为流动相B，采用梯度洗脱，在30分钟内流动相B由50%增加到100%，并在31分钟时降为50%，用50%B平衡7分钟，检测波长为210nm，理论板数按主峰计算应不低于3000。测定法 取本品适量，加流动相制成每1ml中含0.2mg的供试品溶液。取预试液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，按归一化计算，即得。【用途】肽合成用。【贮藏】密封、阴凉避光处保存。5.6 Fmoc-Phe -OH质量标准氟马克-苯丙氨酸Fmoc-Phe-OH C24H21NO4 387.4本品为苯丙氨酸衍生物。按纯度计算含C24H21NO4应不低于98.5%。【性状】本品为白色粉末。熔点 本品的熔点(中国药典2005年版二部附录C)为180.0186.0。比旋度 取本品，精密称定，用N,N-二甲基甲酰胺溶解并配制成每1ml含10mg的溶液，依法测定（中国药典2005年版二部附录E），比旋度应为-36.0-40.0【鉴别】分别取本品和对照品适量，照纯度测定项下方法，本品的色谱保留时间与对照品一致。【检查】溶液澄清度 取本品0.3g，加2ml N,N-二甲基甲酰胺使溶解，溶液应澄清（中国药典2005年版二部附录B）。水分 取本品适量，照水分测定法依法测定（中国药典2005年版二部附录M第一法），水分含量不得过1.0%。【纯度测定】照高效液相色谱法测定（中国药典2005年版二部附录D）系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.05mol/L三乙胺磷酸缓冲液（pH=2.3）为流动相A，以0.05mol/L三乙胺磷酸缓冲液（pH=2.3）-乙腈（30：70）为流动相B，采用梯度洗脱，在30分钟内流动相B由50%增加到100%，并在31分钟时降为50%，用50%B平衡7分钟，检测波长为210nm，理论板数按主峰计算应不低于3000。测定法 取本品适量，加流动相制成每1ml中含0.2mg的供试品溶液。取预试液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，按归一化计算，即得。【用途】肽合成用。【贮藏】密封、阴凉避光处保存。5.7 Fmoc-Ser(tBu) -OH质量标准氟马克-丝氨酸Fmoc-Ser(tBu) -OHC22H25NO5 383.44本品为丝氨酸衍生物。按纯度计算含C22H25NO5应不低于98.5%。【性状】本品为白色粉末。熔点 本品的熔点(中国药典2005年版二部附录C)为125.0130.0。比旋度 取本品，精密称定，用乙酸乙酯溶解并配制成每1ml含10mg的溶液，依法测定（中国药典2005年版二部附录E），比旋度应为+24.0+26.0【鉴别】分别取本品和对照品适量，照纯度测定项下方法，本品的色谱保留时间与对照品一致。【检查】溶液澄清度 取本品0.3g，加2ml N,N-二甲基甲酰胺使溶解，溶液应澄清（中国药典2005年版二部附录B）。水分 取本品适量，照水分测定法依法测定（中国药典2005年版二部附录M第一法），水分含量不得过1.0%。【纯度测定】照高效液相色谱法测定（中国药典2005年版二部附录D）系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.05mol/L三乙胺磷酸缓冲液（pH=2.3）为流动相A，以0.05mol/L三乙胺磷酸缓冲液（pH=2.3）-乙腈（30：70）为流动相B，采用梯度洗脱，在30分钟内流动相B由50%增加到100%，并在31分钟时降为50%，用50%B平衡7分钟，检测波长为210nm，理论板数按主峰计算应不低于3000。测定法 取本品适量，加流动相制成每1ml中含0.2mg的供试品溶液。取预试液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，按归一化计算，即得。【用途】肽合成用。【贮藏】密封、阴凉避光处保存。5.8 Fmoc-Thr(tBu) -OH质量标准氟马克-苏氨酸Fmoc-Thr(tBu) -OHC23H27NO5 397.5本品为苏氨酸衍生物。按纯度计算含C23H27NO5应不低于98.5%。【性状】本品为白色粉末。熔点 本品的熔点(中国药典2005年版二部附录C)为130.0135.0。比旋度 取本品，精密称定，用乙酸乙酯溶解并配制成每1ml含10mg的溶液，依法测定（中国药典2005年版二部附录E），比旋度应为+14.0+17.0【鉴别】分别取本品和对照品适量，照纯度测定项下方法，本品的色谱保留时间与对照品一致。【检查】溶液澄清度 取本品0.3g，加2ml N,N-二甲基甲酰胺使溶解，溶液应澄清（中国药典2005年版二部附录B）。水分 取本品适量，照水分测定法依法测定（中国药典2005年版二部附录M第一法），水分含量不得过1.0%。【纯度测定】照高效液相色谱法测定（中国药典2005年版二部附录D）系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.05mol/L三乙胺磷酸缓冲液（pH=2.3）为流动相A，以0.05mol/L三乙胺磷酸缓冲液（pH=2.3）-乙腈（30：70）为流动相B，采用梯度洗脱，在30分钟内流动相B由50%增加到100%，并在31分钟时降为50%，用50%B平衡7分钟，检测波长为210nm，理论板数按主峰计算应不低于3000。测定法 取本品适量，加流动相制成每1ml中含0.2mg的供试品溶液。取预试液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，按归一化计算，即得。【用途】肽合成用。【贮藏】密封、阴凉避光处保存。5.9 Fmoc-Trp(Boc)-OH质量标准氟马克-色氨酸Fmoc-Trp(Boc)-OH C31H30N2O6 526.6本品为色氨酸衍生物。按纯度计算含C31H30N2O6应不低于98.5%。【性状】本品为白色粉末。熔点 本品的熔点(中国药典2005年版二部附录C)为86.093.0。比旋度 取本品，精密称定，用N,N-二甲基甲酰胺溶解并配制成每1ml含10mg的溶液，依法测定（中国药典2005年版二部附录E），比旋度应为-19.0-23.0【鉴别】分别取本品和对照品适量，照纯度测定项下方法，本品的色谱保留时间与对照品一致。【检查】溶液澄清度 取本品0.3g，加2ml N,N-二甲基甲酰胺使溶解，溶液应澄清（中国药典2005年版二部附录B）。水分 取本品适量，照水分测定法依法测定（中国药典2005年版二部附录M第一法），水分含量不得过1.0%。【纯度测定】照高效液相色谱法测定（中国药典2005年版二部附录D）系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.05mol/L三乙胺磷酸缓冲液（pH=2.3）为流动相A，以0.05mol/L三乙胺磷酸缓冲液（pH=2.3）-乙腈（30：70）为流动相B，采用梯度洗脱，在30分钟内流动相B由50%增加到100%，并在31分钟时降为50%，用50%B平衡7分钟，检测波长为210nm，理论板数按主峰计算应不低于3000。测定法 取本品适量，加流动相制成每1ml中含0.2mg的供试品溶液。取预试液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，按归一化计算，即得。【用途】肽合成用。【贮藏】密封、阴凉避光处保存。5.10 Fmoc-Cys(Trt)-Wang树脂质量标准氟马克-半胱氨酸王树脂Fmoc-Cys(Trt)-Wang Resin本品为N-芴甲氧羰酰-N-三苯甲基-L-半胱氨酸-Wang树脂，取代值应为0.81.2mmol/g。【性状】本品为类白色或淡黄色颗粒。【鉴别】在取代值测定后的树脂中，加双缩脲试剂（取硫酸铜0.15g与酒石酸钾钠0.6g，加水50ml，搅拌下加入10%氢氧化钠30ml，加水至100ml即得）1ml，即显蓝紫色。【检查】粒度 应为100200目。水分 取本品适量，照水分测定法依法测定（中国药典2005年版二部附录M第一法），水分含量不得过1.0%。【取代值测定】照紫外分光光度法测定。取本品约25mg，精密称定，加入5.0ml含20%哌啶的N，N-二甲基甲酰胺，震荡反应60分钟，离心得上清液，采用紫外分光光度法，测定301nm波长处得吸收度，计算即得，计算公式如下101A301S= 7.8W树脂【用途】肽合成用。【贮藏】密封、阴凉避光处保存。6辅料质量标准6.1 HBTU质量标准苯并三氮唑-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸酯HBTUC11H16F6N5OP 379.24本品为苯并三氮唑衍生物。按纯度计算含C11H16F6N5OP应不低于98.5%。【性状】本品为白色粉末。熔点 本品的熔点(中国药典2005年版二部附录C)为220(dec.)。【鉴别】分别取本品和对照品适量，照纯度测定项下方法，本品的色谱保留时间与对照品一致。【检查】溶液澄清度 取本品0.3g，加2ml N，N-二甲基甲酰胺使溶解，溶液应澄清（中国药典2005年版二部附录B）。水分 取本品适量，照水分测定法依法测定（中国药典2005年版二部附录M第一法），水分含量不得过1.0%。【纯度测定】照高效液相色谱法测定（中国药典2005年版二部附录D）系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.05mol/L三乙胺磷酸缓冲液（pH=2.3）为流动相A，以0.05mol/L三乙胺磷酸缓冲液（pH=2.3）-乙腈（30：70）为流动相B，采用梯度洗脱，在30分钟内流动相B由50%增加到100%，并在31分钟时降为50%，用50%B平衡7分钟，检测波长为210nm，理论板数按主峰计算应不低于3000。测定法 取本品适量，加流动相制成每1ml中含0.2mg的供试品溶液。取预试液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，按归一化计算，即得。6.2 DIEA质量标准二异丙基乙基胺DIEAC8H19N 127.22本品按纯度计算含C8H19N应不低于99.0%。【性状】本品为无色液体。水分 取本品适量，照水分测定法依法测定（中国药典2005年版二部附录M第一法），水分含量不得过1.0%。6.3 PIP质量标准六氢吡啶PIPC4H10N2 86.13本品按纯度计算含C4H10N2应不低于99.0%。【性状】本品为无色或淡黄色液体。水分 取本品适量，照水分测定法依法测定（中国药典2005年版二部附录M第一法），水分含量不得过1.0%。7中间产品质量标准7.1中间产品（生长抑素合成中间产品）质量标准生长抑素合成中间产品中含生长抑素不得少于20.0%。【性状】本品为白色粉末。【含量测定】照高效液相色谱法（中国药典2005年版二部附录V D）测定。色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.05mol/L 磷酸二氢钾缓冲液（取磷酸二氢钾6.8g，加水800ml溶解，用磷酸调节pH值至2.3，用水稀释至1000ml）-乙腈(75：25)为流动相，检测波长215nm。理论板数按生长抑素峰计应大于2000。测定法 取本品，精密称定，加流动相溶解并稀释成每1ml约含1.2mg的溶液，作为供试品溶液，精密量取20l注入高效液相色谱仪中，记录色谱图。另精密称取生长抑素对照品适量，加流动相制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液，同法测定。按外标法以峰面积计算，应符合规定。【贮藏】密封，2-8保存。7.2半成品（生长抑素三氟醋酸盐）质量标准生长抑素三氟醋酸盐Somatostatin TrifluoroacetateAla-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys-OH C76H104N18O19S2 1638本品为人工合成生长抑素，含生长抑素应不得少于80.0% 。【性状】本品为白色粉末。【鉴别】含量测定项下记录的高效液相色谱图中，供试品溶液的主峰保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。【检查】水分 取本品，照水分测定法（中国药典2005年版二部附录 M第一法）测定，含水分不得过5.0%。有关物质 照高效液相色谱法（中国药典2005年版二部附录V D）测定。色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液（取磷酸二氢钾6.8g，加水800ml溶解，用磷酸调节PH值至2.3, 用水稀释至1000ml）为流动相A，乙腈为流动相B，采用梯度洗脱，流动相B所占比例在18分钟内由21%上升至40%，保持2分钟后，在1分钟内流动相B的比例由40%下降至21%并保持5分钟。检测波长215nm。理论板数按生长抑素峰计应大于2000。测定法 取本品适量，加流动相A溶解并稀释成每ml含0.5mg生长抑素的供试品溶液与每ml含10g生长抑素的对照溶液。取对照溶液20l注入液相色谱仪，调节仪器灵敏度，使主成分色谱峰高为满量程20%-25%，再精密量取供试品溶液和对照溶液各20l注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的2倍，供试品溶液的色谱图中如显杂质峰（除溶剂峰），单一杂质峰面积应小于对照溶液主峰面积的二分之一（1.0%），杂质峰面积的总和应小于对照溶液主峰峰面积（2.0%）。【含量测定】照高效液相色谱法（中国药典2005年版二部附录V D）测定。色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.05mol/L 磷酸二氢钾缓冲液（取磷酸二氢钾6.8g，加水800ml溶解，用磷酸调节pH值至2.3，用水稀释至1000ml）-乙腈(75：25)为流动相，检测波长215nm。理论板数按生长抑素峰计应大于2000。测定法 取本品，精密称定，加流动相溶解并稀释成每1ml含0.5mg的溶液，作为供试品溶液，精密量取20l注入高效液相色谱仪中，记录色谱图。另精密称取生长抑素对照品适量，加流动相制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液，同法测定。按外标法以峰面积计算，应符合规定。【贮藏】密封，2-8保存。【有效期】12个月。8成品质量标准生长抑素ShengzhangyisuSomatostatin C76H104N18O19S2 1638本品为14个氨基酸组成的环状多肽。按无水、无醋酸物计算，含生长抑素(C76H104N18O19S2)不得少于95.0%。【性状】本品为白色粉末。本品在水和1%醋酸中易溶，在二氯甲烷中几乎不溶。比旋度 取本品适量，精确称定，加1%冰醋酸溶解并定量稀释成每1ml中含生长抑素2.0mg的溶液，依法测定（中国药典2005年版二部附录 E），按无水、无醋酸物计，比旋度应为 -37至-47。【鉴别】（1）取本品与生长抑素对照品，分别加水制成每1ml中含1mg的供试品溶液和对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版二部附录V B)试验,吸取上述溶液各20l，分别点在同一硅胶薄层板上，以冰醋酸-吡啶-水-正丁醇（10:15:20:45）为展开剂，展开后，晾干，用1%的茚三酮溶液喷雾，于110C加热5min后检视。供试品溶液所显主斑点的颜色和位置应与对照品溶液所显主斑点的颜色与位置相同。（2）含量测定项下记录的高效液相色谱图中，供试品溶液的主峰保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。【检查】 吸收度 取本品，精密称定，加0.9%的氯化钠溶液溶解并稀释成每1ml中含生长抑素0.05mg的溶液，照紫外可见分光光度法（中国药典2005年版二部附录A）在280nm波长处测定吸收度，按无水、无醋酸物计算，不得过0.20。醋酸 照高效液相色谱法（中国药典2005年版二部附录V D）测定。色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以磷酸-氢氧化钠溶液（取磷酸0.7ml，加水800ml，用42%(w/v) 的氢氧化钠溶液调节pH值至3.0, 用水稀释至1000ml）为流动相A，甲醇为流动相B，采用梯度洗脱（如表所示），检测波长为210nm。时间(min)流动相A百分比(%)流动相B百分比(%)09555955105050205050229553055 测定法：取本品适量，精密称定，用流动相A、B的混合溶液（95：5）溶解并稀释制成0.7mg/ml的溶液，作为供试品溶液。同法配制0.10mg/ml的冰醋酸溶液作为对照品溶液。分别取供试品溶液和对照品溶液20l注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按照外标法以峰面积计算，即得。本品含醋酸不得过10.0%。水分 取本品，照水分测定法（中国药典2005年版二部附录 M第一法）测定，含水分不得过8.0%。有关物质 照高效液相色谱法（中国药典2005年版二部附录V D）测定。色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液（取磷酸二氢钾6.8g，加水800ml溶解，用磷酸调节PH值至2.3, 用水稀释至1000ml）为流动相A，乙腈为流动相B，采用梯度洗脱，流动相B所占比例在18分钟内由21%上升至40%，保持2分钟后，在1分钟内流动相B的比例由40%下降至21%并保持5分钟。检测波长215nm。理论板数按生长抑素峰计应大于2000。测定法 取本品适量，加流动相A溶解并稀释成每ml含0.5mg生长抑素的供试品溶液与每ml含10g生长抑素的对照溶液。取对照溶液20l注入液相色谱仪，调节仪器灵敏度，使主成分色谱峰高为满量程20%-25%，再精密量取供试品溶液和对照溶液各20l注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的2倍，供试品溶液的色谱图中如显杂质峰（除溶剂峰），单一杂质峰面积应小于对照溶液主峰面积的二分之一（不得过1.0%），杂质峰面积的总和应小于对照溶液主峰峰面积（不得过2.0%）。氨基酸组成 取本品，精密称定1.0mg，置裂解瓶中，110115条件下加热16小时，样品干燥后用适宜的氨基酸分析仪测定，以相对摩尔比进行计算含天冬氨酸应为0.951.05；甘氨酸应为0.951.05；丙氨酸应为0.951.05；苯丙氨酸应为2.853.15；丝氨酸应为0.701.05；苏氨酸应为1.42.1；半胱氨酸应为1.42.1；赖氨酸应为1.92.1。残留溶剂 取本品适量，精密称定，加水溶解并稀释成每1ml含0.1g的溶液，作为供试品溶液。另取乙腈和N，N-二甲基甲酰胺各适量，精密称定，加水配制成贮备液；取各贮备液适量，用水稀释成每1ml中含乙腈0.041ml和N，N-二甲基甲酰胺0.088mg的溶液，作为对照品溶液。照残留溶剂测定法（中国药典2005年版二部附录 P）测定。色谱柱为（50%）苯基-（50%）甲基聚硅氧烷石英毛细管柱，柱温：90；检测器为氢火焰离子化检测器（FID），检测器温度为250；进样口温度为220。直接进样，进样体积为2.0l。理论板数按乙腈峰计算应不低于5000。分别取供试品溶液与对照品溶液进样，依法测定，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，含乙腈和N，N-二甲基甲酰胺应符合规定。细菌内毒素 取本品，依法检查（中国药典2005年版二部附录XI E），每1mg生长抑素中含内毒素的量应小于10Eu。【含量测定】照高效液相色谱法（中国药典2005年版二部附录V D）测定。色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.05mol/L 磷酸二氢钾缓冲液（取磷酸二氢钾6.8g，加水800ml溶解，用磷酸调节pH值至2.3，用水稀释至1000ml）-乙腈(75：25)为流动相，检测波长215nm。理论板数按生长抑素峰计应大于2000。测定法 取本品，精密称定，加流动相溶解并稀释成每1ml含生长抑素0.