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文档简介
细菌形态观察简单染色法 一 目的要求 1 显微镜下观察细菌个体的形态 2 学习环境中微生物的检查方法 并加深对微生物分布广泛性的认识 二 基本原理 形态观察主要包括群体的形态和个体的形态观察 细菌的基本形态主要分为球菌 杆菌 螺旋菌三大类 近年还发现星状和四方形细菌等 细菌形态受培养时间 培养基成分 浓度 培养温度 培养时间等发生变化 细菌菌落大多表面光滑湿润 有光泽 一般菌落较小 质地颜色均匀 同培养基结合不紧密 菌落特征与组成菌落的细胞结构 生长状况 排列方式 好气性和运动性直接相关 细菌个体微小 较透明 必须染色方可呈现 根据细菌个体形态观察的不同要求 可将染色分为3种类型 简单染色 鉴别染色 特殊染色 简单染色法原理 简单染色是利用单一染料对细菌进行染色 细菌在中性 碱性或弱酸性溶液环境中通常带负电荷 碱性染料 解离时分子的染色部分带正电荷 如美兰 结晶紫等易与细菌结合使其着色 操作方法 1 涂片 枯草芽孢杆菌2 干燥 室温自然干燥3 固定 有菌膜的一面向上 通过火焰2 3次 细胞质凝固4 染色 滴加染液 美蓝或者番红或者结晶紫 染色时间为两分钟5 冲洗 水洗至无色 载玻片倾斜 小水流从载玻片一端自然流下带走染料 直到流下的水为无色 6 干燥 自然 吹干 吸干7 镜检 酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴定 酵母概述 酵母是单细胞的真核生物 酵母菌体细胞个大 无运动性 酵母的繁殖方式分为有性繁殖和无性繁殖两种 以无性繁殖为主 无性繁殖最普遍的方式是芽殖 死活细胞鉴定原理 美蓝是一种无毒性的染料 美蓝有氧化型和还原型两种状态 氧化型为蓝色 还原型无色 酵母活细胞由于体内的新陈代谢作用 细胞内具有较强的还原能力 能使美蓝由氧化型变为还原型 酵母死细胞或者代谢作用微弱的细胞 还原能力弱 不能使美蓝由氧化型转变为还原型 实验步骤 在载玻片中央加一滴0 1 美蓝染色液 染色液过多会溢出 过少会在盖玻片下出现大量气泡 吸取少量酵母菌液 稀释后滴半滴在载玻片的美篮染色液中 混合均匀 拿镊子取一块盖玻片 先将一侧与菌液接触
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