PrP105132对体外小胶质细胞活化及IL6产生的影响.doc

PrP105132对体外小胶质细胞活化及IL6产生的影响【摘要】目的 探讨PrP105132作用下体外小胶质细胞的活化及对IL6产生的影响。方法 体外培养大鼠神经胶质细胞，用不同剂量PrP105132(0、20、40、80 mol/L)干预小胶质细胞，ELISA法检测24 h后细胞上清液中IL6含量。结果 朊蛋白肽段干预后小胶质细胞活化，胞体增大，细胞突起变短、消失，呈圆状、杆状、阿米巴状;并且随PrP105132剂量的增加，IL6分泌量增多(P95%。2.3 IL6的含量体外培养小胶质细胞24、48、72 h上清液IL6含量分别为(69.066.25)、(68.093.04)、(69.611.05) pg/ml，组间比较无显著性差异(P0.05)。分别应用0、20、40、80 μmol/L剂量PrP105132干预小胶质细胞，24 h后IL6含量依次为(69.066.25)、(70.330.67)、(87.384.16)、(109.647.40) pg/ml，表明IL6含量随PrP105132剂量增大而增大，80 μmol/L组与其他三组组间比较有显著性差异(P0.01)。3 讨 论PrP105132肽段(KTNLKHVAGAAAAGAVVGGLGGYMLGSA)对应PrPC的跨膜区域，是PrPC向PrPSc构型转变的关键部位4，是所有异常PrP同工型的共有结构。在不同的环境(离子强度、pH值、溶质成分等)中表现不同的二级结构。PrP105132在体外与整个PrPSc有某些相同的性质，可形成淀粉样纤维，并具有蛋白酶K抵抗性。在实验中发现，体外培养小胶质细胞中加入该肽段后细胞胞体增大变圆，细胞突起变短、消失，呈圆状、杆状、阿米巴状;并且随PrP剂量增加， IL6分泌量增多，PrP剂量80 μmol/L时IL6的分泌量最高，进一步明确了PrP105 132肽段对小胶质细胞的激活作用。小胶质细胞激活是朊蛋白病的神经病理性损害特征，并且这种特征在体内和体外实验中均得到证实5。组织学研究发现朊蛋白病中，在CNS小胶质细胞与异常朊蛋白的聚集有关,并发现体外朊蛋白诱导小胶质细胞介导炎症反应，导致神经元缺失6。小胶质细胞介导炎症反应需要各种细胞因子的合成和参与。目前已有研究证实PrP可使小胶质细胞诱导表达COX27，合成IL1β、PGE28。本实验发现PrP干预体外小胶质细胞后，培养上清液内IL6含量升高，证实了朊蛋白病中小胶质细胞是细胞因子IL6来源之一。【参考文献】 1 Iwasaki Y，Iijima M，Kimura S,et al.Autopsy case of sporadic CreutzfeldtJakob disease presenting with signs suggestive of brainstem and spinal cord involvementJ.Neuropathology，2006;26(6):5506.2 Webster SD，Park M，Fonseca MI,et al.Structral and functional evidence for microglial expression of C1q receptor that enhances phagocytosisJ. J Leukoc Biol，2000;67(1):10916.3 杨蕴天,江新梅,林世和.克雅氏病患者脑脊液中细胞因子IL6的变化J.中国老年学杂志,2009;29(2):1878.4 Thellung S，Florio T，Corsaro A,et al.Intracellular mechanisms mediating the neuronal death and astrogliosis induced by the prion protein fragment 106126J.Int J Dev Neurosci，2000;18(45):48192.5 Moresco RM，Messa C，Tagliavini F,et al.CreutzfeldtJakob disease：activated microglia detected in vivo by molecular imagingJ.Neuropathol Appl Neurobiol，2004;30(4):4156.6 Brown GC，Neher JJ.Inflammatory neurodegeneration and mechanisms of microglial killing of neuronsJ.Mol Neurobiol，2010;41(23)：2427.7 Walsh DT，Perry VH，Minghetti L.Cyclooxygenase2 is highly expressed in microgliallike cells in a murine model for prion diseaseJ.Glia，2000;29(4)：3926.8 Peyrin JM，Lasmezas CI，Haik S,et al.Microglial cells respond to amyloidogenic PrP peptide by the production of infl