饲料学实验指导.doc

饲 料 学 实 验 指 导王艳青 齐智利华中农业大学动物营养与饲料科学系目 录实验一 饲料样品的采集与制备 1实验二 饲料中水分的测定 3实验三 粗脂肪的测定 4实验四 饲料燃烧热的测定 5实验五 粗蛋白的测定- 凯氏定氮法 8实验六 饲料容重测量 9实验七 粗灰分的测定 10实验八 钙的测定（高锰酸钾法） 11实验九 饲料中总磷量的测定 13实验十 饲料中水溶性氯化物的测定（快速法） 14实验十一 饲料中粗纤维的测定 14 饲料样品的采集与制备一、 样本的采集与制备的意义采样从大量的饲料中采取供分析用少量样本的过程。制样把采集的初级样本按一定的方法与要求（如四分法或等格分取法将初级样本缩减，将湿样本制备成风干样，并粉碎、过筛等）进行处理，制成分析样本的过程。饲料化学分析结果的可靠性，不仅取决于化学分析本身的准确性，更重要的还取决于样本的采集与制备。饲料的化学成分因饲料的品种、生长阶段、栽培技术、土壤、气候条件以及加工调制和贮存方法等因素不同而有很大的差异，甚至在同一植株的不同部位差异也很大。但在一般情况下，均以少量样本的分析结果评定大量饲料的营养价值，所以，采集的饲料样本必须具有代表性。二、 名次概念1.初级样本：从大量的饲料中，在不同的位置（点）和深度（层次）所取样本的总和。2.次级样本：初级样本经充分混匀后，按一定的方法缩减为少量，携入实验室供用，即为次级样本。其量因饲料而异，风干后一般应有120-200g。3.分析样本：风干样品经粉碎、装瓶，被作分析用的样本。其量应不小于120g 。4.分析称样：从分析样本中称取一定量，供测定分析用。其量根据分析项目而定。三、取样方法1.四分法取样：多用于将初级样本缩减为次级样本，或将次级样本缩减为分析样本。用于粉状、粒状或切短的粗饲料的缩减。2.等格分取法取样，适用于青饲料的初级样本的缩减，将初级样本迅速切碎，混匀，铺成正方形，划分为若干小块，取出的样品为次级样本。四、 采样饲料的差异越大，使采样具有代表性的手续愈复杂。1.籽实、糠麸及粉状饲料（1）饲料堆上采样，至少选5点，每点分布于三层（上层在表面以下10cm处，中层在中间，下层在地层以上10cm处）。每点取样量为0.2kg以上，总量不少于1kg（初级样本）。 （2）袋中取样，选取5袋以上（每隔2或4或6或8或10袋取一袋），然后从袋子的不同深度取样，每袋取0.2kg以上，总量不少于1kg（初级样本）。将采集的初级样本用四分法缩减为200g以上，估计含水量大于15时需取两份，一份测干物质，一份制备风干样。再将次级样本粉碎，制成分析样本，装瓶，待测。2.青绿饲料（1）田间采样因植株高低，生长的均一程度，密度大小不同而异。高植株作物宜采用“株选”，低植株作物多采用“段选”。若长势和密度均一时，可按对角线或平行线等距离选点。反之，依照生长强度以及密度均匀程度，按比例选点。取多点、多株、多段样本混合。小株植物可少取，大株植物可多取；长势均一者少取，反之则多取。每10亩地至少选10个点，采用“把选”、“段选”或“株选”，若采用株选，需增加点数。样本总量不得低于10kg，刈割高度应距地面5cm。（2）饲前采样将青饲料刈割切碎，饲喂前每次按5点取2kg样本，测定干物质，并制备风干样。分阶段采样4-5次，将每次的风干样混合均匀，用四分法取分析样本200g以上。（3）干草和藁秆饲料a.堆垛采样：在垛的各个侧面选取10个以上的点，在每个样点的30-50cm深处取样，总量应不少于20kg。b.草捆内采样：在不同位置选5捆以上，不得少于总捆数的3，打开后从外到内采15-20株。c.饲前采样：在铡短的草堆中多次重复取样，总量不少于20kg。将采集的初级样本铡成2-3cm，混匀，以等格分取法取200-1000g次级样本。严禁从堆垛、草捆中用力拉扯饲料，以免叶片、幼嫩部分脱落。（4）青贮饲料a.圆形窖表层0.5m以下，底层0.5m以上的不同深度处以及同一平面的不同点分阶段采样3-5次。每次以窖中心为圆心，在距离窖壁30-50 cm处画一圆圈，然后由圆心及互相垂直的两直径与圆圈相交的各点进行采样，每点用锐刀切取202020cm3的饲料块。b.长方形青贮窖取样从窖的不同垂直切面取样3-5次，除去上部草层50cm，在距离窖两壁及窖底各30-50cm处作四边形，再将各边中点相连，在各线相交点采样。c.1m一下的断面上取10010020 cm3的饲料块。每次将样本混合，用等格分取法缩减至2000g，测定干物质，制备风干样。将各次的风干样混匀，粉碎，用四分法取200g装瓶备用。（5）块根、块茎和瓜果类饲料在田间或贮藏窖的不同位置随即采集新鲜完整的样本约30kg，粗略清楚泥土及夹杂物，按大、中、小分堆，等比例随机取出10kg初级样本，带回实验室洗去泥土（勿伤表皮），用毛巾揩去表水。每个从上至下纵切，取对角线的1/4、1/8或1/16约2kg次级样本，分为两份，一份用以测定干物质，一份用以制备风干样。（6）块状饲料，选出5块。a：圆形，等分为6块、8块或32块，用力刀或锯取对角两块，共计10块。b：方形，用锯取对角二长条，共计10条。c；穿孔法取样五、 样本处理（1）脱去自由水，制备风干样，含水量在15以上的样品。（2）粉碎，40目筛（孔径0.42mm）。粉碎前应将粉碎机清洁干净，最先粉碎的样本弃去。（3）装入磨口瓶，贴标签。样品名称、制备日期、制备人和采样地点。六、 样本保存（1）干燥黑暗处，样本室内的温度和湿度力求稳定。（2）若需长期保存，可用纸包少量樟脑放入瓶中。（3）长期保存的样本瓶，标签应涂蜡，瓶塞要密封。饲料中水分的测定一、原理试样在（1052）烘箱内烘干至恒重，失去的质量为水分。二、主要的仪器设备（1）植物样品粉碎机（2）分析天平（3）电热式恒温烘箱（4）干燥器三、样品的选取和制备（1）选取有代表性的原始样品不少于1000g。按四分法缩减到500g，再缩至200g，风干或60烘干，用植物样品粉碎机（0.45mm）粉碎。（2）多汁的鲜样，如青贮、牧草等，应制成风干样品：用已知重量的瓷盘称取200-300g（准确至0.0lg）鲜样，120烘15min，使酶灭火，立即将瓷盘移入65烘箱内烘8-12h，取出，在空气中冷却回潮24h，称量。直至两次称重之差不超过0.5g为止，失重即初水分。四、测定步骤（1）将称样皿洗净，105烘1h，干燥器内冷却30min，称量。再烘30min，冷却，称量，直至两次称量之差小于0.0005g为恒重。（2）称取25g样品，均匀平摊在已恒重的称量皿中。在(1052)恒温烘箱内烘干24h取出，放在干燥器内冷却30min，称量，再烘1h，冷却、称量。直至两次称量之差小于0.002g为恒重。五、计算w（H20）饲料中水分的质量分数，；m1105烘干前试样和称量皿总质量，g；m2105烘干后干物质和称量皿总质量，g；m0105烘干的称量皿质量，g。含水量在10%以上，允许相对偏差为1%；含水量在5%-10%，允许相对偏差为3%；含水量在5%以上，允许相对偏差为5%。六、注意事项（1）多汁的鲜饲料样品，应先测定初水分式中：w0（H2O）饲料初水分的质量百分数，；m1鲜样质量，g；m265烘干后干物质质量，g。 （2）奶制品和动植物油脂样品中水分的测定，多采用减压蒸馏法。（3）脂肪含量高的样品，烘干时间长反而增重，是脂肪氧化所致。（4）含糖分高、脂肪高、易氧化或焦化样品，应使用减压干燥法或冷冻干燥法测定水分。（5）含水量相差很大的样品不应该放在同一个烘箱中干燥。粗脂肪的测定一、原理根据饲料样品中脂肪不溶于水而溶于有机溶剂的特性，用无水乙醚做提取剂，使样品在乙醚中反复浸提，脂肪溶于乙醚并收集于盛醚瓶中，根据饲料样品的质量在抽提前后的变化，求出醚浸出物的含量，即粗脂肪的含量。二、主要的仪器设备1.电热恒温水浴锅2.鼓风电热烘箱3.索氏脂肪提取器三、试剂无水乙醚（AR）。四、分析步骤（1）选取有代表性的试样，用四分法缩减至200g，风干或65烘干后粉碎，过0.42mm试验筛。（2）样品烘干：称取12g（准确至0.0002g）饲料样品，置于已编号的中速定量滤纸包中，105烘3h，冷却30min后称量。（3）抽提：将滤纸包放人抽提器内，加入无水乙醚，滤纸包应完全浸入乙醚，同时打开冷凝水管水流，6575水浴加热，乙醚沸腾后蒸发，乙醚蒸气至冷凝管处冷凝为液体流回抽提腔。当浸提管中乙醚积聚到一定高度时，可由虹吸管回流至盛醚瓶内，周而复始，反复浸提。抽提时间视样品中脂肪含量而定，一般为624h，直至抽提干净为止。（点滴对比法：用干净表面皿分别点滴萃取液和未抽提乙醚各1滴进行痕迹对比，差异不大时认为脂肪已抽提干净。（4）将滤纸包取出，放置在干净的表面皿上，让乙醚在通风处充分挥发后放入原铝盒中，在105烘干12h，冷却30min后称量，直至恒重。五、计算EE（）= ml脱脂前滤纸包质量，g；m2脱脂后滤纸包质量，g；m风干试样质量，g。粗脂肪含量在10%以上，允许相对偏差为3%，粗脂肪含量在10%以下，允许相对偏差为5%。六、注意事项1.乙醚易燃烧，实验室内严禁明火。2.包滤纸包时，将手洗净，戴手套操作。3.滤纸包要用铅笔编号。4.无水乙醚应不含有水分及其他杂质。饲料燃烧热的测定饲料的燃烧热即饲料所含总能(GE)，是饲料在燃烧过程中完全氧化成最终的尾产物（CO2，H2O及其他气体）所释放的热能。单位质量物质的燃烧热为该物质的热价值，单位：kJg。1.实验目的：了解氧弹式热量计的简单结构，饲料热的测定原理和具体操作步骤。2.原理在绝热条件下，1mo1有机物完全燃烧所产生的热量，称为该物质的燃烧热。将饲料在氧弹内通入氧气使其完全燃烧，测定该氧化反应放出的热量，从而计算单位质量物质放出的热能，称为该物质的热价值或总能（GE）。3.主要的仪器设备（1）植物样品粉碎机（2）压样机。（3）绝热型氧弹热量计（4）氧气钢瓶4.试剂 （1）苯甲酸（2）镍铬燃烧丝（3）氧气5.测定步骤5.1准备工作（1）样品的准备：采集的饲料样品用四分法缩减至200g，经粉碎，过筛，用压样机压成0.51.0g的小片，放人干燥器，备用。（2）坩埚的准备：将坩埚洗净烘干，用铅笔编号后置于高温炉中550-600灼烧30min后放在干燥器中冷却称量。（3）引火丝的准备：量取10cm的引火丝数根，然后称量求其平均值备用。（4）加水及充氧：将压好的样品片于105烘干4h，冷却，称量(m)，放人铂坩埚内。把铂坩埚移至氧弹电极支架上，将连接在两根电极柱上的10cm长镍铬燃烧丝的中部接近样品。然后向氧弹底部加10mL水，把电极装入氧弹内，套上垫圈，旋紧弹帽，经减压阀慢慢向氧弹内充氧气至0.5MPa，使空气排尽，再充压至2.0MPa。（5）内外水套的准备及热量计的安装：将自动容量筒中准备好的2000g纯水(室温)注入内套筒中，主机的外套应充满水，调节外套温度并控制到适当位置，使其温度高于内套水温05-07。一般情况下冬季设定室温1819，夏季设定室温20-25。氧弹应放在内筒的合适位置，勿使搅拌器的叶子与内筒或氧弹接触。然后插上电极鞘，盖上盖子，调节贝克曼温度计。5.2测定工作接通电源开关，开动搅拌器，开始进行测定。（1）燃烧前期：是热量计与外界环境热交换的平衡期。搅拌器开动3-5min后，等水温均匀后开始记录温度，每分钟1次，当温度接近恒定时，连续3次温差不超过0.001为止，最后一次读温是初始温度。（2）燃烧期：点火，样品开始燃烧，产生的热经氧弹壁迅速传至周围的水中，水温上升，此时应半分钟读温一次。直至温度不再上升为止，燃烧即将结束。（3）燃烧后期：燃烧结束即为末期的开始，首先将计时装置拨至1分钟处，待温度稳定后开始读数，连续3次温差不超过0.001时为止。5.3结束工作测定结束后，停止搅拌，关闭电源，小心取下贝克曼温度计，擦干后放好，然后打开盖子，拔去电极鞘，从内筒取出氧弹。把取出的氧弹排气阀打开，慢慢放出废气。旋开氧弹帽，取出电极头。从弹头电极上小心取下未燃烧完的镍铬燃烧丝，拉直测量其剩余长度。用洗瓶冲洗氧弹体内壁、弹盖内面、电极柱和铂坩埚2、3次。用水冲洗氧弹各内壁，擦干，准备测定下一个样品。6结果计算饲料样品的燃烧值或总能E下式计算E=（K（T-T0）- gb）/m式中：E饲料样品的总能，MJg；m试样质量，g；K热量计的热容，MJ；g引火丝质量b引火丝热值T末期最终温度T0初期最终温度每试样取两个平行样测定，取平均值，允许相对偏差5。7注意事项(1）氧弹和内水套均系金属铸造，注意保护各抛光面，防止划痕变形，否则影响测定结果的准确度。(3)仪器一旦调试后，使用人员应严格遵守上述操作步骤，非经实验室指导教师许可不得擅自调试或旋动其他阀门或开关。(4)温度的测定要使用贝克曼温度计，属于精密测温仪器，最小刻度为0.01，用放大镜可读至0.001。8、水当量的测定概念：水当量是热量计整个体系的热容量。原理：热量计整个体系的热容量，为了计算方便，用相当于水的质量。即使整个体系温度上升1度所需要的热量，使多少克水温度上升1度。方法：用有一定已知热值的纯有机化合物来代替饲料样品，如苯甲酸 ，蔗糖等。水当量测定结果不少于5次，且每次测定值不超过平均值的0.1%。热量计的热容量又称水当量；它是用标准热值物质(如苯甲酸)来测定的，测定的步骤同样品测定步骤，用苯甲酸代替样品。热量计的热容K按下式计算K=（Qa-gb）/（T-T0）式中：K热量计的热容，MJ；Q苯甲酸标准热值26.46，MJg；a苯甲酸质量；g引火丝质量b引火丝热值T末期最终温度T0初期最终温度 粗蛋白的测定- 凯氏定氮法1. 原理用浓硫酸将含氮化合物转化为硫酸铵，将生成的硫酸铵在强碱性条件下蒸馏出氨，经硼酸溶液吸收，再用标准酸溶液滴定，将测得的氮含量乘以换算系数6.25，即粗蛋白的含量。2. 主要的仪器设备（1）实验室样品粉碎机（2）可调电炉（3）凯氏烧瓶（4）凯氏蒸馏装置3试剂（1）硫酸(AR)。（2）混合催化剂：硫酸铜（CuS045H20）与硫酸钾或硫酸钠按1：15混合后磨碎（3）40氢氧化钠溶液：称取40g氢氧化钠溶于100mL蒸馏水中。（4）2硼酸溶液：称取20g硼酸（H3B03，AR）溶于1000mL蒸馏水中。（5）混合指示剂：将0.1甲基红乙醇溶液与0.5溴甲酚绿乙醇溶液，按1：1等体积混合。（6）0.1000molL盐酸(HCl)标准溶液：取8.3mL盐酸（AR）注入1000mL蒸馏水。用无水碳酸钠（280烘干）标定。称取无水碳酸钠0.2000g，溶于50mL水，加混合指示剂，用0.1molL盐酸滴定至暗红色。同时滴定空白，加以校正。（7）蔗糖(AR)。（8）硫酸铵(AR)。4操作步骤（1）选取有代表性的样品用四分法缩减至200g，风干或以65烘干后粉碎，过0.42mm试验筛。（2）消化：用天平准确称取0.51.0g试样，放入凯氏烧瓶中，加入混合催化剂6.4g、浓硫酸15mL，置于可调电炉上消煮，开始用小火加热消煮，待泡沫消失后再加大火力保持微沸状态，溶液透明呈蓝绿色后继续消煮2h。冷却定容。（3）蒸馏：将15mL 2硼酸溶液加入三角瓶，加2滴混合指示剂，将蒸馏装置冷凝管末端浸入液面下，向消化液内加入10mL40氢氧化钠溶液，加热蒸馏。4min后取下三角瓶，使冷凝管末端离开液面，继续蒸馏12min，并用蒸馏水冲洗冷凝管末端，停止蒸馏。（4）滴定：用0.1molL盐酸标准溶液滴定，溶液由蓝绿色变为红色为终点。（5）空白测定：称取0.5g蔗糖代替试样，按上述操作步骤测定。5结果计算 w（CP）：饲料中粗蛋白的质量百分数，%V0：滴定空白时所消耗的标准盐酸的体积，mL；V1：滴定试样时标准溶液盐酸的体积，mL；C：标准盐酸溶液的浓度，molL0.0140氮的摩尔质量，kgmol；m试样质量，g当粗蛋白含量在25%以上，允许相对偏差为1%；当粗蛋白含量在10%-25%，允许相对偏差为2%；当粗蛋白含量在10%以下，允许相对偏差为3%；6注意事项 （1）消化时应经常转动凯氏烧瓶，使消化进行的迅速而彻底。在消化时如有黑色碳粒溅在瓶壁上，应取下冷却后加少量蒸馏水冲洗后再继续消化。（2）胶体物质或脂肪含量高的样品，消化时应注意防止泡末溢出瓶口。（3）可用硫酸铵代替试样测定氮含量，与化学式计量氮作比较，误差应为0.2。 饲料容重测量1. 原理各种饲料原料都有一定的容重，通过测定饲料的容重，并与该种饲料的标准容重相比较，可以分辨出所测饲料中是否掺杂，初步判定饲料原料的质量状况。2样品制备（1）完整谷粒要求混合均匀，无需粉碎。（2）碎粒或粉粒状料要求通过10目筛板粉碎，并混合均匀。3. 仪器与设备容重计2个，刮铲2个，4测量（1）取被测样本铺于瓷盘中，用四分法取样，轻而仔细地倒人1000ml量筒中，用刮铲调整至1000ml刻度处(勿压和震摇)。（2）将样品从量筒中倒出称重，以gL计算样品容重。每一样品要求重复测量3次，取其平均值作为容重。并与纯料容重比较。5.各种常用饲料原料的容重参考表原料容重（g/L）原料容重（g/L）玉米626.2棉籽饼粕594.1-642.3大麦353.2-401.4大豆饼粕594.1-610.2小麦610.2-626.2鱼粉562小麦麸208.7血粉610.2米糠350.7-337.7羽毛粉545.9粗灰分的测定 一、原理饲料样品在55020燃烧，有机物质完全氧化燃烧，残渣中包括矿物质的氧化物和盐类以及沙石和土，即为粗灰分。二、主要的仪器设备1.高温炉（茂福炉）2.干燥器三、测定步骤1.坩埚恒重，将干净的坩埚放入高温炉，55020灼烧30min，取出，在空气中冷却约1min后放入干燥器，冷却30min后称重。再灼烧30min，冷却称量，直至前后两次的质量差小于0.0005g为恒重（m1）。2.样品炭化和灰化称取4-5g（m2）试样，在高温炉中250炭化至无烟时调至55020，灼烧3h，在空气中冷却约1min后放入干燥器，冷却30min后称重，再灼烧1h，冷却称量，直至前后两次的质量差小于0.0005g为恒重（m3）。四、计算m1已恒重空坩埚的质量m2试样的质量m3灰化后坩埚+灰分的质量粗灰分5时，允许相对偏差为1，粗灰分5时，允许相对偏差为5。五、注意事项1.炭化温度应该控制在250，以免样品冲出，以及由于剧烈干馏使部分样本被逸出的气体带走。2.灼烧温度不易超过600，否则K、Na、S、P、Zn等元素会挥发。还会引起硅酸盐熔融，包在炭粒表面，使之与氧隔绝。可滴加1-2ml蒸馏水或3双氧水，烘干后再灼烧1h。3.坩埚钳需预热。4.称量坩埚时必须戴手套。5.残渣的颜色与试样中矿物质的含量有关，含铁高时显红色，含锰高时为淡蓝色，但一般为灰白色。有黑色炭粒时，为灰化不完全，应延长灼烧时间。钙的测定（高锰酸钾法）一、原理将试样中的有机物质破坏，钙转变为游离的钙离子，用草酸铵沉淀钙离子，再加入硫酸使草酸游离出来，用高锰酸钾间接测定钙的含量。二、主要的仪器设备1.高温炉（茂福炉）2.水浴锅三、试剂1.盐酸，1：32.硫酸，1：33.氨水，1：14.草酸铵，4.25.甲基红指示剂，0.1g溶于100ml 95乙醇6.高锰酸钾标准溶液（0.05mol/L）（1）配制称取高锰酸钾约1.6g，溶于1000ml蒸馏水中煮沸10min，冷却且静置1-2天，用玻璃滤器过滤，保存于棕色瓶中。（2）标定称取草酸钠基准物（105干燥2h，在干燥器中冷却）0.1g，准确至0.0002g，溶于50ml水中，加1：3硫酸溶液10ml，加热至75-85，用配置好的高锰酸钾滴定，溶液呈粉红色且1min不褪色为终点。四、测定步骤1.试样的分解（1）干法消化灰化同粗灰分的测定。在盛灰坩埚中加入1：3盐酸10ml和数滴浓硝酸，小心煮沸，过滤定容到100ml，为母液。（2）湿法消化将2-5g试样加入凯氏烧瓶，加入硝酸20ml，加热煮沸，待二氧化氮黄烟逸尽，冷却后加入10ml70-72高氯酸，小心煮沸至溶液无色。2.钙的沉淀取母液10-20ml于烧杯中，加蒸馏水100ml，甲基红指示剂2滴，呈红色，滴加1：1氨水至溶液呈橙色，再加冰乙酸溶液至溶液呈红色。煮沸后加入热的草酸铵10ml，如果溶液呈橙色，应补加冰乙酸至红色。煮沸几分钟后，80水浴加热2h（或放置过夜陈化）。3.沉淀洗涤中速定量滤纸过滤，用1：50的氨水洗涤沉淀6-8次，至无草酸根离子（接滤液数毫升加1：3硫酸溶液数滴，加热至80，加入1滴高锰酸钾溶液，呈微红色，且半分钟不褪色）。4.沉淀溶解与滴定将沉淀和滤纸转入原烧杯，加1：3硫酸10ml，蒸馏水50ml，加热至75-85，用标准高锰酸钾溶液滴定。五、计算v2：试样标准高锰酸钾的用量（ml）v0：空白标准高锰酸钾的用量（ml）v1：移取试样分解液的体积（ml）c： 标准高锰酸钾的浓度（mol/L）m：试样的质量（g）钙含量在5以上，允许相对偏差为3，钙含量在5-1时，允许相对偏差为5，钙含量在1以下，允许相对偏差为10。六、注意事项1.沉淀过程中要注意pH值。2.洗涤一定要洗干净。3.高锰酸钾浓度不稳定，至少每月标定一次。饲料中总磷量的测定一、原理将饲料中的有机物破坏，使磷游离出来，在酸性溶液中，磷与钼酸铵和偏矾酸铵生成黄色的复合物，在420nm下测定消光值。二、主要的仪器设备分光光度计三、主要的试剂1.显色剂：偏钒酸铵1.25g，加硝酸250ml；另取钼酸铵25g，加蒸馏水400ml使之溶解，冷却后将前溶液倒入后溶液，定容至1000ml。避光保存，如生成沉淀则不能使用。2.磷标准溶液将磷酸二氢钾在105干燥1h，在干燥器中冷却后，称取0.4390g，溶解于蒸馏水中，定量转入1000ml容量瓶中，加硝酸3ml，定容，为0.1mg/ml的标准溶液。四、测定步骤1.试样的分解（1）干法消化灰化同粗灰分的测定。在盛灰坩埚中加入1：3盐酸10ml和数滴浓硝酸，小心煮沸，过滤定容到100ml，为母液。（2）湿法消化将2-5g试样加入凯氏烧瓶，加入硝酸20ml，加热煮沸，待二氧化氮黄烟逸尽，冷却后加入10ml70-72高氯酸，小心煮沸至溶液无色。冷却后转移到100ml的容量瓶，定容。2.标准曲线的制作准确移取0.1mg/ml的磷标准溶液0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml于50ml容量瓶中，各加入显色剂10ml。15-20min后比色。3.试样的测定准确移取试样分解液1-2ml于50ml容量瓶中，加显色剂10ml，定容，15-20min后比色。五、计算m：试样的质量V1：移取试样分解液的体积（ml）V2：试样分解液的体积（ml）X： 由标准曲线计算出的含磷量（mg）含磷量在5以上，允许相对偏差为3，含钙量在5以下，允许相对偏差为10。饲料中水溶性氯化物的测定（快速法）一、原理用硝酸银滴定Cl-时，形成溶解性较低的AgCl沉淀，当Cl-与Ag+完全结合后，A