甲状腺肿瘤间质中肥大细胞组织化学及电镜观察.pdf

甲状腺肿瘤间质中肥大细胞 组织化学及电镜观察 李 光 王周南 王 彤 赵浩亮 摘 要 为观察甲状腺肿瘤免疫反应肥大细胞的数量和形态 对62例甲状腺肿瘤间质中的肥大 细胞进行了组织化学与电镜观察 甲状腺肿瘤间质中的肥大细胞数量均比正常甲状腺显著增多 在甲 状腺肿瘤中 甲状腺癌与甲状腺腺瘤的肥大细胞数则未见差别 用A lcian蓝 藏红染色 正常甲状腺 的肥大细胞颗粒均为A lcian蓝阳性 而甲状腺肿瘤者 除A lcian蓝阳性外 还有藏红阳性颗粒 电镜 观察 肥大细胞颗粒具有均质性电子致密结构TC肥大细胞的特征 含类胰蛋白酶和类糜蛋白酶 在 肿瘤细胞旁的肥大细胞常有脱颗粒现象 考虑肥大细胞在甲状腺肿瘤间质中参与了局部的抗肿瘤作 用 关键词 甲状腺肿瘤 肥大细胞 组织化学 Histochem ical and electron m icroscopical study on mast cells in the stroma of thyroid tumours L i Guang W ang Zhounan W ang T ong et al S hanx i P rovincial T um our H osp ital T aiyuan030013 Abstract To understand the number andmorphology of themast cellsof throid tumour stroma the mast cells M Cs of 62 cases of thyroid tumour stromawere studied histochem ically and electron m icroscopically The number ofM Cswas increased significantly in thyroid tumour as comparedw ith that in normal tissues The number ofM Cs between thyroid cancer and thyroid adenoma was of no difference W hen stained w ith A lcian Blue2Safranin M Cs in the stroma of normal thyroid were blue whereas in the stroma of thyroid tumour both blue and redmast cells could be found The ultrastruc2 ture of the granule of theM Cswas homogeneous electron2dense which was the characteristic feature of TM Cs Degranulation ofM Cs adjacent to tumour cells could be seen The significance ofM Cs in the stroma of thyroid tumour was discussed Key words Thyroid neoplasm s M ast cell H istocytochem istry 肥大细胞在各种炎症与免疫病理反应中起 重要作用 在人及实验诱发动物的肿瘤中可见 肥大细胞的数量有变化 1 3 本实验对甲状腺 癌与甲状腺腺瘤中的肥大细胞进行了组织化学 与电镜观察 并探讨了它们与肿瘤生长的关系 材料与方法 甲状腺肿瘤组织来自手术标本 共62例 其中甲状腺癌32例 甲状腺腺瘤30例 并取正 作者单位 030013太原 山西省肿瘤医院病理科 李 光 山西医学院组织胚胎学教研室 王周南 王 彤 附属第 一医院普通外科 赵浩亮 常甲状腺组织5例作为对照 光镜观察 标本用10 福尔马林液固定 常规脱水包埋 石蜡切片厚6 m 染色方法 用HE染色观察肿瘤组织学类型 用0125 甲苯胺蓝 toluidine blue pH6 4 染色示肥大细 胞 用015 A lcian蓝 藏红染色示肥大细胞 颗粒的组化特性 电镜观察 将手术切除的新鲜肿瘤组织9 例 其中甲状腺癌3例 甲状腺腺瘤6例 除做 光镜观察外 取1 2mm 3 组织 按常规戊二醛 锇酸双固定 环氧树脂618包埋 超薄切片 醋 酸铀 枸橼酸铅双染色 电镜观察超微结构 肥大细胞计数 用显微测微计数器计数 011 Chin J O torhinolaryngol April 1996 Vol 31 No 2 每例标本观察5张切片 15个高倍 400 网 格视野 每网格面积为010169mm 2 计算每例 标本每mm 2 肥大细胞的均数及标准差 并对计 数结果进行显著性t检验 结果 一 组织病理学观察 观察HE标本 按W HO分型 甲状腺癌中 滤泡状癌12例 乳头状癌15例 髓样癌5例 甲状腺腺瘤30例均为滤泡性腺瘤 甲状腺癌中 正常滤泡结构大部分消失 间质较多 血管丰 富 甲状腺腺瘤组织中 滤泡大小不一 有的呈 大空泡囊性变 间质增多 这些肿瘤间质中 均 可见淋巴细胞浸润 有的还形成淋巴小结 二 甲状腺肿瘤间质中肥大细胞分布和组 化特征 光镜观察甲苯胺蓝染色标本 正常甲状腺 组织中肥大细胞主要分布在甲状腺滤泡间隔及 被膜的结缔组织中 每1mm 2 中肥大细胞平均 为68164 8194个 肥大细胞一般为圆形或椭 圆形 细胞内充满异染性紫蓝色颗粒 极少数细 胞有脱颗粒现象 在甲状腺肿瘤中 癌瘤实质内 很少或未见肥大细胞 肥大细胞主要分布于与 肿瘤实质交界处的间质中 不同组织类型肿瘤 与正常甲状腺比较 肥大细胞数目均增多 差异 有显著性意义 附表 各型甲状腺癌中肥大细 胞数目虽略比甲状腺腺瘤者多 但无统计学意 义 肥大细胞在甲状腺肿瘤间质中的形态很不 规则 多为梭形 大小也不一致 肥大细胞内颗 粒疏松 多数细胞有脱颗粒现象 颗粒散布于细 胞外 有的细胞破碎 核不清楚 只见成堆的颗 粒散在于间质中 A lcian蓝 藏红组化染色标本中正常甲状 腺与甲状腺肿瘤间质中 肥大细胞的分布 密度 与甲苯胺蓝染色结果相似 正常甲状腺中肥大 细胞颗粒着色呈蓝色 A lcian蓝阳性 甲状腺 癌及腺瘤中颗粒除呈蓝色 A lcian蓝阳性 外 还可见红色或紫色 藏红阳性 图 1 2 三 甲状腺肿瘤间质中肥大细胞对肿瘤效 附表 正常甲状腺与甲状腺肿瘤间质中 肥大细胞数量的比较 x s 组 别例数肥大细胞数 mm2P值 正常甲状腺568164 8194 甲状腺癌32169135 43155 01001 滤泡性癌12165134 49131 乳头状癌15173106 42195 髓样癌5172154 41143 甲状腺腺瘤 滤泡性腺瘤30151154 53149 01001 应的电镜观察 电镜下正常甲状腺间质中可见少量肥大细 胞 细胞内有大量电子致密的颗粒 颗粒内容较 均匀一致 甲状腺肿瘤 尤其在甲状腺癌间质 中 肥大细胞较多 此处的肥大细胞表面有多数 突起 细胞器较发达 细胞核常染色质较多 并 常见脱颗粒现象 有的肥大细胞虽完整 但其颗 粒膨胀变大 电子密度减低 有的颗粒呈空泡状 图 3 4 在癌细胞旁的肥大细胞常与淋巴细 胞 浆细胞等相邻 在细胞之间可见释放的肥大 细胞颗粒 淋巴细胞形态多不规则 有伪足伸 出 其细胞核中常染色质增加 呈功能活跃状 态 甲状腺腺瘤有纤维化病变时 脱颗粒的肥大 细胞明显增多 肥大细胞内的颗粒大都呈空泡 状 其附近还可见成纤维细胞及较多的胶原原 纤维 讨论 在宿主抗肿瘤的免疫反应中 肥大细胞的 作用逐渐受到重视 作为免疫细胞之一的肥大 细胞 在各种肿瘤中均可见其数量和分布上的 变化 但其在肿瘤生长过程中所起的作用 意见 尚不一致 1 3 我们的实验表明 在甲状腺良 恶性肿瘤中 肥大细胞数量均比正常甲状腺多 电镜下还见到肥大细胞与淋巴细胞及浆细胞等 相邻 这些细胞均有功能活跃表现 按照肥大细胞所含酶的不同 肥大细胞可 分为两种类型 即含有类胰蛋白酶 tryptase 和 类糜蛋白酶 chymase 的TC肥大细胞及仅含 类胰蛋白酶的T肥大细胞 这两种肥大细胞的 电镜下结构也有所不同 T 肥大细胞的颗粒可 111 中华耳鼻咽喉科杂志1996年4月第31卷第2期 出现涡卷状结构 TC肥大细胞的颗粒电子致 密均匀一致 4 我们观察所见 正常甲状腺与甲 状腺肿瘤中的肥大细胞都是具有TC肥大细胞 颗粒特征的 但正常情况下常呈静止状态 而在 肿瘤组织中多有脱颗粒现象 经A lcian蓝 藏红组化染色 在甲状腺肿 瘤间质中 有的肥大细胞颗粒的染色性质发生 了显著变化 表明在肿瘤浸润时 其颗粒成份化 学性质有所改变 可能与此时颗粒内容有不同 程度的释放和重新合成有关 实验证明先天性缺乏肥大细胞的W W v 小鼠的肿瘤发生率明显高于正常小鼠 但输入 正常小鼠骨髓 使肥大细胞数量恢复正常时 其 肿瘤发生率也随之下降 5 肥大细胞颗粒中还 含有肿瘤坏死因子 可以溶解杀伤多种肿瘤细 胞 6 还有研究发现 肥大细胞数量多 肿瘤患 者的生存率高 肿瘤转移率低 7 可能肿瘤组织 中的肥大细胞除具有杀伤肿瘤细胞功能外 还 具有防止肿瘤向周围浸润和转移的作用 本实 验观察在甲状腺肿瘤中 尤其在甲状腺癌中 肥 大细胞显著增多 同时脱颗粒现象也明显 因此 考虑它们参与了局部的抗肿瘤作用 肥大细胞释放的介质如组胺等 可增加血 管的通透性 促使淋巴细胞至癌细胞区 8 致敏 的T淋巴细胞可直接攻击癌细胞 可使癌细胞 溶解 致敏的B淋巴细胞则分化为浆细胞 产 生相应的抗肿瘤抗体 1 我们的实验从形态学 上证明了这些细胞相邻存在 它们可能在协同 抵抗肿瘤细胞的浸润 甲状腺腺瘤虽为良性肿瘤 肥大细胞数量 也较多 在并发纤维化改变时 肥大细胞脱颗粒 现象十分明显 可能由于在纤维化病理过程中 成纤维细胞增多的同时 肥大细胞也增加 在脱 颗粒的肥大细胞周围有较多的成纤维细胞及胶 原原纤维 说明这两种细胞可能有相互促进作 用 本文图1 4见插页第16页 参考文献 1 U eda T Aozasa K Tsuji mote M et al Prognostic sig2 nificance of mast cells in soft tissue sarcoma Cancer 1988 62 2416 2 Flynn EA Schwartz JL Shklar G Sequential mast cell infiltration and degranulation during experi mental carcino2 genesis J Cancer Res Clin Oneol 1991 117 115 3 Burtin C M ast cells and tumour grow th Ann Inst Pastur I mmunol 1986 137 289 4 W eidner N Austen KF Evidence for morphologic diver2 sity of human mast cells Lab Invest 1990 63 63 5 Tanooka H Kitamura Y Sada T et al Evidence for involvement of mast cells in tumor suppression in m ice JNC I 1982 69 1305 6 Tharp MD Kasper C ThieleD et al Studies of connec2 tive tissue mast cell2mediated cytotoxicity J Invest Der2 matol 1989 93 423 7 Steffen M Abboud M Potter GK et al Presence of tumour necrosis factor a related factor in human ba2 sophil mast cells I mmunology 1989 66 445 8 Van Loveren H DenO tterW M eade R et al A role for mast cells and the vasoactive am ine serotonin in T2cell2de2 pendent i mmunity to tumors JI mmuno