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文档简介

酸性磷酸酶 ACP 的显示 目的要求基本原理实验用品方法与步骤实验结果实验报告 kl 目的要求 1 熟悉酸性磷酸酶显示方法的原理及操作步骤2 观察酸性磷酸酶在细胞中的分布 ACP在酸性条件下 pH4 7 可使作用液中的底物 甘油磷酸钠的磷酸根解离出来 进而与溶液中硝酸铅结合形成磷酸铅沉淀 因其是难溶解的无色沉淀物 需要与黄色的硫化铵作用 生成棕黑色PbS沉淀而被显示出来 甘油磷酸钠甘油 PO3 PO4 Pb NO3 2Pb2 PO4 2Pb2 PO4 4 NH4 2SPbS 基本原理 实验用品 1 器材 注射器 解剖用具 恒温水浴锅 载玻片 盖玻片2 试剂 3 淀粉溶液 ACP作用液 2 硫化铵3 材料 小鼠腹腔液涂片 免疫动物 实验前4 6天用无菌注射器取已灭菌的3 淀粉溶液1ml注射于小鼠腹腔内 每天一次 颈椎脱臼处死小鼠 吸取少量腹腔液 在玻片上涂层一薄层 室温晾干 将涂片插入装有ACP作用液的染色缸中 37 作用30分钟 取出后 蒸馏水漂洗 用10 甲醛钙溶液后固定5min 玻片入2 硫化胺溶液作用2 3min 进行显色 取出后蒸馏水漂洗 镜检 对照实验 对照组的作用液中不加 甘油磷酸钠 而以蒸馏水代替 或入作用液前先用高温 50 处理30min 使酶失去活性 作好标记 然后同时进行上述实验 实验结果 实验报告 绘图
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