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实验三白细胞分类计数DC 原理 将血液制成血涂片 用瑞氏染液染色 根据各种白细胞形态特征分类计数100个白细胞 即可求出各种白细胞的相对比值 百分率 器材 1 显微镜2 采血用具3 载玻片 推片 蜡笔4 分类计数器 试剂 1 瑞氏染液或瑞氏 姬姆萨染液2 PH6 4 6 8磷酸盐缓冲液 一 血片制作 示教 1 良好涂片标准 呈头 体 尾舌形血膜厚薄适宜两边留有空隙 2 涂片好坏与下列因素有关 血滴大小推片与玻片之间角度推片速度 二 染色1 染色方法 用蜡笔在血膜两头划线将血片平放在桌上瑞氏染液3 5滴染30s 分钟加等量缓冲液混匀染3 5分钟细小流水冲去染液干燥后镜检 2 染色结果判断 1 正常 外观呈粉红色镜下红细胞染粉红色 可见有碟状感白细胞浆中的颗粒能显示各种细胞的特有色彩 核染紫红色 染色质清楚 粗细松紧可辨 2 偏酸 红细胞和嗜酸性颗粒偏红 白细胞核呈浅兰色或不着色 太酸则只见一片红染 白细胞除嗜酸性颗粒外 均不着色 3 偏碱 细胞呈灰兰色 白细胞颗粒深暗 嗜酸性颗粒变成暗褐色 甚至黑色 中性颗粒也偏粗偏碱 紫黑色 红细胞偏蓝 深蓝 血片过厚的地方呈绿色 3 注意事项 未干透血膜 染色时易脱落 故血膜应干透再染色 冲洗前 先在低倍镜下观察有核细胞是否着色 否则适当延长染色时间 染液不能过少 以防蒸发 染料沉着在血膜上不易冲掉 影响观察 勿先倒掉染液 直接流水冲洗 防染料沉着 染色应注意保存血片尾部 不能用蜡笔划去 因体积大的细胞常在此出现 三 分类方法 制片染色低倍镜观察 内容 选择细胞分布均匀 染色好的部位转油镜下计数100 200个白细胞 求出各种白细胞所占百分比 细胞分布 头体部以淋巴细胞较多尾部和两侧以中性粒 单核细胞较多 片尾部 异常 大的细胞较多 一般选择片头至片尾的2 3区域计数较好 即体尾交界处 按一定方式 有规律的移动视野 四 外周血正常白细胞形态 2 大小不均 中毒颗粒 空泡变性 空泡变性 杜勒体 核棘突 巨型变和分叶过多 核变性 核棘突核碎裂核固缩 型 空泡型 型 不成熟型 型 不规则型 浆细胞型幼稚型单核细胞型 注意事项 有时病人白细胞极少 一张片 100个WBC 可数50个细胞 再算出百分数 同时应注明 或数2张片子 并注明 发现幼稚或异常白细胞 应分类报告 包括在分类百分率中 如遇到不能确认的细胞 应另列入分类不明一项 如实报告 并保留血片 发现有核红细胞 应报告分类
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