HBV DNA检测在孕产妇中的临床应用.doc

HBV DNA检测在孕产妇中的临床应用【关键词】 HBV,DNA检测 【摘要】 目的 探讨慢性乙肝病毒（HBV）感染孕产妇的血清、唾液、乳汁HBV DNA检测在临床中的应用价值。方法 用酶联免疫吸附法（ELISA）检测HBV血清学标志物。用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）法检测HBV DNA。对85例慢性HBV感染孕产妇的血液、唾液、乳汁标本进行检测与分析。结果 85例慢性HBV感染产妇的血清标志物HBsAg、HBeAg、HBcAb三项阳性28例，阳性率为32.94%，HBsAg、HBeAb、HBcAb三项阳性57例，阳性率为67.06%。血液HBV DNA阳性46例，阳性率为54.12%，唾液HBV DNA阳性43例，阳性率为50.59%，乳汁HBV DNA阳性42例，阳性率为49.41%。结论 慢性HBV感染孕产妇尤其是血清HBV DNA阳性者的唾液或乳汁含有HBV DNA，具有一定传染性。检测HBV感染孕产妇的血液、唾液和乳汁中HBV DNA含量，对阻断母婴垂直传播和预防家庭内水平传播，及对HBV感染孕产妇的诊治和疗效评估有着重要意义，特别是为HBV感染产妇选择是否人乳喂养提供了指导依据。 【关键词】 乙肝病毒；DNA；唾液；乳汁；血液； 乙型肝炎病毒（HBV）的感染是国际上预防和治疗的棘手难题。据WHO估计，全球至少有3.5亿人携带乙型肝炎病毒。在我国HBsAg携带率高达9.8%，育龄妇女HBsAg阳性率也高达7%，其围产期传播发生率更是高达40%1。近年来随着医疗科技的快速发展，对血液中HBV的诊疗和预防研究工作有了新的进展和突破。但除了血液是直接的传染源外，人体体液和分泌物是否是传染源尚无明确定论。HBV DNA是HBV具有复制力和传染性的重要指标。目前对人体体液和分泌物中HBV DNA的研究引起了人们高度重视。为观察慢性HBV感染孕产妇血液、唾液、乳汁HBV DNA的含量在预防HBV传播和诊疗中的应用价值。笔者对85例慢性HBV感染孕产妇分别进行了HBV血清学标志物检测及血清、唾液、乳汁的HBV DNA含量。报告如下。 1 资料与方法 1.1 检测对象 2000年3月2004年6月在本院围产检查和住院分娩孕产妇中慢性HBV 85例自愿者。HBV血清学标志物阳性，肝功能检查正常。孕妇产后留取其血液、唾液（口腔无黏膜破损）、乳汁标本。 1.2 标本采集方式 唾液：在检测对象无口腔黏膜创伤破损的条件下，温开水漱口，用清洁的一次性塑料杯留取自然分泌的唾液0.51ml立即送检。血清：空腹静脉采血3ml并在2h内分离血清备用。乳汁：清洗乳房后，挤乳汁0.51.0ml于消毒试管内立即送检。 1.3 方法及试剂来源 （1）HBV血清学标志物用ELISA检测，上海科华公司试剂，按操作规程操作。（2）HBV DNA用荧光定量PCR法检测，personal cycler PCR扩增仪为Biometra产品，DA620微量荧光检测器和试剂均为中山医科大学达安基因诊断有限公司产品。均严格按规程操作，HBV DNA检测每次带阴、阳性标本同时检测，并参加卫生部的室间质评，能力比对实验成绩合格。HBV血清学标志在作室内质控的同时参加卫生部的室间质评，能力比对实验成绩合格。 1.4 统计学处理 HBV DNA用每毫升血拷贝数表示，2检验，PEMS3.0统计软件包完成。 2 结果 2.1 85例慢性HBV感染孕妇血清标志物模式 见表1。 表1 本组孕妇血清标志物阳性率 2.2 85例慢性HBV感染孕妇产后血液、唾液、乳汁HBV DNA检测结果 见表2。表2 本组孕妇产后血液、唾液、乳汁HBV DNA检测结果 3 讨论 血液是直接的传染源，HBV DNA是HBV具有传染性的最可靠指标。唾液和乳汁是否在生活接触性传播途径中有作用，这一直是人们关注的问题。Noppornpanth S等2报道23例HBsAg阳性者中11例唾液HBV DNA阳性，认为HBV 携带者的唾液可能具有潜在的传染性。杨桂生等3报道20世纪80年代中期，对4500个家庭以母亲HBsAg阳性与阴性分为两类进行调研分析，结果显示母亲阳性者其50%的子女也是阳性，母亲阴性者子女中的阳性者仅为9.97%，表明母亲在家庭传播的重要性1。Zhevachevsky NG等4对505例男性乙型肝炎患者唾液HBsAg和HBeAg的检测分析也提示唾液具有传染性可能。倪崖等5报道161例HBsAg阳性者中唾液HBV DNA阳性率为14%，提示唾液有一定传染性。李跃珍等6报道78例HBsAg阳性孕妇中乳汁HBV DNA阳性率为29.5%。金春子等7报道血清HBV产妇母乳喂养婴儿HBV感染率为82.16%91.67%，乳汁可能具有潜在的传染性。胡丽娜8等报道HBsAg阳性孕妇产后1年传播几率是51.80%83.30%。本研究结果85例慢性HBV孕产妇唾液HBV DNA阳性率为50.59%，乳汁HBV DNA阳性率为49.41%。这些结果提示血HBV DNA阳性的产妇，其唾液和乳汁也是HBV排泄的途径，因此，唾液和乳汁也是引起婴儿HBV感染不可忽视的传染源。其传播途径可能是在婴儿易感者口腔黏膜有破损或消化道因炎症发生水肿时，HBV通过毛细血管进入血循环引起乙型肝炎生活接触性传播。所以，HBV DNA阳性产妇哺乳、口喂婴儿和与家人共用生活餐具时会造成家庭内水平传播。因此，从优生优育的角度出发，孕妇在孕前和围产期检测血清HBV DNA或产后检测血液、唾液和乳汁HBV DNA，对防止母婴间、家庭内乙肝的垂直和水平传播尤为重要。本文结果还显示，虽然HBV血清学标志物阳性，但血清HBV DNA阴性的产妇其唾液和乳汁HBV DNA都为阴性。在提倡人乳喂养的今天，HBV产妇选择是否人乳喂养有了可靠依据。同时，也为HBV感染孕产妇是否需要进一步治疗提供重要依据。 【参考文献】 1 姚桢. 分子乙型肝炎病毒相关病学.北京：中国医药科技出版社，307；310. 2 Noppornpanth S，Sathirapongsasuti N，Chongsrisawat V，et al.Detection of HBsAg and HBV DNA in serum and saliva of HBV carriers.Southeast Asian J Trop Med Public Health，2000，31（2）:419-421. 3 杨桂生，白洁.对乙型肝炎产妇在母乳喂养中存在的问题调查分析.中国优生与遗传杂志，2000，8（6）:89-89，115. 4 Zhevachevsky NG，Nomokonova NY，Beklemishev AB，et al.Dynamic study of HBsAg and HBeAg in saliva samples from patients with hepatitis B infection:diagnostic and epidemiological significance.J Med Virol，2000，61（4）:433-438. 5 倪崖.聚合酶链反应检测HBV DNA的应用价值研究.浙江省医学科学院学报，1997，8（2）:4-6. 6 李跃珍. 孕妇HBV感染状态与垂直传播关系的研究. 山东医药，1999，39（5）: 16-17. 7 金春子. 132例乳汁中HBV D