《陈玉明开题报告》PPT课件.ppt

有机磷对雄性淡水鱼生殖毒性的研究 报告人 陈玉明专业 细胞生物学研究方向 生殖细胞导师 胡家会 聊城大学2008级硕士研究生开题报告 主要内容 一 选题背景二 选题的目的和意义三 研究现状和发展趋势四 课题主要研究内容五 技术路线六 可行性分析七 创新点八 预期研究成果九 学位论文工作计划安排 一 选题背景 1 农药对环境的污染的问题越来越受到人们的关注2 有机磷农药在农药的生产和使用中占主导地位3 有机磷可通过多种方式对生物 包括人类 产生生殖毒性作用4 生物检测在环境监测中的作用越来受到人们的重视5 用精子细胞检测环境毒物是生物检测的一种新方法 二 选题的目的和意义 1 选题目的本课题通过急性和慢性毒性实验 从组织水平 细胞水平和亚细胞水平反映有机磷对雄性淡水硬骨鱼生殖毒理效应 并对其作用机制进行探讨 二 选题的目的和意义 2 选题的意义2 1 可为淡水鱼养殖和资源保护提供参考 2 2 可为相关法律法规的制定提供提供科学依据 2 3 可为男性不孕症的预防和治疗提供依据 2 4 可为环境污染物的检测和环境保护提供依据 2 5 有助于生物检测检测技术的完善和应用 三 研究现状和发展趋势 1 研究现状国内外具有研究 是环境毒理研究的热点1 1 国外 开始的较早 研究的层次较深 水平较高 但受试物以除草剂和灭草剂为主 1 2 国内 起步较晚 研究的人较少 研究的范围较狭窄 层次相对较低 受试物多是单一类型 并以杀虫剂类为主 三 研究现状和发展趋势 2 发展趋势2 1 由受试物单一类型的毒性研究向多种类型联合毒性作用发展2 2 由单一层次向从多层次 多角度方面的研究发展整体 组织 细胞 亚细胞 分子水平 神经毒性 内分泌毒性 生殖毒性 酶干扰剂 氧化作用 细胞溶剂 四 课题主要研究内容 1 材料与方法 以玫瑰无须鲃 泥鳅等淡水鱼实验材料 以敌敌畏阿维菌素等有机磷农药为受试物 应用计算机辅助分析 CASA 分光光度法 石蜡切片 超薄切片等技术方法进行研究 四 课题主要研究内容 2 有机磷对淡水鱼精子活力的毒理作用在显微镜下观察精子运动 并用计算机辅助分析系统 CASA 摄影 进行数据分析 计算出运动率 速度 并记录运动时间 最后用统计软件比较分析 探讨有机磷对精子活力的影响及作用机理 3 有机磷对淡水鱼雄性生殖系统形态和结构的毒理作用测定精巢 体重比值显微观察亚显微观察 四 课题主要研究内容 4 有机磷对淡水鱼雄性生殖系统氧化损伤测定精细胞中超氧化物歧化酶 S0D 硫代巴比妥酸值 1 TBARS 实验溶液对精液处理后 离心 除去上清液得到精子细胞 采用物理或化学方法使精子细胞充分破坏 再离心获得上清液 用分光光度计进行测定 五 技术路线 1 有机磷对雄性生殖系统形态结构影响 饲养鱼 解剖 取精巢 称重 计算精巢 体重比值 固定 逐级脱水 透明 浸蜡 切片 染色 镜检 脱水 双固定 包埋 染色 切片 组织水平 细胞水平 亚细胞水平 说明 五 技术路线 2 有机磷对精子运动的影响 2 4 取精液 制精子悬液 药物处理 饲养鱼 显微观察 运动率 运动时间 运动速度 显微观察 五 技术路线 3 有机磷对淡水鱼精子的氧化损伤 离心 饲养鱼 取精液 药物处理 细胞破裂 离心 用分光光度计测定 超氧化物歧化酶 S0D 硫代巴比妥酸值 TBARS 五 技术路线 4 染色体核型分析 5 饲养鱼 PHA处理 秋水仙碱处理 解剖 取肾脏和精巢 制细胞悬液 离心 水洗 离心 低渗处理 离心 固定 滴片 染色 观察 六 可行性分析 1 生命科学学院有石蜡切片机 正置荧光显微镜 CASA 倒置荧光显微镜 CASA 分光光度计 离心机等设备 完全能满足实验的需要2 电镜观察在青岛大学医学院完成3 本试验有一定的研究基础和较成熟的实验技术4 有相关研究文献可供参考5 指导教师和同学们帮助 一定能完成 七 创新点 1 生物实验的新材料玫瑰无须鲃是近几年才使用的一种生物学研究的新材料 国内外研究较少 由于它的优点被广泛应用于生殖 发育及毒理学等方面 以泥鳅作为实验材料在生物学领域更是少见 但是它的营养价值和经济价值 以及其特有的生物学特性正越来越受到人们的重视 有机磷农药种类很多 多达160余种 而当前的研究却不是很多 2 玫瑰无须鲃染色体核型分析还未见到有人研究3 精子生物学在毒理学方面的应用时间不长4 农药联合毒性的研究较少 八 预期研究成果 筛选2 3种有机磷农药影响玫瑰无须鲃鱼和泥鳅精子活力的最低浓度 并测定精巢 体重比的变化情况 从显微 亚显微水平揭示有机磷农药对鱼精子的毒性作用探索玫瑰鱼染色体核型分析方法 进一步揭示玫瑰鱼的遗传信息 从生化角度研究环境有机磷对精子细胞的氧化损伤 并对有机磷生殖毒性的作用机制进行探讨 发表研究性论文2 3篇 九 学位论文工作计划安排 参考文献 1 BingshengZhoua b WenhuaLiuetal Exposureofspermatozoatoduroquinonemayimpairreproductionofthecommoncarp Cyprinuscarpio throughoxidativestress AquaticToxicology77 2006 136 142 2 胡家会 张士崔 张永忠等 水胺硫磷对玫瑰无须鲃精子的体外毒性作用 高技术通讯 2005 15 104 107 3 MokhtarI Yousef KamelI Kameletal Aninvitrostudyonreproductivetoxicityofaluminiumchlorideonrabbitsperm Theprotectiveroleofsomeantioxidants Toxicology239 2007 213 223 4 MokhtarI Yousef KamelI Kameletal Aninvitrostudyonreproductivetoxicityofaluminiumchlorideonrabbitsper