20120926--分子生物学复习题.doc

分子生物学复习题一、名词解释1、 基因： 基因是编码蛋白质或RNA等具有特定功能产物的遗传信息的基本单位，是染色体或基因组的一段DNA序列(对以RNA作为遗传信息载体的RNA病毒而言则是RNA序列)。包括编码序列(外显子)、编码区前后对于基因表达具有调控功能的序列和单个编码序列间的间隔序列(内含子)。2、 基因组：基因组，Genome，一般的定义是单倍体细胞中的全套染色体为一个基因组，或是单倍体细胞中的全部基因为一个基因组。可是基因组测序的结果发现基因编码序列只占整个基因组序列的很小一部分。因此，基因组应该指单倍体细胞中包括编码序列和非编码序列在内的全部DNA分子。说的更确切些，核基因组是单倍体细胞核内的全部 DNA分子；线粒体基因组则是一个线粒体所包含的全部DNA分子；叶绿体基因组则是一个叶绿体所包含的全部DNA分子。3、 端粒：端粒是线状染色体末端的DNA重复序列。 端粒是线状染色体末端的一种特殊结构，在正常人体细胞中，可随着细胞分裂而逐渐缩短。把端粒当作一件绒线衫袖口脱落的线段，绒线衫像是结构严密的DNA，排在线上的DNA决定人体性状。它们决定人头发的直与曲，眼睛的蓝与黑，人的高与矮等等，甚至性格的暴躁和温和。4、 操纵子：操纵子（operon）：指启动基因、操纵基因和一系列紧密连锁的结构基因的总称。转录的功能单位。很多功能上相关的基因前后相连成串，由一个共同的控制区进行转录的控制，包括结构基因以及调节基因的整个DNA序列。主要见于原核生物的转录调控，如乳糖操纵子、阿拉伯糖操纵子、组氨酸操纵子、色氨酸操纵子等5、 顺式作用元件：顺式作用元件是指与结构基因串联的特定DNA序列，是转录因子的结合位点，它们通过与转录因子结合而调控基因转录的精确起始和转录效率。顺式作用元件是转录调节因子的结合位点，包括启动子、增强子和沉默子。顺式作用元件包括启动子、增强子、调控序列和可诱导元件等，它们的作用是参与基因表达的调控。顺式作用元件本身不编码任何蛋白质，仅仅提供一个作用位点，要与反式作用因子相互作用而起作用.6、 反式作用因子：是指能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。有时也称转录因子。 大多数真核转录调节因子由某一基因表达后，可通过另一基因的特异的顺式作用元件相互作用，从而激活另一基因的转录。这种调节蛋白称反式作用因子。7、 启动子： RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列。 启动子是基因的一个组成部分，控制基因表达（转录）的起始时间和表达的程度。启动子就像“开关”，决定基因的活动。既然基因是成序列的核苷酸，那么启动子也应由核苷酸组成。启动子本身并不控制基因活动，而是通过与称为转录因子的这种蛋白质结合而控制基因活动的。转录因子就像一面“旗子”，指挥着酶 (RNA聚合酶) 的活动。这种酶指导着RNA复制。8、 增强子：增强子(enhancer)指增加同它连锁的基因转录频率的DNA序列。增强子是通过启动子来增加转录的。有效的增强子可以位于基因的5端，也可位于基因的3端，有的还可位于基因的内含子中。增强子的效应很明显，一般能使基因转录频率增加10200倍，有的甚至可以高达上千倍。例如，人珠蛋白基因的表达水平在巨细胞病毒(cytomegalovirus，CMV)增强子作用下可提高6001 000倍。增强子的作用同增强子的取向(5一3或3一5)无关，甚至远离靶基因达几千kb也仍有增强作用。9、 基因表达：基因表达(gene expression)是指细胞在生命过程中，把储存在DNA顺序中遗传信息经过转录和翻译，转变成具有生物活性的蛋白质分子。10、 信息分子：生物体内、外具有调节细胞生命活动的化学物质被称为信息分子。其中由细胞分泌的调节靶细胞生命活动的化学物质称为细胞间信息分子；而在细胞内传递信息调控信号的化学物质称为细胞内信息分子。11、 受体：能与细胞外专一信号分子（配体）结合引起细胞反应的蛋白质。分为细胞表面受体和细胞内受体。受体与配体结合即发生分子构象变化，从而引起细胞反应，如介导细胞间信号转导、细胞间黏合、细胞胞吞等细胞过程。12、 分子克隆：分子克隆是指分离一个已知DNA序列，并以in vivo（活体内）方式获得许多复制品的过程。在分子水平上提供一种纯化和扩增特定DNA片段的方法。常含有目的基因，用体外重组方法将它们插入克隆载体，形成重组克隆载体，通过转化与转导的方式，引入适合的寄主体内得到复制与扩增，然后再从筛选的寄主细胞内分离提纯所需的克隆载体，可以得到插入DNA的许多拷贝，从而获得目的基因的扩增。13、 蛋白激酶：蛋白激酶又称蛋白质磷酸化酶。一类催化蛋白质磷酸化反应的酶。它能把腺苷三磷酸（ATP）上的-磷酸转移到蛋白质分子的氨基酸残基上。在大多数情况下，这一磷酸化反应是发生在蛋白质的丝氨酸残基上。14、 蛋白磷酸酶：一般分为3大类。底物专一的蛋白激酶：如磷酸化酶激酶，丙酮酸脱氢酶激酶等。依赖于环核苷酸的蛋白激酶：如环腺苷酸（cAMP）蛋白激酶，环鸟苷酸（cGMP）蛋白激酶。其他蛋白激酶：如组蛋白激酶等。15、 基因工程：基因工程（genetic engineering）又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。基因工程技术为基因的结构和功能的研究提供了有力的手段16、 载体：在基因工程重组DNA技术中将DNA片段（目的基因）转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子。三种最常用的载体是细菌质粒、噬菌体和动植物病毒。17、 转化： 18、 感染： 19、 转导： 20、 转染： 21、 DNA变性： 22、 DNA复性： 23、 退火： 24、 筑巢PCR： 25、 原位PCR： 26、 定量PCR： 27、 基因打靶： 28、 DNA芯片： 29、 错义突变： 30、 无义突变： 31、 同义突变： 32、 移码突变： 33、 癌基因： 34、 细胞癌基因： 35、 病毒癌基因： 36、 基因诊断： 37、 RFLP： 38、 基因治疗： 39、 反义RNA： 40、 核酶： 34、 细胞癌基因： 35、 病毒癌基因： 36、 基因诊断： 37、 RFLP： 38、 基因治疗： 39、 反义RNA： 40、 核酶： 41、 三链DNA： 42、 SSCP： 43、 管家基因： 44、 细胞全能性： 45、 SD序列： 46、 反义核酸技术： 47、 核酸探针： 48、 周期蛋白： 49、 CAP： 50、 顺反子51、 结构域二、 问答题（一）、病毒、原核、真核基因组的特点？（二）、乳糖操纵子的作用机制？（三）、真核生物转录水平的调控机制？（四）、真核生物转录后水平的调控机制？（五）、受体的特点？（六）、表皮生长因子介导的信号传导途径？（七）、cAMP信号转导途径？（八）、IP3-Ca2+信号途径：（九）、分子克隆中常用的工具酶及良好载体的条件？（十）、蓝-白筛选的原理？（十一）SANGER双脱氧链终止法的原理？（十二）、核酸分子杂交的原理？（十三）、影响杂交的因素？（十四）、探针的种类和优缺点？（十五）、探针的标记法？（十六）、PCR的基本原理？（十七）、PCR引物设计的基本要求？（十八）、PCR的反应条件？（十九）、影响大肠杆菌系统外源基因表达的因素？（二十）、大肠杆菌系统表达外源基因必须具备的条件？（二十一）、真核细胞表达外源基因的条件？（二十二）、转基因动物的概念、原理及应用？答：1、概念：