抗乙型肝炎药物研究进展.doc

抗乙型肝炎药物的研究进展文献综述【摘要】 HBV是嗜肝DNA病毒科的原型病毒，在宿主细胞核内形成共价闭合环状DNA(cccDNA)进行复制。药物治疗慢性乙型肝炎多采用抗病毒、免疫调节、改善肝功能和抗肝纤维化等方法，而抗病毒治疗是其中最主要和关键的治疗措施。已发现的抗HBV药物种类十分有限，而且HBV倾向于不断的突变从而能够逃避特异性的抗HBV化合物的抑制作用，因此寻找有效的抗HBV药物的研究任重道远。世界卫生组织估计全世界大约有20亿乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）感染者，每年由于急慢性HBV感染而死亡的人数达100万1，2004年全球HBV慢性感染者达4亿2，我国有1. 2亿HBV携带者。尽管许多国家实施在新生儿中接种疫苗的措施成功地阻止了HBV的垂直传播，但全世界现在仍有3.5亿的慢性乙型肝炎患者。寻找有效的抗HBV药物的研究任重道远，在过去的十年时间中研究者已发现一些新的治疗HBV感染的对策。1. HBV复制的分子生物学HBV是嗜肝DNA病毒科的原型病毒，其基因组是一个部分双链的DNA分子，有3.2kb。基因组有四个重叠的开放阅读框，分别编码外膜蛋白(pre-S/S)、核心蛋白 (precore/core)、聚合酶蛋白和X蛋白。HBV复制过程大约可分为4个阶段：(l)HBV颗粒首先与细胞膜上的受体结合，脱去外膜进入细胞内；(2)再经衣壳蛋白的磷酸化而脱去衣壳， HBV DNA进入细胞核内，并在细胞核内转变成超螺旋DNA(cccDNA)。cccDNA是HBV转录的模板，它可转录生成 mRNA；(3)cccDNA指导合成前基因RNA人并在细胞核外被衣壳包裹；以前基因RNA为模板，在细胞核外经逆转录合成 HBV DNA负链，随后合成HBV正链；(4)衣壳中的HBV由膜包裹后分泌到细胞外以完整的病毒颗粒进入其他细胞，也可以重新脱去衣壳进入细胞核内，以维持细胞核内cccDNA的数量3。2. 抗乙型肝炎药物及作用机理目前抗乙肝病毒药物主要包括两大类，即免疫调节剂(包括干扰素和胸腺素等)和病毒抑制剂(包括阿行德福韦及拉米夫定等)。下面就主要应用的药物做一下介绍2.1 免疫调节剂2.2.1 干扰素干扰素(-IFN)1992年，美国FDA批准干扰素(IFN)应用于治疗慢性乙型肝炎病人，干扰素的作用机制主要包括直接抗病毒作用和免疫调节作用。IFN的抗病毒作用是通过激活细胞内2-5寡核昔酸合成酶催化寡核昔酸合成，进而激活内源性核酸内切酶，导致病毒mRNA裂解，阻止HBV复制。其免疫调节作用表现为促进肝细胞表达人类白细胞抗原，从而促进受HBV感染的肝细胞被CD8+细胞毒淋巴细胞清除。最近发现IFN还能抑制 HBVDNA增强子1活性，从而抑制其复制4。2.2.2 胸腺肽(T1) 胸腺肽(T1)抑制HBV复制及ALT复常的疗效与-IFN相似，但起效速度慢于-IFN，而有较强的后继作用5。2.2.3 猪苓多糖 猪苓多糖对肝炎患者有减轻肝损伤、促进肝细胞再生及促使机体提前产生抗HBs抗体和增加滴度的作用，对细胞免疫也有增强作用，猪苓多糖合并乙肝疫苗可提高其疗效。该疗法优点是无明显副作用，价格低廉5。2.2 核苷类药物核昔类似物的发展已经引发了一场治疗慢性乙型肝炎的革命。拉米夫定(lamivudine)和更新的核昔类似物阿德福韦(adefovir)、恩替卡韦(entecavir)、替比夫定(telbivudine)通过抑制 HBVDNA多聚酶而阻断HBV复制，它们的抗病毒活性不依赖宿主对HBV的免疫反应。新一代核昔类似物具有口服生物利用度高，患者耐受性好的特点，因而可以长期使用。近年来，核昔类抗病毒药物的研究相当活跃，研究报道大量涌现，相继推出了一系列高效低毒的药物。核昔类HBV抑制剂可选择性阻断 HBVRNA依赖的逆转录或DNA依赖的DNA聚合，从而发挥抑制HBV复制的作用。这类化合物5位首先在宿主细胞内磷酸化，形成5-三磷酸化物，进而在 HBV DNA聚合酶的作用下与病毒DNA链末端相互作用，阻断 HBV DNA的复制。其选择性在很大程度上依赖于其磷酸化代谢产物与 HBV DNA聚合酶的亲和力。其中以拉米夫定为常用抗乙肝药物，拉米夫定(3TC)全称是-L-2，3-双脱氧-3-硫胞嘧啶核昔，是双脱氧胞苷的结构类似物，也是第一个被批准用于治疗慢性HBV感染的核昔类药物。3TC不仅以其代谢中产生的dCTP与DNA POl所催化的天然底物dCTP竞争结合于DNA，而且核苷糖环上3-OH端已被硫原子(S)所取代，而不能与其后的dNTP形成5-3磷酸二脂链，故导致DNA链合成终止，因此3TC抑制 HBV DNA作用强而迅速6。2.3 焦磷酸类似物膦甲酸钠为焦磷酸盐类似物，是HBV DNA聚合酶抑制剂，可用于耐药株感染的控制，有良好的抑制 HBV的作用，但抑制HBV作用短暂，宜作为抗病毒序贯疗法的首程用药或联合用药的选择之一6。2.4 中草药很多中草药提取物对乙肝有一定的作用，如联苯双酯、水飞蓟宾、齐墩果酸和甘草酸二胺等，具有保护肝细胞，改善肝功能和降酶作用，但对HBV的抑制作用较弱，因此疗效不明显。最近几年从苦豆子中提取的苦参素(matrine)具有降酶退黄，提高白细胞，改善肝功能和抑制HBV复制的作用，不良反应少，价格适中，是当前治疗乙肝较为有效的药物之一7。其药理效应是直接抑制HBV复制。动物试验表明，苦参素抑制肝脏炎性活动和肝内胶原合成而具有抗纤维化、延缓肝细胞凋亡、清除自由基和增强免疫功能的作用。3. 新型的候选药物核衣壳是HBV DNA的合成场所，在病毒复制装配过程中，核衣壳保护病毒基因组免于降解，同时在感染过程中又介导病毒基因组的释放，这种双重作用对于病毒的增殖传播是非常重要的。随着对核衣壳在HBV增殖周期中重要作用的认识及新的研究方法的建立，以核衣壳为靶点的药物研究越来越受到人们的重视。最近已经发现了一些新型的HBV特异性的候选药物。非核昔类苯丙烯酞胺衍生物(AT-61，AT-130)能够有效抑制野生型和拉米夫定耐药型的HBV病毒株，但对其他的肝DNA病毒复制没有抑制功能，包括DHBV和WHV8。MCC-478同样能抑制DHBV9和WHV的复制，它的抗病毒谱与那些非核昔类苯丙烯酞胺衍生物不同。对新型抗HBV化合物作用机制的研究连同肝DNA病毒学的快速发展，将为设计合成更有效的抗HBV病毒药物提供可靠的基础。非核昔类HBV选择性抑制剂的研究尚处于起步阶段。这类化合物活性高、毒性低、不易产生耐药、结构多样，而且相当一部分化合物的靶点蛋白的结构明确，为抗HBV药物的设计提供了很好的依据，所以越来越多的研究投入到非核昔类药物的设计、合成与生物活性、毒性的测试上，发现了许多结构各异，选择性好，不易产生耐药的抗HBV化合物。例如，苯丙氨衍生物对原生型和拉米夫定耐药的HBV变种有较好的抑制作用担（EC50=2.4mol/L)。其抗病毒机制可能是抑制带有病毒壳体蛋白信息的RNA的合成10。亚氨基糖类可以干扰HBV糖蛋白的正确折叠和转运，先于病毒包封前发挥抗病毒作用11。此外，helioxanthin类似物(EC50=0.030mol/L)是首次报道的抗病毒作用机制不同于前述化合物的天然产物衍生物。其独特的化合物结构不仅有作为先导化合物指导药物设计的基础研究价值，而且有作为替代治疗方案的临床应用价值12。参考文献1 Akuta N, Kumada H. Influence of hepatitis B virus genotypes on the response to antiviral therapiesJ. J Antimicrob Chemother,2005, 55(2):139-1422 McMahon B J. Selecting appropriate management strategies for chronic hepatitis B: who to treatJ. Am J Gastroenterol, 2006,101 (S):73 Lai C L,Ratziu V,Yuen M F,etal. Viral hepatitis B J.Lancet,2003,362(9401):2089-20944 Jung M C,PapeG R. Immunology of hepatitis B infection J.Lancet Infect Dis, 2002, 2(l):43-505 万国兰. 慢性乙型肝炎药物治疗的现状J.现代诊断与治疗, 2007 , 18(6) ：383-3846 王晓燕. 新型核昔类化合物-L-D4A抗乙型肝炎病毒作用的实验研究D7 麦国荣. 乙型肝炎药物治疗的新进展J.医药信息,2005：24-268 Yuasa,S.,Kamiya,N.&Marion,P.L.(2001).Evaluation of antihepadnaviral activity of a novel PMEA derivative in DHBV-infected duck models. In Programand Abstracts of the Fifty-second Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Disease, Dallas, TX, 2001. Abstract 587,P.319A. American Association for the Study of Liver Disease, Alexandria, VA, USA.9 DELANEYWE, EDWARDSR, COLLEDGED, etal. Phenylpropena mide derivatives AT-61 and AT-130 inhibit replication of wild-type and lamivudine-resistant strains of hepatitis B virus in vitro J .Antimicrob Agents Chemother, 2002, 46(9):3057-306010 Papatheodoridis, G.V., Manesis, E. &Hadziyannis, S.J. (2001). The long-term outcome of interferon-alfa treated and untreated patients with HBeAg negative clronic hepatitisB. Journal of Hepatology 34,306-1311 KarrayiannisP. Hepatitis B virus :old, new and future approaches to antiviral treatment J. J Antimicrob C