异体LAK细胞联合IL-2治疗慢性乙型肝炎的近期疗效观察.doc

异体LAK细胞联合IL-2治疗慢性乙型肝炎的近期疗效观察广西预防医学 1999年第4期第5卷 论著作者：袁海宁罗光汉吴继周单位：广西医科大学第一附属医院(南宁530021）关键词: LAK细胞；IL-2；慢性乙型肝炎；肝功能摘要对73例慢性乙型肝炎患者随机分为两组，即异体LAK细胞联合IL-2治疗组48例和一般护肝药物对照组25例。在治疗前及治疗后一个月检测乙型肝炎病毒DNA，两对半血清HBV标志物、肝功能等项目。结果显示治疗组HBeAg阴转率为60.4%(P0.01)，HBcAg、抗HBc-IgM及HBVDNA的阴转率分别为37.5%、29.2%和41.7%(P0.05)。HBsAg阴转率为6.3%与对照组无显著性差异(P0.05)。治疗组肝功能恢复效果较对照组佳。Observation on therapeutic effect of combined allogenetic LAK cell and IL-2 on patients with chronic hepatitis B virus infection.Yuan Haining,Luo Guanghan,Wu Jizhou.Department of Infectious Diseases,First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University,Nanning 530021AbstractSeventy-three cases of chronic hepatitis B virus infection were random divided into case and control groups to probe the changes of replication marks of hepatitis B virus in patients treated by combined allogenetic LAK cell and IL-2.HBVDNA,other serum marks of HBV and liver function in the patients were tested before and one month after treatment.The results showed that the negative seroconversion rates of HBeAg,HBcAg,anti-HBc-IgM and HBVDNA were 60.4%,37.5%,29.2%and 37.5%,respectively (P0.05).The study also demonstrated that there was a faster and better in recovery of liver function in case group than control one.Key wordsLAK cell IL-2 Chronic hepatitis B Liver function近年国内采用自体LAK细胞回输治疗慢性乙型肝炎取得了一定的疗效1，主要表现在病毒复制指标的转化。我们自1994年开始将体外培养的异体LAK细胞联合IL-2治疗慢性乙型肝炎，在治疗前后进行HBVM及肝功能的检测。现就治疗效果予以总结及初步探讨LAK细胞和IL-2治疗的免疫机制。1材料与方法1.1病例的选择与分组根据1995年北京第五次全国传染病寄生虫病学术会议分型标准2，将1995年以来在我科住院的慢性乙型肝炎病人中选出血清检查HBeAg、HBVDNA、抗HBc-IgM、HBsAg五项病毒复制指标同时阳性者73例随机分为两组，用异体LAK细胞联合IL-2治疗组48例，其中，男性47例，女性1例，年龄2358岁，平均35.2岁。对照组25例，男性23例，女性2例，年龄2054岁，平均32.6岁。1.2异体LAK细胞的制备取健康O型血200ml，用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞(PBMC)，用RPMI 1640细胞培养液调至1106/ml，加入IL-2 1000 IU/ml，在37 5%CO2培育箱孵育57天，待LAK细胞扩增至11010/ml时，制成LAK细胞悬液。1.3治疗方法病人静脉滴注LAK细胞1108/100ml，隔天一次，6次为一疗程。在输LAK细胞前一天以及间隔期给以IL-2 10万单位肌注，每天一次，同时给予一般护肝药物(肌苷片、复合维生素B片、甘利欣胶囊)。对照组只是给予一般的护肝药物治疗。两组在治疗期间不加用其他免疫治疗药物。1.4检测方法治疗前及治疗后一个月用同样的方法及试剂检测HBVM及肝功能。两对半及HBcAg均为ELISA法，试剂由中国军事医科生物所提供。HBVDNA检测采用斑点杂交法，试剂由上海医科大学预防医学研究所提供。抗HBc-IgM为ELISA法，试剂由珠海亚利生物制品公司提供。1.5统计学方法所有数据均经PEMS统计软件包处理，用两样本率比较的2检验和两样本均数比较的t检验。2结果2.1两组病人治疗后血清HBVVM的变化见表1。治疗组的HBeAg阴转率与对照组的比较有显著性差异(P0.01)，治疗组的HBVDNA、HBcAg和抗HBc-IgM阴转率与对照组的比较有统计学差异(P0.05)，但对HBsAg阴转的作用不明显(P0.05)。表1治疗后血清HBVM的变化(%)组别例数HBeAgHBVDNAHBcAg抗HBc-IgMHBsAg治疗组4829(60.4)20(41.7)8(37.5)14(29.2)3(6.3)对照组257(28.0)4(16.0)3(12.0)2(8.0)0(0.0)合计7336(49.3)24(32.9)21(28.7)16(21.9)3(0.41)P0.01P0.052.2两组病人治疗前后肝功能的改变见表2。两组在治疗前及治疗后1个月分别查血清ALT和血清总胆红素(TBIL)，结果发现治疗组血清ALT及TBIL的数值比对照组低，说明前者肝功能恢复较后者效果好。两项指标的比较有统计学差异(P0.05)。表2治疗前后肝功能的检测结果组别例数治疗前治疗后ALTTBILALTTBIL治疗组48115.5732.5044.065.4843.0122.1722.484.31对照组25101.2330.3942.474.3057.4620.3625.345.02治疗后治疗组与对照组比较：P0.053讨论本文结果显示，经LAK细胞联合IL-2治疗慢性乙型肝炎后，73例患者HBeAg、HBVDNA、HBcAg及抗HBc-IgM的阴转率分别为60.4%、41.7%、37.5%和29.2%；肝功能ALT和TBIL恢复效果较对照组明显，表明用此方法治疗慢性乙型肝炎有一定的近期疗效。人体正常的细胞免疫主要依赖于细胞毒T淋巴细胞(CTL)、天然杀伤细胞(NK)和淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)所组成。作为促进T、B淋巴细胞增殖、分化与成熟的IL-2具有高度的免疫活性，它是机体免疫网络中起调节作用最重要的淋巴因子。不仅能够激活LAK前体细胞使其分化成LAK细胞，改变T细胞亚群表面抗原结构使CD+4及CD+4/CD+8比值升高；而且能够作用于NK细胞的IL-2受体，维持NK细胞的生长和功能。另外还发现IL-2具有抑制HBV某些启动子序列的作用来实现抗病毒作用3。然而，在慢性乙型肝炎患者外周血的CD+3、CD+4、CD+4/CD+8、NK与LAK细胞活性均明显下降4，5。因此，通过LAK细胞联合IL-2使用可促进NK细胞的细胞杀伤效应，治疗后CD+4和CD+4/CD+8的比值显著增高，从而有利于机体感染病毒的消除5，6和减少肝细胞的损害，提高ALT及TBIL的复常率。至于增大IL-2剂量能否提高HBVM的阴转率和加快肝功能的恢复以及远期疗效等问题有待于进一步研究。参考文献1国家“七五”肝炎攻关组.自体LAK细胞回输法治疗慢性乙型肝炎的临床试验.中华内科杂志，1991，30(1)：272中华传染病杂志编辑部.病毒性肝炎防治方案(试行).中华传染病杂志，1995，13(4)：2423成军，斯崇文，王勤环，等.人白细胞介素2基因表达载体的构建及抗乙肝病毒作用.肝脏病杂志，1995，3(2)：674范淳，刘林.慢性乙型肝炎患者杀