生化检测中的影响因素.ppt

生化检测中的影响因素 一 检测前因素二 检测中因素三 检测后因素 检测前的影响因素一 标本的因素1 生理因素对生化检验结果的影响影响检验结果的生理因素可分为可控因素和不可控因素两种类型 主要有年龄 性别 运动 情绪 体位改变 生活方式 妊娠 季节变化 海拔高度 生理性波动等 2 饮食对生化检验结果的影响 3 药物对生化检验结果的影响药物引起生化检验结果出现误差的原因可分为物理干扰和化学干扰 物理干扰是由于药物进入体内后使血清的物理性质如颜色等发生变化进而影响某些项目的检测 而化学干扰是由于药物本身的化学性质如药物的强还原性等对体内某些物质测定的影响 此外 许多药物的副作用使肝 肾功能发生改变而引起检验结果异常 值得注意的是长期静脉点滴的病人留取标本时可使标本稀释 造成某些项目结果偏低 又因静点时高浓度的药物进入标本中 使许多检验结果发生巨大变化 因此护理人员应避免在静点时和用药4h以内采取检验标本 必要时停药后再查 以防药物的干扰作用 4 标本采集对生化检验结果的影响5 标本处理 储存对生化检验结果的影响标本的离心速度 时间 离心前放置的时间 以及标本贮存的温度 时间等都会对生化检测结果产生影响 6 标本状态对生化检验结果的影响6 1溶血溶血是临床生化检验中最常见的一种影响因素 它能引起很多指标明显异常 溶血的干扰机理有以下三种 一是血细胞中高浓度组分逸出 使测定结果增高 血细胞内浓度比血浆中浓度明显高的物质有LDH ACP AST K 只要轻微溶血就可以对这些项目产生很大影响 另外若某些物质的血细胞内浓度低于血清浓度时 则溶血相当于血清被稀释 因而使这些血清成分特别是发生重度溶血时的检测值降低 这类项目主要有Ca2 Na Cl UA等 二是血细胞成分进入血清中后因化学反应而引起其他物质的浓度改变 如溶血后红细胞的磷脂进入血清被血清中的磷酸酯酶水解 其结果造成血清无机磷浓度显著增高 三是血红蛋白本身颜色对检测的光学干扰 血红蛋白的颜色在431nm和555nm波长附近能使比色 比浊法的吸光度增高 如溶血引起重氮单试剂法胆红素测定结果明显升高 实际上 以上三类干扰在溶血标本中同时存在并可相互作用 因而使受影响的检项更为复杂 这在超微量 高精度和多指标的检测分析中显然不可忽视 因此 严控标本溶血是保证检验质量的重要方面 2脂血对生化检测的干扰 血液脂浊可散射光线 所以对吸光度一般产生正向干扰 导致某些项目如ALB UA 总蛋白 TP 23 等测定结果 而在pH10以上的环境中 乳糜中的TG会皂化可使血清逐渐变清 使许多比色法测定如Ca2 Cr ALP TP等结果产生负误差 6 3黄疸胆红素对反应结果产生黄色化合物的比色分析影响很大 一般可以用样本空白或两点比色法 连续监测法来消除胆红素对黄色结果的影响 但由于胆红素不稳定 随着胆红素被氧化为胆绿素 胆褐素而变色 此时如果使用两点法 连续监测法同样也不能排除胆红素对结果的干扰 此外胆红素作为一种还原剂对氧化反应有干扰 如氧化酶法测定GLU TG UA 胆固醇等 因为胆红素可以与上述过程中H2O2分解产生的新生态氧发生反应 从而使新生态氧与氧化酶法反应中的色源物质结合减少 导致结果偏低 此时也可用双波长法或设计样本空白消除干扰 亦或当外观检查发现是黄疸血清时可先除蛋白 然后加胆红素氧化酶预先将胆红素氧化成较稳定的氧化产物胆褐素 可大大减低甚至消除胆红素的干扰 返回 二 环境的因素包括生化分析仪的用水 电源以及环境的温湿度等方面对生化检测的结果都会产生影响 分析中因素确立测定系统的概念测定系统包括测定原理 试剂 仪器 校准品四要素 对于一个临床检测项目 如果所用方法的测定原理 试剂 仪器 校准品中任何一个不同 都可能得到不同的测定结果 如果我们想要得到准确可靠的测定结果 而该结果又具有与国际 国内其他实验室的可比性 应该自己建立一个标准测定系统 生化分析仪的校准对测定标本的仪器一定要求进行校准 校准时要选择合适的 配套的 标准品 校准品 如有可能 校准品应能溯源到参考方法或 和参考物质 对不同的分析项目要根据其特性确立各自的校准频率 仪器的精密度检查仪器的维护保养 用已糖激酶 HK 法则定葡萄糖标准液时 葡萄糖的消耗与NADH的生成是等摩尔关系 校准生化分析仪340nm处NAD P H的摩尔吸光系数 可用ALP测定试剂的缓冲液作为测定试剂 对硝基苯酚标准液作为血清标本 实际测定405nm的吸光度值 根据对硝基苯酚的浓度可计算 值 检测方法的选择不同的检测方法对检测结果的影响是不言而预的 我们应优先选择国际 国内 行业内权威机构推荐的方法 没有推荐常规方法的 应该选择公认的测定方法 试剂的影响生化试剂盒有许多生产厂家 不同厂家产品的质量 技术含量等常有区别 有时即使同一厂家不同批号的同种试剂因原料来源 纯度不同以及生产条件变动 会产生批间变异 同一批号的同种试剂盒在储存 运输时的情况有所不同 性能也可能发生变化 同项目试剂盒之间作比较 如果稳定性好 线性范围宽 正向型试剂空白吸光度低 反向型试剂空白吸光度高 试剂空白速率低 瓶间差小者可视为优质试剂 校准品 Calibrationmaterials 含有已知量的欲测物 用以校准该测定方法的数值 它与该方法及试剂 仪器是相关联的 校准品的作用是为了减少或消除仪器 试剂等造成的系统误差 在全自动生化分析仪上使用配套的试剂和标准品 各仪器厂家均有自己的标准测定系统 对于校准品不能乱用 关于酶活性测定校准问题常用K值有以下几种 a 理论K值 根据理论摩尔消光系数 来计算 如NADH为6 22 103b 实测K值 由于仪器波长的精密及半宽度不同 而应根据实测 值来设定K值c 厂家给的K值 厂家生产试剂盒说明书上提供的K值 有的厂家提供6 3 103 d 校准K值 通过校准物直接校准得到的K值 从上述K值中不难发现实测K值大于理论K值 这说明生化分析仪的测光系统还存在着一定误差 如波长 半宽度及光径等偏差 使仪器达不到理论上的最佳状态 校准K值与实测K值之间也存在一定的差距 即使指示物和仪器相同 其差异可能由试剂及校准品造成的 校准K值应有其溯源性 试剂间的相互干扰全自动生化分析仪的吸样针 试剂针 搅拌捧及比色杯是常见交叉污染的原因 称互为干扰的项目为交叉污染对 测定试剂中含有下一测试所要测定的底物 直接干扰下一检测的测定结果 试剂中含有的某种试剂成分与下一反应所要测定的底物有作用 因而干扰下一反应的测定结果 该试剂中所引导的反应对下一个项目的反应进程带来间接的干扰 下一项目所测定的是前后两个项目反应的综合作用结果 项目参数的设置对结果的影响项目参数主要包括 标本用量 试剂的配比及用量 反应的温度 延迟时间 反应时间 监测的主波长 次波长 反应类型 监测的时间 空白吸光度 底物耗尽及前带现象的监测 额外的清洗 必须要针对不同类型的反应 不同试剂的性质设置合理的检测参数 分析后阶段目前大多数检验科室都实行了计算机网络管理技术 病人资料 检验数据网上共享 各实验室当天的测试结果通过联机即时传达电脑网络 这种模式提高了工作效率 也避免了以往由人为抄录结果时发生的误差 由于标本量大 影响因素多而复杂 加上审核人员的经验等原因的影响 生化检验的几种异常结果的分析1 体检标本中的Glu结果普遍偏低 2 体检标本中部分TG T CH结果偏低 3 CK MB大于CK 4 Mg TBA K等项目的结果在与其它一些项目在一起检测的结果与单独检测的结果差距较大 5 黄疸标本中的UA Cr Glu等结果偏低 6 溶血标本中的K LDH AST DBIL CRP等结果偏高 7 ALT检测中原倍结果远远大于标本稀释的检测结果 血清ALT测定 血清中的内源性丙酮酸及其它酮酸也可与试剂中的指示酶 乳酸脱氢酶 起反应 使结果偏高 若先加入缺乏 酮戊二酸的第一试剂 使其它酮酸与指示酶反应之后再加入含有 酮戊二酸的第二试剂 启动真正的ALT酶促反应生成丙酮酸 而丙酮酸与乳酸脱氢酶的反应消耗的NAD 能真正反映ALT的活性 从而消除以上副反应的影响 8 部分项目原倍的检测结果正常 稀释后的结果显著升高 9 部分免疫比浊法项目的检测结果小于 0 应对措施1 完善制度 认真实施完善的规章制度 规范的文件体系是全面质量管理体系必须具备的要素 根据实际情况 制定各级管理制度 如 标本查对制度 仪器校准 保养管理制度 试剂管理制度 各种实验的标准操作 SOP文件 新项目新方法的评价 质量控制操作程序 实验操作考核制度 差错登记 安全管理制度等等 各种制度紧密结合 始终贯穿检验分析前 分析中 分析后的全过程 2 加强与客户的沟通检验科与临床配合的好坏直接影响诊疗的质量 两者结合是提高临床诊治水平的重要环节 因分析前质量控制大部分是由临床完成的 这就要求检验科需加强与临床联系 对标本正确采集及影响测定的各种因素进行告知和培训 为临床正确分析结果提供参考意见 促进检验医学和谐发展 4 3做好临床常规生化的室内质量控制每日工作前 执行严格的校准程序 先测定质控血清以监测仪器的工作状态及试剂的质量 一旦发现失控 及时分析原因 采取措施 改善后方可进行当天标本的检测 在每批标本测定的同时 随机测定质控血清 以监控仪器测定的漂移 为保证检验质量 使用的质控血清统一向临床检验中心购买 使用质控品时 实验室要重复检测以决定每批质控品在本室的统计学参数 在报告检验结果前 质控品结果必须达到实验室设定的可接受标准 4 4积极参与各级临检中心的室间质控评比活动室间质控是实验室认可的重要依据 是保证实验室开展项目的基础 反映了实验室的准确度和可信度 临床常规生化室间质量评比活动是相互校正各参与实验室测定结果的准确性 并使各实验室之间的结果有可比性 减少实验室内的系统误差等 4 5危机值报告制度的建立与应用危急值是一组代表会危及患者生命的数据 应采取及时