纯化水检验操作规程.doc

题目：文 件 号SOP原文件号颁发部门：平邑县中医医院中药制剂室生效日期2012年1月1日复印份数：3页码第 5 页 共 5 页纯化水检测标准及方法1、目的控制纯化水的质量，从而控制产品清洗的效果和实验结果的准确。2、范围本标准适用于纯化水的检测。3、制定依据中国药典2010版（二部） 医疗器械工艺用水检查要点指南（2010版）中国药品检验标准操作规范 2010年版4、环境要求及取样频率全性能检测包括化学和微生物两部分。其中化学检测在理化检测室进行，微生物在微生物限度室10000级下的局部百级超净台内进行。实验器材比色管，刻度吸管，容量瓶，量筒，锥形瓶，试管，砂芯过滤装置+真空泵，水浴锅，搪瓷蒸发皿，干燥器，分析天平，滤膜（孔径不大于0.45m，直径为50mm），恒温培养箱等试液、溶液剂、指示液、缓冲液和滴定液的制备 甲基红指示液：取甲基红0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液7.4ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。变色范围：pH4.26.3（红黄）。 溴麝香草酚兰指示液：取溴麝香草酚兰0.1g, 加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.2mL使溶解,再加水稀释至200mL，即得。变色范围：pH6.07.6（黄兰） 10%氯化钾溶液：取氯化钾10g，加水使溶解成100mL即得。 二苯胺硫酸溶液：取二苯胺0.1g，加浓硫酸使溶解成100mL即得。 高锰酸钾试液：可取用高锰酸钾滴定液0.02mol/L。 对氨基苯磺酰胺的稀盐酸溶液（1100）：取对氨基苯磺酰胺1g，加稀盐酸100mL溶解，即得。 稀盐酸：取234mL盐酸，加水稀释成1000mL。 盐酸萘乙二胺溶液（0.1100）：取盐酸萘乙二胺0.1g，加水使溶解成100mL即得。 无亚硝酸盐的水：同无氨水。检查：取本品照纯化水项下亚硝酸盐检查，不得显色。 无氨水：取纯化水1000ml，加稀硫酸1ml与高锰酸钾试液1ml，蒸馏，即得。检查：取无氨水50ml，加碱性碘化汞钾试液1ml，不得显色。 碱性碘化汞钾试液：外购试剂，不能自己配制。 氯化铵溶液：取氯化铵31.5mg，加无氨水适量，使溶解并稀释成1000mL即得。 高锰酸钾滴定液0.02mol/L：取高锰酸钾3.2g，加水1000ml，煮沸15分钟，密塞，静置2日以上，用垂熔玻璃滤器滤过，摇匀。 醋酸盐缓冲液(pH3.5)：取醋酸铵25g，加水25mL溶解后，加7mol/L的盐酸溶液38mL，用2mol/L的盐酸溶液或5mol/L的氨溶液准确调节pH值至3.5（电位法指示），用水稀释至100mL，即得。 硫代乙酰胺试液：取硫代乙酰胺4g，加水使溶解成100mL，置冰箱中保存，临用前取混合液由1mol/L氢氧化钠液15mL、水5.0mL及甘油20mL组成5.0mL，加上述硫代乙酰胺溶液1.0mL，置水浴上加热20秒钟，冷却，立即使用。 标准铅溶液：称取硝酸铅0.1599g，置1000ml量瓶中，加硝酸5ml与水50ml溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。精密量取贮备液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml相当于10g的Pb）。本液仅供当日使用。 标准硝酸盐溶液：取硝酸钾0.163g，加水溶解并稀释至100ml，摇匀，精密量取1ml，加水稀释成100ml，再精密量取10ml，加水稀释成100ml，摇匀，即得(每1ml相当于1gNO32-) 标准亚硝酸盐溶液：取亚硝酸钠0.750g(按干燥品计算)，加水溶解，稀释至100ml，摇匀，精密量取1ml，加水稀释成100ml，摇匀，再精密量取1ml，加水稀释成50ml，摇匀，即得(每1ml相当于1gNO22-) pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液：取磷酸二氢钾3.56克，磷酸氢二纳7.23克，氯化钠4.30克，蛋白胨1.0克，加水1000ml,微温溶解，过滤。分装，灭菌。7、要求及试验方法实验前检查所有器具是否在检定/校准有效期内，检查试剂及制备好的溶液、试液、滴定液、指示液是否有效或在规定的效期内。计数用的培养基应进行过培养基的适用性检查。7.1性状：本品为无色的澄清液体；无臭，无味。7.2酸碱度：取本品10ml，加甲基红指示液2滴，不得显红色；另取10ml，加溴麝香草酚蓝指示液5滴，不得显蓝色。7.3硝酸盐：取本品5ml置试管中，于冰浴中冷却，加10氯化钾溶液0.4ml与0.1二苯胺硫酸溶液0.1ml，摇匀，缓缓滴加硫酸5ml，摇匀，将试管于50水浴中放置15分钟，溶液产生的蓝色与标准硝酸盐溶液0.3ml，加无硝酸盐的水4.7ml，用同一方法处理后的颜色比较，不得更深(0.000 006)。7.4亚硝酸盐：取本品10ml，置纳氏管中，加对氨基苯磺酰胺的稀盐酸溶液(1100)1ml及盐酸萘乙二胺溶液(0.1100)1ml，产生的粉红色，与标准亚硝酸盐溶液0.2ml，加无亚硝酸盐的水9.8ml，用同一方法处理后的颜色比较，不得更深（0.0000 02)。7.5氨：取本品50ml，加碱性碘化汞钾试液2ml，放置15分钟；如显色，与氯化铵溶液1.5ml，加无氨水48ml与碱性碘化汞钾试液2ml制成的对照液比较，不得更深(0.000 03)。7.6电导率:按照电导率仪操作规程操作电导率合格标准：应符合规定（详见本方法附录一）。7.7易氧化物: 取本品100ml，加稀硫酸10ml，煮沸后加高锰酸钾滴定液(0.02mol/L) 0.10ml，再煮沸10分钟，粉红色不得完全消失。7.8不挥发物：取本品100ml，置105恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干，并在105干燥至恒重，遗留残渣不得过1mg。蒸发皿使用前用蒸馏水清洗干净。干燥，称重方法：将蒸发皿洗干净，放在105+2的烘箱中烘干2小时，放在干燥器内冷却至室温称重，再次烘干，冷却，再称量，直至恒重（每次烘干时间不少于1小时，连续两次称量的重量差不超过0.3mg视为恒重），放在干燥器内备用。注意事项：称量过程中不得用手接触蒸发皿，整个过程要用洁净的镊子夹取； 称量蒸发皿时，要求精确到0.0001g。7.9 重金属重金属限量为0.1ppm7.9 .1供试液制备取样品100ml两份于两个干净小烧杯中，分别再加水10ml，置万用炉上微沸蒸发至约10ml，冷却至室温，分别加水稀释至20ml。7.9 .2操作方法取三支25ml纳氏比色管编号为甲、乙、丙1。甲管中加入1.0ml铅溶液(10.0g/g)和19ml水；乙管、丙管分别加入20ml供试液，另取1.0ml铅溶液(10.0g/g)加入丙管；于上述三管中分别加入醋酸盐缓冲液（pH3.5）2.0ml，再分别加水稀释至25ml。在甲、乙、丙三管中分别加硫代乙酰胺试液2ml，摇匀，放置2分钟后观察。7.9 .3观察方法和结果判定标准将三管同置白纸上观察，当丙管颜色不浅于甲管时，乙管显色不得比甲管更深。若丙管颜色明显深于甲管时说明实验不准确，应分析原因，重新检测。 注【1】：丙管一般可以不做，但如果实验操作不熟练，或更换实验用试剂时，可做丙管为对照，以增加实验的可靠性。7.10微生物限度：依7.12检测，细菌、霉菌和酵母菌总数每1ml不得过100个。7.11 微生物限度检验方法薄膜过滤法7.11.1实验前准备灭菌：实验过程中与供试品接触的所有器具必须采用可靠方法灭菌。置高压蒸汽灭菌器121 30分钟湿热灭菌或置电热干燥箱160 2h干热灭菌。消毒：凡检验过程中器材无法进行灭菌处理的，使用前需进行消毒处理。如工作台面、试管架等要用规定的消毒剂浸泡或擦拭。消毒剂应交替使用，以防产生耐药菌株。7.11.2 供试品制备本实验中的供试品为纯化水，无抑菌活性，不需要计数方法的验证。每个取样点取样品50mL作为供试液。7.11.3薄膜过滤7.11.3.1取1ml上述供试液,过滤。过滤时，注意尽量保持供试液均匀覆盖整个滤膜表面，照此法每个供试液制备4张滤膜。7.11.3.2过滤后取出滤膜，菌面朝上贴于营养琼脂培养基或玫瑰红钠琼脂培养基平板上培养，每种培养基接种2张滤膜作为平行样。7.11.4阴性对照试验另取两张滤膜，分别直接接种于两种培养基上，作阴性对照。阴性对照不得有菌生长，否则实验无效。7.11.5培养和计数7.11.5.1方法营养琼脂培养基用于细菌计数；玫瑰红钠琼脂培养基用于霉菌和酵母菌计数；细菌培养3天，霉菌、酵母菌培养5天，逐日观察菌落生长情况，点计菌落数，必要时，可适当延长培养时间至7天进行菌落计数并报告。菌落蔓延生长成片的平板不宜计数。计数后，计算两种培养基的平均菌落数，并求和，做为实验结果。7.11.5.2注意事项在特殊情况下，若营养琼脂培养基上长有霉菌和酵母菌、玫瑰红钠琼脂培养基上长有细菌，则应分别点计霉菌和酵母菌、细菌菌落数。然后将营养琼脂培养基上的霉菌和酵母菌数或玫瑰红钠琼脂培养基上的细菌数，与玫瑰红钠琼脂培养基中的霉菌和酵母菌数或营养琼脂培养基中的细菌数进行比较，以菌落数高的培养基中的菌落为计数结果。两种培养基上的平均菌落总数数不超过10