乙型肝炎病毒血清标志物与HBV-DNA含量间的关系探讨.pdf

论 著 乙型肝炎病毒血清标志物与HBV DNA 含量间的关系探讨 彭树道 李明 胡国良 广东省佛山三水区人民医院 广东 佛山 528100 摘要 目的 探讨乙型肝炎病毒血清标志物与HBV DNA含量间的关系 为临床的诊断 治疗 预防提供参 考 方法 运用酶联免疫吸附法及实时荧光定量PCR检测患者的乙肝六标及HBV DNA含量 用统计学方法对 本院及国内近五年医学期刊的相关报导的资料进行汇总 分析 结果 检测的775名患者中有331人为大三阳 9215 检出HBV DNA 含量为7149 1112 HBcAb检出率95123 HBsAg85194 几乎血清标志物的各种组合均 有HBV DNA检出 结论 血清学标志物检测为大三阳 基本可以确定有HBV复制 对于献血员筛选 有条 件的地区最好同时进行乙肝两对半及HBV DNA检测 对于HBV感染者的复诊 尤其是为了观察药物疗效的 患者 只需进行HBV DNA检测 关键词 乙型肝炎病毒 血清标志物 聚合酶链反应 中图分类号 R512162 文献标识码 A 文章编号 1672 0369 2003 10 0581 03 Exploring the relation between the HBV serum marker and the quantity of HBV DNA PENG Shu2dao LI Ming HU Guo2liang The People s hospital in district sanshui Fushan Guangdong 528100 China Abstract Objective To explore the relation between the HBV serum markers and the quantity of HBV DNA to support re2 frence for clinical diagnosis cure and prediction Method use Elisa and real time fluorescent quanting PCR to detect HBV marker 6 and quatity of HBV DNA use statistics means to collect and analyze concerned report s data of domestic medical journal in recent 5 years1Results Among 775 patients detected there are 331 who were detected out HBsAg HBcAb HBeAg 9215 were detected out HBV DNA quatity is 7149 112 HBcAb detecting out rate 95123 HBsAg 85194 almost every kind of composition of serum marker were accompanying with HBV DNA Conclusion Serum marker detect result is HBsAg HBeAg HBcAb positive1Almost ensure that there is HBV complication To choose blood supplyer the conditioned place should detect HBsAg HBsAb HBeAg HBeAb MBcAb and HBV DNA at same time Diagnose the HBV infective patient again especially observing the patient s cure effect only need to detect HBV DNA1 Key Words HBV Serum marker PCR 收稿日期2003 07 25 基金项目2003年度佛山市卫生局医学科研立项课题 佛 卫2003 243号 自上世纪六十年代发现乙型肝炎以来 肝炎的 检测方法已从当初的生化检测 免疫学检测向基因 检测方向发展 随着对肝炎研究的不断深入 治疗方 案的改变 新药的应用 乙肝各项检测结果的格局也 会有一些新的变化 按照现代循证医学的方法观点 我们既要对新的检测方法进行比较分析 也有必要 对已有检测方法进行重新评估 1 以下是我们对 2002年7月至2003年6月来我院同步进行乙肝六 标及HBV DNA含量检测的775名患者检测结果 的统计分析 以及近五年国内医学期刊乙型肝炎病 毒血清标志物和HBV DNA相关报导的资料汇 总 现报告如下 1 材料和方法 111 材料 11111 标本来源 2002年7月至2003年6月间 同步进行乙肝六标及HBV DNA含量检测的775 名我院门诊和住院病人 11112 试剂 乙肝六标 HBsAg HBsAb HBeAg HBeAb HBcAb HBcIgM 检测使用上海荣盛科技有 限公司提供的ELISA检测试剂合 HBV DNA含 量检测使用中山大学达安基因股份有限公司提供的 乙型肝炎核酸扩增荧光检测试剂合 11113 仪器 ELISA检测使用Biocellht3洗板机 洗板 Biocellht3酶标仪测定结果 HBV DNA检测 185 2003年10月 第15卷 第10期 中国民康医学杂志 Medical Journal of Chinese People Health Oct 2003 Vol115 No110 使用PE5700荧光定量PCR检测仪 11114 资料来源 均取自近五年国内公开发行的 医学期刊 如 中华检验医学杂志 临床检验杂 志 中华肝脏病杂志 等杂志 在查阅的乙肝病毒 血清标志物和HBV DNA相关文章中 选取资料 分类相近的6篇 进行资料汇总 112 方法 11211 实验方法 乙肝六标 HBsAg HBsAb HBeAg HBeAb HBcAb HBcIgM 检测采用酶联免 疫吸附方法 ELISA HBV DNA含量检测采用实 时荧光定量PCR方法 11212 统计方法 数据处理采用Microsoft Ex2 cel2002 运用 2 检验及Fisher确切概率法进行显著 性差异检验 2 2 结 果 211 775例乙型肝炎病毒血清标志物各种模式构 成及HBV DNA阳性数和含量见表1 HBV DNA含量测定范围为1 103 115 109 212乙型肝炎病毒各血清标志物HBV DNA阳性 数和含量见表2 213 国内医学期刊6篇乙型肝炎病毒血清标志物 和HBV DNA相关报导同我院的资料汇总见表3 表1 775例各血清学模式构成及HBV DNA阳性数和含量 HBsAgHBsAbHBeAgHBeAbHBcAbHBcIgM例数DNADNA LogNDA 25023092107141 1112 817693187172 1113 2098339175151 1116 61914185151 1155 331957166131 112 301343135108 1105 100100175 48241281501 0113 2015105120 130010 1516175190 合 计775436 注 DNA为HBV DNA测定阳性例数 DNA 为HBV DNA测定阳性数占相同模式的百分率 LogDNA为HBV DNA拷贝数的对数平均值X 2SD 表2 各项血清学标志物HBV DNA阳性数 含量及相关度 阳性标志物例数分类 DNADNA LogDNA相关度 HBsAg6668519443064166194 1144HBcAb9917 HBsAb811014556127162 1143HBsAg HBeAg HBcIgM99 HBeAg3314217130692147149 1113HBsAg HBcAb100 HBeAb284361659433115156 1123HBsAg HBcAb 95 HBcAb7389512343458186195 1144HBsAg HBcIgM9918 HBcIgM4936316133267136187 1140 表3 6篇乙型肝炎病毒血清标志物和HBV DNA相关报导同我院的资料汇总 标本 来源 大三阳 阳性率总例数logDNA 小三阳 阳性率总例数logDNA 双 阳 阳性率总例数logDNA 温州3 1001286189 11695512964109 11196014484125 1135 广州4 10015881047215985193651632519 重庆5 1003981236718596190311822518 郑州6 9712488113 11413016364121 0198 杭州7 10076165503251647010515 南京8 10098144 017296265199 11581008518 1152 本院92143317149 111334112705151 11195018635181 1128 汇总96147227159491526225154561831835137 注 表中 总例数 为DNA检测例数 阳性率 为DNA阳性占 总例数 的百分率 3 讨论 从表1中 我 们 可 以 看 到 大 三 阳 HBsAg HBeAg HBcAb 双阳 HBsAg HBcAb 及小三阳 HBsAg HBeAb HBcAb 患者的HBV DNA阳性 率分别达92 50 33 与有关报导基本相 似 3 5 HBV DNA平均含量分别为715 516 285 2003年10月 第15卷 第10期 中国民康医学杂志 Medical Journal of Chinese People Health Oct 2003 Vol115 No110 515 反应出HBV复制活跃程度依次递减 大三阳 不论HBcIgM阴性 阳性 HBV DNA阳性率均基 本相同 01011 P 0105 而小三阳则有较大 差异 2 7122 P HB2 sAg8519 且DNA检出率 DNA 与DNA含量 不成正比 不论是表1还是表2 其机理有待于进一 步研究 另外 我们对各血清学标志物间的相关度进行 了计算 各血清学标志物之间及和某些组合间的相 关度相当高 如HBeAg阳性 则HBsAg与HBcAb 均100 阳性 HBsAb阳性 则HBsAg HBeAg HB2 cAbIgM皆99 阴性 还有HBsAg对HBcAb HBeAb对HBsAg 及HBcAb HBcAb对 HBsAg 和HBcIgM 均有95 以上的相关 度 对探讨发病机理及解释检验结果均有帮助 在表3中 除大三阳外 小三阳及双阳的DNA 阳性比例均有较大差异 20 经Fisher确切概 率法计算 大三阳的DNA定量各组间P 0105 无 显著性差异 小三阳及双阳的各组均有显著性差异 2 检验 这可能与PCR试剂的引物序列差异导 致灵敏度高低不同相关 希望国家有关部门尽快统 一试剂标准 提高各地检测结果的可比性 通过以上比较分析 我们初步可以得出以下结 论 对于诊断而言 如果血清学标志物检测为大 三阳 基本可以确定有HBV复制 可以不进行DNA 检测 由于HBcAb阳性率大于HBsAg 可提部分既 往感染的患者 因此对于献血员筛选 有条件的地区 最好同时进行乙肝两对半及HBV DNA检测 至 少应加测HBcAb 这样既能发现HBV感染窗口 期 又能避免某些HBV低水平复制的DNA漏检 以便最大限度地减少输血后肝炎的发生 对于HBV感染者的复诊 尤其是为了观察 药物疗效的患者 只需进行HBV DNA检测 因为 大量的资料显示 此时血清学标志物的各种模式均 有HBV DNA检出 血清学标志物的检测不能确 定HBV有无复制 随着检测试剂质量的提高 操作者技术的熟练 以及新药的应用和治疗方案的改变 乙肝各血清学 标志物检测结果的格局也会有一些变化 本文统计 的775例中 某些血清学标志物的阳性组合 如HB2 sAg同HBeAg及HBsAg同HBeAb 就未出现 与某 些文献报导不尽相同 3 4 有待于在今后工作中进 一步观察 参考文献 1赵旺胜 童明庆 1 循证医学及其在医学检验中的应用J1 临床 检验杂志 2003 21 511 2孙持球 1 医学统计学M1 北京 人民卫生出版社 200211071 3陶志华 等 1 乙型肝炎病毒DNA荧光定量PCR的建立与应用 J1 临床检验杂志 2002 20 2821 4程 钢 何蕴韶 周新宇 1 荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎 病毒J1 中华检验医学杂志 1999 22 1351 5何云燕 1 复合探针PCR定量检测HBV方法的建立及临床用 J 中华肝胆杂志 2001 9 3761 6王山梅 孙长义 1HBV M贮量检测与HBV DNA含量水平关 系的初步探讨J1 河南职工医学院学报 2002 14 1291 7沈宏伟 1 荧光定量PCR和ELISA检测外科病人HBV标志物结 果的比较J1 临床检验杂志 2002 20 3071 8 君 1 乙肝患者血清中HBV DNA含量的测定及其意义J1 临 床检验杂志 2000 18 2971 下接第617页 12陈军 陈覃 司宪平 等 1 超选择动脉溶栓及经皮腔内血管成型 术治疗脑梗死J1 中华急