四川大学现代生命科学基础实验报告.doc

四川大学实验报告专 业 计算机科学与技术 姓 名 夏超 2011级 1 班 组同实验者 无 2012年10月13日题目： 光学显微镜的使用实验步骤：1. 观察前，将显微镜放在自己身体的左前方，目镜与实验桌侧面在一条水平面上。然后插上电源线，代开电源开关。2. 调节光圈：通过调节电流旋钮来调节光照强度，并且物镜的放大倍数应该与光圈的倍数相同。3. 低倍镜观察：在使用高倍镜之前，先用低倍镜找到目标位置。将牛蛙血细胞玻片标本正面朝上放在镜台上，用推片器弹簧夹夹住，然后旋转推片器螺旋，将所要观察的部位调到通光孔的正中。以左手按逆时针方向转动粗调节器，使镜台缓慢上升至物镜据标本5mm处。然后，两眼同时睁开，在目镜上观察，左手顺时针方向缓慢转动粗调节器，直到视野中出现清晰地物象为止。如果物象不在视野中心，可调节推片器将其调到中心。如果视野亮度不合适，可通过升降集光器的位置或开闭光圈的大小来调节。4. 高倍镜观察：在低倍镜下把需要进一步观察的部位调到中心，同时把物象调节到最清晰的程度，才能进行高倍镜观察。转动转换器，调换上高倍镜头，转换高倍镜时转动速度要慢，并从侧面进行观察，如高倍镜碰到玻片，说明低倍镜的焦距没有调好，应重新操作。调节焦距：转换好高倍镜后，用左眼在目镜上观察，此时一般能够见到一个不太清楚的物象，可将细调节器的螺旋逆时针移动约0.5-1圈，即可获得清晰地物象。如果视野亮度不合适，可通过升降集光器的位置或开闭光圈的大小来调节。如果需要更换玻片标本时，必须顺时针转动粗调节器使镜台下降，方可取下玻片标本。5. 使用完毕后，必须复原：取消玻片标本，转动旋转器使镜头离开通光孔，下降镜台，平放反光镜，下降集光器，关闭光圈，推片器回位，关掉电源开关，拔下电源线，盖上外罩，将显微镜放回原位。四川大学实验报告专 业 计算机科学与技术 姓 名 夏超 2011级 1 班 组同实验者 无 2012年10月13日题目： 人类ABO血型鉴定实验步骤：1. 取清洁载玻片一张，用蜡笔划为两格，表明A、B。2. 将抗A、抗B血清各一滴滴在A、B格内。3. 待检红细胞的制备：用75%酒精棉球消毒无名指指端的皮肤或指腹，待酒精干后，用无菌采血针刺破表皮。4. 用两只牙签分别在手指上蘸取一些血液，分别加到抗A、抗B格内，并用牙签混匀，使血清和细胞充分混合。在室温下静止数分钟，在白色背景下肉眼观察，也可以显微观察。实验结果：抗A血清发生凝集，抗B血清没有发生凝集。实验结论：我是A型血。问题与讨论：1. 根据你的血型，判断你能接受何种血型并且能够给何种血型供血？我是A型血，我的最佳受血是A型血，也可以接受O型血。我只能给A型血供血。2. O型血人又被称为“万能供血者”，试根据ABO血型分型做出你对这一说法的理解。O型血中红细胞膜上没有A和B抗原，血清中同时存在抗A抗B抗体。具有A抗原的红细胞可被抗A抗体凝集；具有B抗原的红细胞可被抗B抗体凝集输O型血时，因为O型血中红细胞膜上没有A和B抗原，不会和血清中的抗A、抗B抗体发生凝集现象，所以，O型血是万能血。3. 如何区别血液的凝集和凝固？其机理有何差别？血液的凝集：在一定条件下，悬浮的红细胞集合成团，这种现象叫做凝集。血液凝集是一种血清免疫反应，当含有某一种凝集原的红细胞和抗该凝集原的凝集素相遇时，就会发生血液凝集现象。 血液凝固是血液从溶胶状态变成凝胶状态的过程。 血液凝集反应 当人体有些异型血液相遇时，一方血液中的血清凝聚素会导致另一方血液中血细胞表面相应的凝聚原发生免疫反应，在显微镜下可以看到，血液中的血细胞会发生相互粘连成团的现象。血液凝集反应是不同血型的血液相遇时可能发生的血清免疫反应，而血液凝固是一个人的血液在自己血液中的凝血因子作用下发生的酶促反应。四川大学实验报告专 业 计算机科学与技术 姓 名 夏超 2011级 1 班 组同实验者 无 2012年10月13日题目： 血涂片的制备与血细胞的观察实验步骤：1. 采血前用70%酒精棉球消毒人的指腹（由于第一滴血中含单核白细胞较多，因此弃去第一滴血）。2. 推片：挤出第二滴血置于载玻片的右侧。3. 再另取一张边缘光滑的双凹片，斜置于血滴的前缘，先向后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿玻片端展开成线状。4. 两玻片的角度仪3045为宜，轻轻将双凹片向前匀速推进，即涂成血液薄膜。5. 染色：待涂片在空气中完全干燥后，滴加数滴Wrights染液盖满血膜位置，染色13min。然后滴加等量蒸馏水，使其与染液均与混合，静止1015min。用蒸馏水冲去染液，吸水纸吸干，镜检。问题与讨论：1. 血细胞由红细胞、白细胞、血小板等组成，每种细胞有什么特点和作用？红细胞：中心部凹陷的圆板状。哺乳动物成熟的红细胞无核结构，鸟类动物 的红细胞呈椭圆形，有核，中心部向两面突出。在体内作为运送氧 气的主要媒介，携氧排碳。白细胞：无色呈球形凸起，有细胞核，体积比红细胞大。可根据其形态差异 和细胞质内有无特有的颗粒分为两大类五种。吞噬血液中细菌保护 机体不受外邪侵害。在体内作为免疫系统的一部分帮助身体抵抗传 染病及外来的东西，是血液中一种重要的血细胞。血小板：形状不规则，比红细胞白细胞小得多，无细胞核，一般呈圆形。释 放凝血因子防止出血。在止血、伤口愈合、炎症反应、血栓形成及 器官排斥等生理和病理过程中有重要作用。四川大学实验报告专 业 计算机科学与技术 姓 名 夏超 2011级 1 班 组同实验者 无 2012年10月27日题目： 人类巴氏小体的观察实验步骤：口腔粘膜细胞Barr氏小体显示方法：（1） 取材与固定：实验前用可食用水漱口，然后以无菌牙签刮取口腔颊部粘膜（第一次的刮取物弃去），将刮取物均与涂于载玻片上，放在空气中干燥。或以酒精灯外焰烤干，注意材料不可过热加温。（2） 染色与观察：用改良苯酚品红染液染色1015min，倾斜载玻片，倒掉染液。用吸水纸轻轻擦拭干载玻片上面的染液。放在显微镜下观察。注意事项：在制作的玻片标本中，选择细胞轮廓清楚、染色清晰，核大，核质呈均匀细网状的细胞100个，统计巴氏小体的频率（可与男性细胞对照观察）。实验结果：我的细胞中没有找到巴氏小体。实验结论：正常男性细胞中没有巴氏小体，正常女性细胞中有巴氏小体。问题与讨论：1.血分别观察男女各50个可数细胞，计算现实X染色质所占百分比。X染色质所占百分比：男：0/50=0%。 女：20/50=40%。四川大学实验报告专 业 计算机科学与技术 姓 名 夏超 2011级 1 班 组同实验者 无 2012年11月3日题目： PCR扩增与人性别分子鉴定实验步骤：1. PCR反应液的配制：于冰上在200l薄壁离心管中加入ddH2O 35.5l、10xPCR反应缓冲液5l、MgCl2 4l、dNTP 1l、引物P1和引物P2各1l、模板DNA2l、TaqDNA聚合酶0.5l，混合均匀。2. PCR反应：将配制好的反应液放到PCR热循环仪中，按以下反应程序进行PCR反应：953min、9430s、5530s、721min循环30次，72延伸7min。3. 配制1%琼脂糖凝胶：取3g琼脂粉和30ml水，混合均匀，加入缓冲液，在微波炉中用中火加热（不能烧糊）。，4. 电泳检测：反应结束后取出PCR产物，取5l样品在1%琼脂糖凝胶中进行电泳分析（电压100V，时间30min），然后将凝胶转到紫外成像系统中显影，参照DNA分子量标准，观察在500bp出有无单一的亮带。实验结果：待测基因中含有SRY基因。实验结论：正常男性细胞中有SRY基因，正常女性细胞中没有SRY基因。问题与讨论：1.若凝胶成像是没有观察到理想的实验结果，回顾整个操作过程，分析造成PCR失败的可能原因是什么。可能原因有：配制缓冲液时没有在冰上进行配制的缓冲液的浓度不合适、培 养液受到污染、PCR热循环仪设置不当、电泳时间不够等等。四川大学实验报告专 业 计算机科学与技术 姓 名 夏超 2011级 1 班 组同实验者 无 2012年11月10日题目： 叶脉书签的制作实验步骤：1. 选择合适制作叶脉书签的树叶首先要求选用的树叶叶脉发达。不容易在随后的碱处理和冲刷叶肉的过程中损伤；其次是要求叶肉碱液处理后容易除去，这就要求叶片较嫩；再就是依据个人习惯，选择形状、大小适合的叶片。2. 用碱液处理叶片，使叶肉与叶脉分离配制大约4%的NaOH溶液500ml，将叶片浸没与溶液中，煮15分钟左右。此时可见叶肉开始脱落，溶液逐渐变成墨绿色。取出叶片，用流水冲洗，若叶肉随流水冲洗面大块脱落，则表明处理完全。若碱液处理时间太短，也容易不易除去，而处理时间过长，则叶脉易受损伤。3. 刷去叶肉组织在流水冲刷下，叶肉已经大量脱落。此时用牙刷顺着叶脉轻刷，把叶肉完全刷去。此时要小心不要损伤叶脉，影响成品的美观。要注意NaOH有一定的腐蚀性！要用流水冲洗彻底，除去叶脉上的残留碱液。4. 染色配制各种染色液：品红红色，品绿绿色，品蓝蓝色。将叶脉浸入染色液中侵染20分钟，也可用毛笔蘸取染液在叶脉上绘图。将染色结束的叶脉晾干，或者夹在吸水纸中以吸去水分。将处理好的叶脉放于过塑膜中过塑，也可夹入松针、小花