血液一般检验ppt课件.ppt

第二章血液一般检验 1 血液一般检验是指血液检验项目中最基础及最常用的检验 主要包括 手工或仪器血细胞计数及相关参数测定 血细胞形态学检查 止血凝血筛检试验 血型及交叉配血等 由于血液一般检验标本采集容易 检测便捷 目前仍然是筛检疾病的首要项目 2 第一节红细胞检查 红细胞是血液中数量最多的有形成分 其主要功能是作为携氧或二氧化碳的呼吸载体和维持酸碱平衡等 可通过检测红细胞参数和形态变化对某些疾病进行诊断或鉴别诊断 3 一 红细胞计数 常作为诊断贫血及红细胞增多的主要指标 检测原理 1 显微镜法用等渗稀释液将血液稀释一定倍数 200倍 充入改良牛鲍血细胞计数板中 在显微镜下计数一定区域内的红细胞数量 经换算求出每升血液中的红细胞数量 2 血液分析仪法电阻抗法 流式细胞法 4 方法学评价 5 常用 好 6 质量保证 误差来源 技术误差 仪器误差 分布误差 7 参考区间 成年 男性 4 0 5 5 1012 L女性 3 5 5 0 1012 L新生儿 6 0 7 0 1012 L医学决定水平 高于6 8 1012 L 应采取相应治疗措施 低于3 5 1012 L可诊断贫血 低于1 5 1012 L应考虑输血 8 临床意义 1 生理性变化增多 新生儿 高原居民 剧烈运动等 成年男性高于女性 静脉压迫时间 2min 毛细血管血高于静脉血测定 早7时最高 减少 生理性贫血 如 造血原料相对不足 造血功能减退 血容量增加等 9 2 病理性变化增多 1 相对增多 血容量减少如 呕吐 高热 腹泻等2 绝对增多 继发性 组织缺氧 EPO代偿性增高如 严重慢性心肺疾病EPO非代偿性增高如 肝 肾的癌症原发性 如真性红细胞增多症 10 减少 见于各种贫血 主要分为3类1 RBC生成减少骨髓功能衰竭 如再障 造血物质缺乏或利用障碍 如肾性贫血 缺铁性贫血 铁幼粒细胞性贫血 巨幼细胞性贫血 11 2 RBC破坏过多 RBC内在缺陷 膜缺陷 如遗传性异常RBC增多症酶缺陷 如遗传性G 6 PD缺乏症 蚕豆病 血红蛋白异常 如珠蛋白生成障碍性贫血 红细胞外在异常 免疫反应引起的贫血 如新生儿溶血 血型不合输血后溶血等机械性损伤 如行军性血红蛋白尿疾病所致溶血 如疟疾 细菌等所致溶血性贫血 12 3 红细胞丢失 急 慢性失血性贫血此外 某些药物也可引发贫血 13 二 血红蛋白测定 缩写 Hb或HGB功能 输送氧 二氧化碳理化性质 含铁 0 347gFe 100gHb相对分子量64458每克Hb可携带1 34ml氧 14 由四条珠蛋白肽链 2条 链 2条 链 和四分子亚铁血红素组成的具有四级空间结构的四聚体 可结合4分子的氧 还原血红蛋白 Fe2 99 高铁血红蛋白 Hi 1 氧合血红蛋白 HbO2 碳氧血红蛋白 HbCO COHb 硫化血红蛋白 SHb 15 检测原理 HiCN法 氰化高铁血红蛋白法在溶血标本中 Hb中的Fe2 被高铁氰化钾氧化为Fe3 Hb转化为Hi Hi与KCN中的氰离子反应生成HiCN 在540nm处的吸光度与溶液中的浓度呈正比 根据测得吸光度可求得Hb的浓度 WHO和ICSH推荐的参考方法 16 方法学评价 17 18 质量保证 1 标本2 器材及试剂3 技术操作4 废弃物 参考区间 成年 男性120 160g L女性110 150g L新生儿 170 200g L 19 临床意义 基本等同于RBC 在判断贫血程度方面优于RBC 轻度贫血 Hb 120g L 女性Hb 110g L 中度贫血 Hb 90g L 重度贫血 Hb 60g L 极重度贫血 Hb 30g L 当RBC 1 5 1012 L Hb 45g L时 应考虑输血 注意 1 某些贫血RBC和Hb减少程度不一致 应同时测定2 影响检验结果的因素 20 三 红细胞形态检查 检测原理及方法学评价 21 质量保证 22 23 24 临床意义 1 正常红细胞形态双凹圆盘形 大小相对均一 平均直径7 2 m 6 7 7 7 m 瑞氏染色呈粉红色或琥珀色 血红蛋白充盈良好 呈正常色素性 向心性淡染 中央为生理性淡染区 约为细胞直径的1 3 胞质内无异常结构 25 注意 正常RBC可自然退化变性 即使高质量的正常人血涂片 也可见到变形或破碎的红细胞 但数量很少 分布局限 26 2 异常红细胞形态在排除人为因素后 若血涂片中出现异常形态红细胞且数量较多 往往提示病理性改变 常见的异常形态可分为红细胞大小 形态 血红蛋白含量 结构和排列异常 27 小红细胞 淡染区消失的小红细胞 球形红细胞 28 红细胞大小不均 巨红细胞 29 球形红细胞 30 Hb按结构分类 血红蛋白A HbA 2 2 占成人Hb的98 血红蛋白A2 HbA2 2 2 占成人Hb的2 血红蛋白F HbF 2 2 仅存在于胎儿血中 血红蛋白H HbH 4 血红蛋白H病 血红蛋白C HbC 链中Glu被Lys取代 血红蛋白S HbS 链中Glu被Val取代 镰形红细胞血红蛋白 31 假性椭圆形红细胞 椭圆形红细胞 32 靶形红细胞 口形红细胞 33 镰形红细胞 34 棘红细胞 锯齿状红细胞 35 泪滴形红细胞 红细胞形态不整 36 正常 低 高色素性红细胞 37 嗜多色性红细胞 38 豪 焦小体 Howell JollyBody 染色质小体 39 卡波环 Cabotring 40 嗜碱性点彩红细胞 41 有核红细胞 42 缗钱状红细胞 43 44 四 血细胞比容测定 血细胞比容 Hct HCT 旧称红细胞压积 PCV 是指一定体积的全血中红细胞所占体积的相对比例 影响HCT的因素 红细胞数量 平均体积 血浆量 45 HCT的用途 贫血 真性红细胞增多症和红细胞增多的诊断 血液稀释和血液浓缩变化的测定 红细胞平均体积和红细胞平均血红蛋白浓度的计算等 46 检测原理 直接测定 离心法微量法 温氏法间接测定 血液分析仪法HCT RBC 红细胞平均体积 47 方法学评价 微量法 WHO推荐的常规方法CLSI推荐的参考方法血液分析仪法 目前的常用方法 48 质量保证 1 操作规范化2 注意干扰因素 参考区间 男性 0 40 0 50女性 0 37 0 48 49 临床意义 与红细胞计数相似 HCT降低是贫血诊断的指标 表2 19 主要应用价值 1 临床补液量的参考2 真性红细胞增多症诊断指标3 红细胞平均指数计算的基础数据 50 51 五 红细胞平均指数 包括 红细胞平均体积 MCV 红细胞平均血红蛋白量 MCH 平均红细胞血红蛋白浓度 MCHC 应用 红细胞平均指数有助于深入认识红细胞特征 为贫血的鉴别诊断提供线索 52 检测原理 1 手工法 根据RBC Hb Hct测定结果计算而来 53 2 血液分析仪法 MCV 仪器直接测定MCH Hb RBCMCHC Hb RBC MCV 54 方法学评价 手工法红细胞平均指数由RBC HGB HCT测定后计算而来 因此 必须采用同一抗凝血标本 且所检测的结果必须准确 仪器法红细胞平均指数的测定同样依赖于RBC HGB和MCV测定的准确性 参考区间 注意成年人 55 临床意义 有助于贫血形态学分类及提示贫血的可能原因 56 六 网织红细胞计数 网织红细胞 Ret RET 介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡阶段细胞 略大于成熟红细胞 胞质中残存有嗜碱性物质RNA 经碱性染料活体染色后 呈现蓝色或紫色的点粒状或丝网状结构 故名网织红细胞 网织红细胞自骨髓释放到外周血后仍具有合成血红蛋白的能力 约1 2天后 过渡为成熟红细胞 新鲜标本检测 57 58 网织红细胞检测的目的 鉴别贫血的类型 增生性 非增生性 增生增高性 检查骨髓的功能 检测贫血的治疗效果 评估骨髓移植后 再生障碍性贫血细胞毒药物诱导治疗后或EPO治疗后的红细胞造血情况 59 检测原理 1 普通显微镜法 活体染料 新亚甲蓝或煌焦油蓝 的碱性着色基团 可与Ret中RNA的磷酸基 结合 形成蓝色的点状 线状或网状结构 2 仪器法 流式细胞仪 Ret计数仪 血液分析仪等 60 方法学评价 61 质量保证 以手工计数法为重点 1 染料选择2 正确辨认Ret 具2个及以上网织颗粒 且颗粒必须远离细胞边缘的红细胞 3 Ret计数方法 Miller窥盘计数法显微成像系统 HFR MFR LFR 62 参考区间 Ret 成人和儿童 0 5 1 5 新生儿 2 0 6 0 Ret绝对值 成人 24 84 109 L 63 临床意义 反映骨髓造血功能的重要指标 1 评价骨髓增生能力 判断贫血类型1 Ret增多 造血功能旺盛 见于各种增生性贫血 溶贫尤为显著2 Ret减少 无效红细胞造血的指征 见于非增生性贫血 慢性病性贫血 再障 3 贫血鉴别 64 2 评价疗效1 观察贫血疗效 随访项目之一2 骨髓移植后的监测 3 放 化疗的监测可指导临床适时调整治疗方案 避免造成严重的骨髓抑制 4 药物影响 65 七 嗜碱性点彩红细胞计数 66 检测原理 参考区间 0 03 临床意义 升高主要见于重金属 铅 汞等 硝基苯 苯胺中毒 溶血性贫血 巨幼细胞性贫血 白血病 恶性肿瘤也可见升高 67 八 红细胞沉降率测定 红细胞沉降率 ESR 简称血沉 指在规定条件下 离体抗凝全血中的红细胞自然下沉的速率 68 检测原理 1 魏氏 Westergren 法 2 自动血沉仪法 方法学评价 魏氏法 传统方法 国内的规范方法自动血沉仪法 快 参考区间 男性0 15mm h女性0 20mm h 69 临床意义 常规的筛查试验 缺乏特异性 主要用于观察病情的动态变化 区别功能性与器质性病变 鉴别良性与恶性肿瘤等 1 生理性 新生儿较慢 女性高于男性 经期 妊娠增快 50岁后增快 2 病理性增快 组织损伤如严重创伤 术后 心梗 恶性肿瘤 炎症疾病如风湿病 结核病的活动期 自身免疫病如SLE 类风关 高球蛋白血症如MM 巨球蛋白血症 肝硬化等 高胆固醇血症如动脉粥样硬化 DM等 3 病理性减慢 真性红细胞增多症 RBC形态异常等 70 第二节白细胞检查 71 白细胞分类 白细胞 LEU 粒细胞 GRAN 淋巴细胞 L 单核细胞 M 中性分叶核粒细胞 Nsg 中性杆状核粒细胞 Nst 嗜酸性粒细胞 E 嗜碱性粒细胞 B N 72 73 74 粒细胞增殖动力学各阶段 分裂池 成熟池 贮存池 循环池 50 边缘池 50 组织固有池 1 20 75 什么情况下要进行白细胞检查 76 一 白细胞计数 定义 指测定单位容积的外周血中各种白细胞的总数 检测原理 显微镜计数法血液分析仪法 77 方法学评价 表2 35 质量保证 注意标本要求及质量保证 参考区间 成人 4 10 109 L儿童 5 12 109 L 78 临床意义 WBC高于10 109 L称为白细胞增多 WBC低于4 109 L称为白细胞减少 低于2 5 109 L肯定异常 79 二 白细胞分类计数 白细胞分类计数 DLC 在显微镜下观察染色后的血涂片上白细胞的形态 并进行分类计数 求得各种白细胞的比值 百分率 和绝对值 80 DLC的目的 1 观察白细胞增多症 减少症 感染 中毒 恶性肿瘤 白血病和其他血液系统疾病的白细胞变化情况 2 同时评估红细胞和血小板形态 81 检测原理 显微镜分类计数法和血液分析仪法 显微镜分类计数法 制备血涂片 经Wright染色后 在油镜下根据白细胞形态特点逐个分类计数 100 200个 同时观察其形态的变化 然后求得各种白细胞的比值 百分率 再根据WBC计数结果计算各种白细胞的绝对值 绝对值 WBC数 该白细胞的百分率 82 方法学评价 83 质量保证 参考区间 84 临床意义 1 白细胞总数与中性粒细胞 N 1 生理性变化 暂时性 波动大包括年龄 日间 运动 疼痛和情绪 妊娠 分娩 吸烟等 85 2 中性粒细胞增多 反应性增多 急性感染及炎症最为常见 多为成熟的Nsg或较成熟的Nst异常增生性增多 主要为病理性或未成熟粒细胞 常见于白血病 急粒 慢粒 骨髓增殖性疾病 MPD 86 3 中性粒细胞减少 机制 1 增殖和成熟障碍 2 消耗或破坏过多 3 分布异常 常见于 某些感染 病毒 血液病 再障 脾功能亢进 理化损伤 自身免疫性疾病等 87 2 嗜碱性粒细胞 B 1 增多 过敏性和炎症性疾病 嗜碱性粒细胞白血病 少见类型 骨髓增殖性疾病 慢粒 内分泌疾病 DM 其他 2 减少 多无临床诊断意义 88 3 淋巴细胞 L 绝对值的变化 1 增多 感染性疾病 急性细菌感染恢复期 病毒所致急性传染病 慢性感染 淋巴细胞性白血病 急淋 慢淋 移植排斥前期 某些血液病 药物 2 减少 凡中性粒细胞显著增高的各种病因均可导致淋巴细胞相对减少 流感恢复期 HIV感染 结核 放 化疗后 免疫性疾病等 89 4 单核细胞 M 增多 感染 急性感染恢复期 慢性感染 结缔组织病 SLE 类风关 血液病 恶性疾病 癌 胃肠道疾病 其他 减少 意义不大 90 三 嗜酸性粒细胞计数 检测原理 显微镜分类计数法和血液分析仪法 显微镜计数法 用E稀释液稀释血液 红细胞和大部分其他白细胞被破坏 E着色 充池 低倍镜下计数2个计数池共10个大方格内的E数 换算出每升血液中E的数量 91 临床意义 1 生理变化 日间变化 运动和刺激2 增多 常见于过敏性疾病 寄生虫病 皮肤病 感染性疾病 血液病 恶性肿瘤等3 减少 急性感染期 严重组织损伤 垂体或肾上腺皮质功能亢进 一般意义不大 92 白细胞形态学检查主要采用显微镜法 现代自动图像分析仪和血液分析仪还未能取代显微镜 血液分析仪对异常结果作出报警后 仍需要采用显微镜法检查血涂片进行复查 以提供更加确切的细胞形态学检查结果 四 白细胞形态检查 一 正常白细胞形态 93 2 中性粒细胞核形界定细胞核最窄处小于最宽处1 3者为分叶核粒细胞 当杆状核与分叶核鉴别困难时 可归类于分叶核 3 中性粒细胞胞质内颗粒嗜天青颗粒 20 和特殊颗粒 80 94 二 异常白细胞形态1 中性粒细胞毒性变化 1 大小不均 病程较长的化脓性感染 2 中毒颗粒 严重感染 大面积烧伤 3 空泡形成 严重感染 败血症 4 杜勒小体 严重感染 败血症 5 退行性变 衰老或病变细胞 95 2 棒状小体 Auerbody 多见于急性粒细胞白血病 急粒 急性淋巴细胞白血病 急淋 无 96 3 中性粒细胞的核象变化正常 Nsg为主 2 5叶 3叶为主 Nst较少 Nsg Nst 13 1 核左移 外周血Nst增多和 或 出现晚幼粒细胞 中幼粒细胞甚至早幼粒细胞的现象 常见于化性脓性感染 急溶血及应用细胞因子等 核右移 外周血Nsg增多 并且5叶以上的中性粒细胞 3 的现象 常见于巨幼细胞性贫血 内因子缺乏所致的恶性贫血 感染 尿毒症等 97 4 中性粒细胞胞核形态的异常5 与遗传因素相关的中性粒细胞畸形 以上内容在 血液学检验中 将有详细介绍 此不作讲述 98 三 淋巴细胞异常形态1 异型淋巴细胞 型 空泡型 又称泡沫型或浆细胞型 99 型 不规则型 又称单核细胞型 型 幼稚型 又称未成熟细胞型或幼淋巴细胞型 100 2 卫星核淋巴细胞 101 第三节血小板检查 一 血小板 PLT 计数是测定单位容积的血液中血小板的数量 是止血 凝血检查最常用的筛检实验之一 102 检测原理 血小板计数的方法有显微镜计数法 血液分析仪法和流式细胞仪法 103 方法学评价 血液分析仪法 常规筛检方法流式细胞仪法 参考方法相差显微镜法 手工法的参考方法普通光学显微镜法 首选草酸铵稀释液 104 质量保证 原则 避免血小板被激活 破坏 避免杂物污染 参考区间 100 300 109 L 105 临床意义 1 生理变化 影响较小2 减少 引发出血的常见原因 生成障碍 破坏过多 消耗过多 分布异常 先天性 3 增多 原发性 反应性 其他 106 二 血小板形态检查 在了解血小板数量的同时 镜检血涂片上血小板的形态 聚集性和分布情况 对判断 分析血小板相关疾病具有重要意义 107 一 正常血小板形态呈两面微凸的圆盘状 直径约1 5 3 m 新生血小板较大 成熟者较小 血涂片上往往散在或成簇分布 形态多为圆形 椭圆形或略欠规则 胞质呈淡蓝或淡红色 有细小 分布均匀而相聚或分散于胞质中的紫红色颗粒 108 二 异常血小板形态1 大小异常大血小板 109 2 形态异常杆状 逗点状 蝌蚪状 蛇形 丝状突起等不规则和畸形血小板 正常人偶见 2 影响血小板形状改变的因素很多 各种形态异常又无特异性 因此 不规则和畸形血小板比值超过10 才有临床意义 110 血小板聚集 分布状态可间接反映其功能 聚集功能正常的血小板在非抗凝血的外周血涂片中常可见3 5个聚集成簇或成团 聚集与散在血小板之比为20 1 在EDTA抗凝血的血涂片中 可见血小板不聚集而呈散在分布状态或出现诱发的血小板聚集现象 3 聚集性和分布异常 111 第四节血栓与止血一般检查 112 113 一 血栓与止血常用筛检试验 一 出血时间在特定条件下 皮肤小血管被刺破后 血液自行流出到自然停止的时间称为出血时间 BT BT异常与血小板数量和功能 血管壁完整性 某些凝血因子缺乏等有关 114 方法学评价 BT测定属于体内试验 操作较为复杂 即使是TBT也难以获得真正的 标准切口 其应用受到一定限制 因此 BT目前不作为常用筛检试验 115 参考区间 TBT 6 9 2 1 min 临床意义 1 BT延长主要涉及血小板和血管壁的一期止血缺陷 血小板数量异常 如血小板减少症 原发性血小板增多症 血小板功能缺陷 如血小板无力症 巨大血小板综合征 某些凝血因子缺乏 如血管性血友病 vWD 低 无 纤维蛋白原血症和DIC 2 BT缩短某些严重的血栓性疾病 116 二 血小板计数血小板计数是常用的血液一般检验项目之一 也是重要的血栓与止血筛检试验之一 具体内容见本章第三节 117 三 凝血酶原时间 PT 定义 体外模拟体内外源性凝血的全部条件 测定血浆凝固所需的时间 是常用的外源性凝血途径和共同凝血途径的筛检指标之一 118 检测原理 手工法和血液凝固仪法 在抗凝血浆中 加入足量的组织凝血活酶 含组织因子 磷脂 和适量的钙离子 通过激活F 而启动外源性凝血途径 使乏血小板血浆凝固 从加入钙离子到血浆开始凝固所需的时间即PT 119 方法学评价 手工法 仪器校准的参考方法仪器法 目前普遍使用的方法 质量保证 严格按照仪器和试剂的操作要求进行认真检测 1 检测前2 检测中3 检测后 120 参考区间 每个实验室必须建立相应的参考区间 PT 成人11 13s 超过正常对照值3s为异常 INR 因ISI不同而异 PTR 成人0 85 1 15 PTA 70 130 121 临床意义 122 四 活化部分凝血活酶时间 APTT 定义 体外模拟体内内源性凝血的全部条件 测定血浆凝固所需的时间 以反映内源性凝血因子 共同途径是否异常和血液中是否存在抗凝血物质 APTT是常用而且比较灵敏的内源性凝血系统的筛检指标之一 123 检测原理 手工法和血液凝固仪法 37 条件下 在待检血浆中加入足量的活化接触因子激活剂 如白陶土 和部分凝血活酶 代替血小板磷脂 再加入适量的钙离子 即可通过激活F 而启动内源性凝血途径 使乏血小板血浆凝固 从加入钙离子到血浆开始凝固所需的时间即为APTT 124 方法学评价 与PT试验相同 质量保证 1 检测前2 检测中3 检测后 参考区间 25 35s 超过正常对照值10s为异常 每个实验室必须建立相应的参考区间 125 临床意义 APTT是检测内源性凝血因子是否缺乏的比较灵敏的试验 126 五 纤维蛋白原 Fg Fbg FIB 含量 检测原理 表2 75 参考区间 成人 2 4g L新生儿 1 25 3 00g L 127 临床意义 128 急性时相反应蛋白 acutephasereact