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临床检验仪器第1章 概论1、 临床检验仪器的特点:涉及的技术领域广 结构复杂 技术先进 精度高 对使用环境要求严格2、 误差通常有两种表示方法。一是绝对误差,它是测得值X与被检测量真值X0之差。绝对误差有量纲。绝对误差只能说明检测结果偏离实际值的情况,即能反映出误差的大小和方向,但不能反映出检测的准确程度。绝对误差=XX0二是相对误差,它是绝对误差与被测量真值之比。相对误差只有大小和符号,无量纲,但它能反映检测工作的精细程度。=X03、 精度:是对检测可靠度或检测结果可靠度的一种评价,是指检测值偏离真值的程度。4、 临床检验仪器的选用标准:要求仪器的精度和分辨率等级高、应用范围广、检测范围宽、稳定性和重复性好、灵敏度高、误差和噪音小、响应时间短等; 要求仪器的检测速度快、检测参数多、结果准确可靠、可靠性好; 用户操作程序界面全中卫显示,操作简便,快捷; 有国内生产的配套试剂盒供应; 仪器不失效的性能、寿命、可维修性和保存性能好,如仪器的装配合理、材料先进、采用标准件及同类产品通用零部件的程度高、售后维修服务好等; 能充分体现高效益、低成本。5、 许多仪器都集大型机的处理能力和小型机的应变能力于一身,如生化分析仪器的光路系统技术更先进,可使波长范围更宽、稳定性更高,操作系统的数据分析和处理能力更强,更方便实现网络化;免疫分析仪器的特异性和灵敏度更高等。6、 临床检验仪器学科的发展与近年科学技术的进步密切相关,尤其是电子技术、计算机技术和生物芯片技术,对其有着巨大的影响。7、 专家系统技术更加完善,使临床检验仪器具有更高级的智能。从送入标本、条码输入、完成检测、数据存储输出、连接网络,由原先使用人工完成的工作过程完全由计算机控制的机械臂和数据处理分析系统准确无误的自动完成,速度更加快捷。仪器能定期自动校检,排除人为因素和非标准干扰,结果存储便于查询,减少误差,缩短了出报告的时间。自诊断、自控、自调、自行判断决策等高智能功能,使检验仪器的操作使用更加方便快捷,并向全能型、全自动化和先进的“人-机”对话方向迅速发展。第2章 显微镜技术和显微镜1、 光学显微镜的结构组成和工作原理结构:光学系统和机械系统工作原理:光学显微镜是利用光学原理,把人眼所不能分辨的微小物体放大成像,供人们提取物质微细结构信息的光学仪器。显微镜是由两组会聚透镜组成的光学折射成像系统。把焦距较短、靠近观察物、成实像的透镜组称为物镜,而焦距较长,靠近眼睛、成虚像的透镜组称为目镜。而相对于物镜的成像条件及最后二次成像于观察者的明视距离等条件的满足是通过仪器的机械调焦系统来实现的。被观察物体位于物镜的前方,被物镜作第一级放大后成一倒立的实像,然后此实像再被目镜作第二级放大,得到最大放大效果的倒立的虚像,位于人眼的明视距离处。目前,各类光学显微镜都是二次放大图像的复式显微镜,结构基本定型。2、 光学显微镜的性能参数:放大率:或称放大倍数,是指显微镜经多次成像后最终所成(放大的)像的大小相对于原物体大小的比值。 数值孔径 分辨率 视野 景深与焦长 镜像亮度和清晰度 工作距离3、 荧光显微镜是由光源、滤色系统和光学系统(包括反光镜、聚光镜、物镜、目镜、照明系统)等主要部件组成。荧光显微镜与普通光学显微镜结构基本相同,主要区别在于光源和滤光片不同。光源:通常用高压汞灯作为光源,可发出紫外线和短波长的可见光。滤光片:有二组,第一组称激发滤片,位于光源和标本之间,仅允许能激发标本产生荧光的光通过(如紫外线);第二组是阻断滤片,位于标本与目镜之间,可把剩余的紫外线吸收掉,只让激发出的荧光通过,这样既有利于增强反差,又可保护眼睛免受紫外线的损伤。4、 电子显微镜的基本结构:电子光学系统、真空系统、供电系统、机械系统和观察系统。第3章 离心技术与离心机1、 常用的离心方法:平衡离心法、等密度离心法、经典式沉降平衡离心法。2、 离心机按用途可分为:制备型、分析型、制备分析两用型。3、 离心机的分类:低速离心机:最大的转速在10000r/min以内 高速离心机:最大转速为2000025000r/min,最大相对离心力为89000g,最大容量可达到3L,分离形式是固液沉降分离。 超速离心机:转速可达5000080000r/min,相对离心力可达510000g 专用离心机4、 离心机的主要技术参数及性能指标: 最大转速:离心转头可达到的最大转速,单位是r/min; 最大离心力:离心机可产生的最大相对离心力场RCF,单位是g; 最大容量:离心机一次可分离样品的最大体积,通常表示为mn。M为一次可容纳的最多离心管数,n为一个离心管可容纳分离样品的最大体积,单位是ml;第4章 光谱分析技术及相关仪器1、 光谱分析技术的基础理论: 光的特征 物质的吸收光谱:在连续光谱中某些波长的光被物质吸收后产生的光谱被称作吸收光谱。 光的吸收定律:郎伯-比尔定律,设入射光强度为I0,当透过浓度为c、液层厚度为b的溶液后,透射光强度为I,透射光强度与入射光强度的比值称为透光度,也叫透射率,以T表示。实验证明,当液层厚度b或溶液浓度c按算术级数增加时,透光度T按几何级数减少,数学表达式:T=I/I0=10-k/x,式中K为比例常数。为方便起见,常用透光度的负对数来表示光被溶液吸收的程度,称为吸光度,用A来表示:A=lgT=lgI/I0=lgl/T=kbc,上式表明,当用一束单色光照射吸收溶液时,其吸光度与液层厚度及溶液浓度的乘积成正比,此即郎伯-比尔定律,不仅适用于分子吸收,也适用于原子吸收。 物质的发射光谱:物质吸收能量后激发所发射的光被光谱仪器分析成光谱,称为发射光谱。物质的发射光谱有三种:线状光谱、带状光谱及连续光谱。2、 工作波段在200800nm的分光光度计称为紫外-可见分光光度计,其中200400nm为紫外光区,400800nm为可见光区。3、 紫外-可见分光光度计的基本结构: 光源:a钨灯:适用波长范围为3202500nm之间,辐射能量随温度的升高而增大。钨灯的辐射强度对灯电压非常敏感,能量输出在可见光区与工作电压的四次方成正比。在使用时应严格控制钨灯的灯电压。 b氢灯和氘灯:氢灯和氘灯能发射150400nm的紫外线。 c 汞灯:汞灯发射的是离散线光谱,在254734nm范围内产生一系列谱线。 单色器 吸收池:又称为比色皿、比色杯、样品池或液槽等,是用来盛放被测溶液的器件,同时也决定着偷光液层厚度,可用塑料、玻璃、石英或熔凝石英制成。在可见光范围内,常用无色光学玻璃或塑料制作;在紫外区,无用能透紫外线的石英或熔凝石英制作。 检测器 信号显示系统第5章 色谱分析仪技术和色谱分析仪器1、 色谱法:是一种物理分离技术,实质上是利用混合物中各个组分在互不相容的两相(固定相和流动相)之间的分配的差异而使混合物得到分离的一种方法,也有人称之为色层法、层析法等。2、 色谱分离中的两相是指系统具有一个有大比表面积的固定相(可以是固体或是以某种方式固定了的液体)和一个能携带待分离混合物流过固定相的所谓流动相(可以是气体或液体)。在相同体积的情况下,尽量增加固定相的表面积,以利于样品与之充分接触,提高分辨效率,这就是大比表面积的固定相的意义所在。3、 气相色谱仪的主要构成:气路系统、进样系统、分离系统(色谱柱)、检测系统、温度控制系统、数据处理、记录系统及电源、电子线路。第6章 电泳技术和常用电泳仪1、 电泳(EP):是指带电荷的溶质或粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的现象。2、 影响电泳的外界因素:电场强度 溶液的PH值 溶液的离子强度 电渗作用 离子的迁移率 吸附作用3、 醋酸纤维素薄膜电泳:醋酸纤维素是纤维素的羟基乙酰化形成的纤维素醋酸酯。由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜。这种薄膜对蛋白质样品吸附性小,几乎能完全消除纸电泳中出现的“拖尾”现象,又因为膜的亲水性比较弱,它所容纳的缓冲液也少,电泳时经过膜的预处理、加样、电泳、染色、脱色与透明即可得到满意的分离效果。此电泳的特点是分离速度快、电泳时间短、样品用量少。因此特别适合于病理情况下微量异常蛋白的检测。4、 等电聚焦电泳的特点:使用两性载体电解质,在电极之间形成稳定、连续、线性的PH梯度;由于“聚焦效应”,即使很小的样品也能获得清晰、鲜明的区带界面;电泳速度快;分辨率高;加入样品的位置可任意选择;可用于测定蛋白质类物质的等电点;适用于中、大分子量(如蛋白质、肽类、同工酶等)生物组分的分离分析。5、 目前用于临床医学检验的电泳主要有血清蛋白电泳、血红蛋白电泳、糖化血红蛋白电泳、血清脂蛋白电泳、尿蛋白电泳、脑脊液蛋白电泳、乳酸脱氢酶同工酶电泳、肌酸激酶同工酶电泳、肌酸激酶同工酶亚型电泳等。6、 区带电泳在医学检验中应用最为广泛。第7章 电化学分析技术和临床相关仪器1、 离子选择性电极(ISE)的工作原理:是一种用特殊敏感膜制成的,对溶液中特定离子具有选择性响应的电极。ISE可测量PH,以及Na+、K+、Cl-、Ca2+、Mg2+等离子的活度或浓度。离子选择性电极通常由电极管、内参比电极、内参比溶液和敏感膜四个部分组成。2、 PCO2电极是气敏电极,是由PH玻璃电极和银-氯化银电极组装在一起的复合电极。3、 常见电解质分析仪分类:电解质分析仪主要检测Na+、K+、Cl-。电解质分析仪 含电解质分析的血气分析仪 含电解质分析的自动生化分析仪4、 电解质分析仪的结构: 湿式电解质分析仪:离子选择性电极、参比电极、分析箱、测量电路、控制电路、驱动电机和显示器等组成。指示电极包括PH、Na+、K+、Cl-、Li+、Ca+、Mg+等离子选择性电极。参比电极一般是银-氯化银电极。 干式电解质分析仪5、 电极系统的保养:钠电极、钾电极、氯电极、参比电极6、 血气分析仪虽然种类型号很多,但其基本结构均可分为电极、管路和电路系统三大部分。7、 通常把确定电极系统工作曲线的过程叫做定标或校准。8、 血气分析仪的管路系统包括气路系统和液路系统两部分。9、 在测量样品之前,需用标准液及标准气体确定PH、PCO2、和PO2三套电极的工作曲线。第8章 微生物检测技术和相关仪器1、 目前微生物鉴定的自动化系统大致分为两大类:一类是自动血培养检测和分析系统,主要功能是检测标本中是否有微生物存在,计算机自动扫描进行连续监测,当微生物生长代谢导致某些生长指数超标时,仪器自动报警提示有细菌生长;另一类是自动微生物鉴定及药敏分析系统,主要功能是将分离的微生物进行鉴定,同时进行抗生素敏感实验。2、 微生物自动鉴定及药敏分析系统的鉴定原理:采用微生物数码鉴定原理。数码鉴定是指通过数学的编码技术将细菌的生化反应模式转换成数学模式,给每种细菌的反应模式赋予一组数码,建立数据库或编成检索本。通过对未知菌进行有关生化实验并将生化反应结果转换成数字(编码),查阅检索本或数据库,得到细菌名称。3、 微生物自动鉴定及药敏分析系统的基本结构:测试卡、菌液接种器、培养和监测系统、数据管理系统。第9章 生物安全柜1、2003年5月9日美国疾病控制中心发布了最新的实验室生物安全级别标准,即生物安全三级标准。2、 生物安全柜的基本工作原理:生物安全柜是防止操作处理过程中某些含有危险性或未知性生物微粒发生气溶胶散逸的箱形空气净化负压安全装置。气溶胶是指悬浮于气体介质中、粒径一般为0.001100um的固态、液态微粒所形成的胶溶态分散体系。3、 NSF49在上世纪70年代就已经出现,被公认为目前生物安全柜领域最完善的标准。2002年,NSF49正式获得了美国国家标准学会的认可,成为美国生物安全柜的统一标准。4、 目前世界上生物安全柜领域最重要的标准是欧洲EN12469标准和美国NSF49标准。根据防护程度的不同,通常将生物安全柜分为、级。级生物安全柜是指用于保护操作人员与环境安全、而不保护样品安全的通风安全柜,适用于对处理样品安全性无要求且生物危险度等级为1、2、3级的媒质的操作。5、 生物安全柜一般由箱体和支架两部分组成。第10章 细胞培养技术和培养箱1、 细胞培养:也称为组织培养,是从生物体内取出组织或细胞,在试管和培养皿内模拟体内生理环境,于无菌、适当温度和一定营养条件下,对这些组织或细胞进行孵育培养,使之保持一定的结构和功能,便于我们观察和研究。第11章 流式细胞技术与流式细胞仪1、 流式细胞仪(FCM)的分选原理:在压电晶体上加上频率为30kHz的信号,使之产生同频率的机械振动,流动室也随之振动,于是通过测量区的液柱断裂成一连串均匀的液滴。由于各类细胞的特性信息在细胞形成液滴以前在测量区已被测定,并储存在计算机上。因此,当某类细胞的特性与要分选的的细胞相同时,FCM就在形成液滴时给含有这种细胞的液滴充以特定的电荷,而不符合分选条件的含细胞液滴及不含细胞的空白液滴不被充电,即不带电荷。带有电荷的液滴向下落入偏转板间的静电场时,依所带电荷的不同分别向左偏转或向右偏转,落入指定的收集器内。不带电的液滴不发生偏转,垂直落入废液槽中被排出,从而达到细胞分类收集的目的。2、 FCM的结构可分为流动室及液流驱动系统、激光光源及光束成形系统、光学系统、信号检测与储存、显示、分析系统、细胞分洗系统五个部分。3、 目前临床型FCM,大多采用氩离子气体激光器。4、 激光是一种相干光源,它能提供单波长、高强度及稳定性高的光照,所以激光是细胞微弱荧光快速分析的理想光源。5、 作为FCM光学系统中的主要光学元件的滤光片,主要分为长通滤光片、短通滤光片和带通滤光片三类。6、 荧光染料的选择和标记细胞的方法是保证荧光信号产生的关键技术。7、 目前已经广泛应用于临床医疗实践和科学研究中的免疫学、细胞生物学、血液学、肿瘤学、药物学等诸多领域。8、 目前,细胞生物学研究中,应用最频繁也最普通的是细胞周期分析,包括细胞周期、DNA倍体、细胞表面受体和抗原表达的相互关系、细胞周期各时相的百分比和细胞周期动力学参数的测定等内容。9、 HIV选择性侵入人类T淋巴细胞亚群中的CD4+T辅助细胞。10、 流式细胞仪的主要性能指标包括:荧光测量灵敏度、仪器的分辨率、前向角散射光检测灵敏度、分析速度和分选指标。第12章 血液分析技术与相关仪器1、 血细胞分析仪(BCA)是指对一定体积全血内血细胞异质性进行自动分析的常规检验仪器,又被称为血细胞自动计数仪、血液学自动分析仪等。主要由机械系统、电学系统、血细胞检测系统、血红蛋白测定系统、计算机和键盘控制系统组成。其检测原理主要有电阻抗法血细胞检测原理、联合检测型血细胞分析仪检测原理、血细胞分析仪网织红细胞检测原理、用流式细胞技术检测单个的网织红细胞的大小和细胞内RNA的含量及血红蛋白的含量等。其主要功能是血细胞计数、白细胞分类、血红蛋白测定、相关参数计算等。2、 电阻抗法血细胞检测原理:血细胞与等渗的电解质溶液相比为相对的不良导体,其电阻值比稀释液的大;当血细胞经过检测器微孔的孔径感受区时,检测器内外电极之间的恒流源电路上,电阻值瞬间增大,产生一个电压脉冲信号;产生的脉冲信号数,等于通过的细胞数,脉冲信号幅度大小与细胞体积大小成正比。根据欧姆定律,在恒电流电路上,电压变化与电阻变化成正比。电阻值又同细胞体积成正比,血细胞体积越大,电压越高,在甄别器的脉冲幅度就越大,各种大小不同细胞产生的脉冲信号分别送入仪器内电脑的各个通道,经运算得出各种细胞参数。电阻抗型BCA以此计数白细胞、红细胞、血小板及相关参数。3、 白细胞体积大小是由胞体内有形物质的多少所决定的。4、 白细胞体积分布图:第一群是小细胞区,主要是淋巴细胞,体积在3590fl;第二群是单个核细胞区,也称为中间细胞群,体积在90160fl,包括单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、核左移白细胞、原始或幼稚阶段白细胞;第三群为大细胞区,主要是中性粒细胞,它分叶多,颗粒多,体积可达到160fl以上。5、 血红蛋白测定原理:除干式、无创型外,各型BCA对血红蛋白测定都采用光电比色原理。血细胞悬液中加入溶血剂后,红细胞溶解释放出血红蛋白,后者与溶血剂中有关成分结合形成血红蛋白衍生物,进入血红蛋白测试系统。在特定波长(多位530550nm)下进行光电比色,吸光度值与所含血红蛋白含量成正比,经仪器计算显示出血红蛋白浓度。6、 因为国际ICSH推荐的氢化高铁(HICN)法的最大吸收峰在540nm,仪器血红蛋白的校正必须以HICN值为准。7、 血细胞检测系统:电阻抗检测系统:由检测器、放大器、甄别器、阈值调节器、检测计数系统和自动补偿装置组成。这类检测系统将主要应用于“二分群、三分群”仪器中。流式光散射检测系统:由激光光源、检测装置和检测器、放大器、甄别器、阈值调节器、检测计数系统和自动补偿装置组成。8、 血细胞分析仪的性能指标:测试参数:包括实际测试参数WBC、HGB、RBC、HCT(有的仪器先以单个细胞高度测得MCV,在乘以RBC计换算出HCT)、PLT、PCT和计算参数MCV、MCH、MCHC等。参数数目有1646个不等。低档仪器报告参数少,高档仪器报告参数多。9、 血细胞分析仪的评价:ICSH公布了电子血细胞仪的评价方案:在细胞计数、血红蛋白测定方面,要评价仪器测试样本的总变异、携带污染率、线性范围、可比性和准确性等,这对保证检验质量将起重要作用。10、 常见堵孔原因与处理方法:仪器长时间不用,试剂中的水分蒸发、盐类结晶堵孔,可用去离子水浸泡,待完全溶解后,按CLEAN键清洗;末梢采血不顺或用棉球擦拭微量取血管;抗凝剂量与全血不匹配或静脉采血不顺,有小凝块;小孔管微孔蛋白沉积多,需清洗;样本杯未盖好,空气中的灰尘落入杯中。后四种原因,一般按CLEAN键清洗,若不行,需小心卸下检测器按仪器说明书进行清理。11、 血凝仪(ACA)是采用一定分析技术,对血栓与止血有关成分进行自动检测的临床常规检验仪器。使用的检测方法主要有:凝固法、底物显色法、免疫学法、干化学法等。其中凝固法是ACA使用的最基本、最常用的方法。半自动血凝仪基本上以凝固法检测为主。12、 血凝仪的基本结构: 半自动凝血仪:主要由样本和试剂预温槽、加样器、检测系统(光学、磁场)及微机组成。 全自动凝血仪:包括样本传送及处理装置、试剂冷藏位、样本及试剂分配系统、检测系统、计算机、输出设备及附件等。13、 血液流变分析仪仪器性能的评价:在安装、维修及使用一段时间后,应对仪器准确度、分辨率、重复性、灵敏度与量程进行检验。第13章 尿液分析技术和相关仪器1、 尿液分析仪按测试项目分类为:8项尿液分析仪、9项尿液分析仪、10项尿液分析仪、11项尿液分析仪和12项尿液分析仪。检测项目包括尿蛋白、尿葡萄糖、尿PH、尿酮体、尿胆红素、尿胆原、尿潜血、亚硝酸盐、尿白细胞、尿比重、维生素C和浊度。2、 空白块是为了消除尿液本身的颜色及试剂块分布的状态不均等产生出的测试误差,提高测量准确度而设置的。3、 尿液分析仪的检测原理:把试剂带浸入尿液中后,除了空白块外,其余的试剂块都因和尿液发生了化学反应而产生了颜色的变化。试剂块的颜色深浅与光的吸收和反射程度有关,颜色越深,相应某种成分浓度越高,吸收光量值越大,反射光量值越小,反射率也越小;反之,反射率越大。因为颜色的深浅又与尿液中各种成分的浓度成比例关系,所以只要测得光的反射率即可求得尿液中各种成分的浓度。4、 尿液分析仪一般由机械系统、光学系统(光源、单色处理、关电转换)、电路系统(光电检测器将试剂带所反射的信号的强弱转换成电信号的大小,送往前置放大器进行放大。)三部分组成。5、 尿液分析仪的安装条件:应安装在清洁、通风处,避免潮湿。最好有空调装置(室内温度应在1030。相对湿度应80%)。 安装在稳定的水平实验台上(最好是水泥台)。禁止装在高温、阳光直射处;远离高频、电磁波干扰源、热源及有煤气产生的地方。 应安装在大小适宜、有足够空间便于操作的地方。 要求仪器接地良好,电源电压稳定。6、 迄今为止尿沉渣分析仪大致有两类,一类是通过尿沉渣直接镜检再进行影像分析,得出相应的技术资料与实验结果;另一类是流式细胞术分析。7、 流式细胞术尿沉渣分析仪的基本组成:光学系统、液压(鞘液流动)系统、电阻抗检测系统和电子系统。8、 前向散射光信号主要反映细胞体积的大小。前向散射光强度反映细胞横截面积;前向散射光脉冲宽度Fscw反映细胞的长度。9、 前向荧光信号主要反映细胞染色质的长度。荧光强度主要反映细胞染色质的强度;前向荧光脉冲宽度FIw反映细胞染色质的长度。10、 流式细胞术尿沉渣分析仪的检测项目:红细胞(RBC)、白细胞、上皮细胞(EC)、管型、细菌、其他检测和导电率的测定。第14章 自动血沉分析仪1、 红细胞沉降率指红细胞在一定条件下沉降的速度。主要测定方法还是被称为标准的魏氏法。第15章 自动生化分析技术和相关仪器1、 自动生化分析技术是将生物化学分析过程中的取样、加试剂、去干扰、混合、保温反应、自动检测、结果计算、数据处理、打印报告以及实验后是清洗等步骤自动化的技术。应用这一类仪器一般都具有灵敏、准确、快速、节约和标准化等优点。2、 根据仪器反应装置结构不同,自动生化分析仪可分为连续流动式、离心式、分立式和干化学式。3、 离心自动生化分析仪由加样系统和分析系统两部分组成。4、 分立式自动生化分析仪是目前国内外应用最多的一类。5、 目前自动生化分析仪多采用后分光,即光源光线直接透过样品,通过光栅,再进行吸光度的检测。使用后分光技术,可以在同一体系中检测多种成分。如果比色池中有多种吸收特征不同的组成物质,当复色光通过后,各物质分别对各自的特征性光波产生吸收,之后再分成光谱对不同的波长进行测定,可以在同一体系中同时得到多组分结果,无需移动仪器的任何部分,稳定性好,速度快,噪声低,分析精确度和准确度高,故障少。光栅使用寿命长,无需任何保养。6、 恒温装置:自动生化分析仪通过温度控制系统保证反应在恒温环境下进行,反应温度通常为25、30、37。7、 清洗装置:一般包括吸液针、吐液针和擦拭块。清洗过程包括吸取反应液、注入清洗液、吸取清洗液、注入洁净水、吸取洁净水、吸水擦干等步骤。清洗液有酸性和碱性两种,不同分析仪可根据需要选择。8、 自动生化分析仪的操作流程:工作前检查 水浴槽换水 工作前维护 工作前准备 执行校准操作程序和质控操作程序后进行检测 结束工作。第16章 免疫分析技术和相关仪器1、 由于酶联免疫吸附测定(又称酶标法ELISA)技术中可用不同形式的固相支持物(如试管、微孔板、小珠、微粒等)作为吸附免疫试剂的载体,因而可设计成不同的酶免疫分析仪,各种不同的酶免疫分析仪在结构上有很大的差别。微孔板固相酶免疫检测仪为临床最常用的酶免疫分析仪之一。2、 由酶标仪的工作原理方框图和光路图可以看出它和普通光电比色计的不同之处。一是盛装比色液的容器不是使用比色皿,二是使用塑料微孔板。塑料微孔板常用透明的聚乙烯材料制作。采用塑料微孔板来做固相载体,是利用它对抗原或抗体有较强的吸附这一特点。二是酶标仪的光束是垂直通过待测液即微孔板的。三是酶标仪是使用光密度OD来表示吸光度。3、 发光免疫分析就是利用化学发光现象,将发光反应与免疫反应相结合而产生的一种很有发展前途的免疫分析方法。4、 电化学发光免疫分析的原理:电化学发光免疫分析是电化学发光和免疫测定相结合的技术,是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应,实际上包括了电化学和化学发光两个过程。5、 放射免疫分析(RIA)是以放射性核素为标记物的标记免疫分析技术。6、 免疫浊度检测是将液相内的沉淀试验与现代光学仪器和自动分析技术相结合的一项分析技术。7、 时间分辨荧光免疫检测原理:其基本原理是用镧系三价稀土离子及其螯合物(如Eu3+螯合物)作为示踪物标记抗原、抗体、核酸探针等物质,当免疫反应发生后,根据稀土离子螯合物的荧光光谱的特点(特异性强,巨大Stokes位移、荧光寿命长),用时间分辨荧光分析仪延缓测量时间,排除标本中非特异性荧光的干扰,所得信号完全是稀土元素螯合物发射的特异荧光,测定免疫反应最后产物的特异性荧光信号。根据荧光强度判断反应体系中分析物的浓度,达到定量分析的目的。8、 发光免疫技术根据示踪物检测的不同而分为荧光免疫测定、化学发光免疫测定及电化学发光免疫测定三大类。9、 放射免疫分析包括放射免疫分析和免疫放射分析。第17章 PCR基因扩增仪1、 聚合酶链反应(PCR)是一种体外DNA扩增技术,自20世纪80年代诞生以来,目前已成为现代分子生物学研究不可缺少的实验技术。2、 PCR技术的原理:PCR技术的本质是核酸扩增技术,通过加热使双链DNA解开螺旋,在退火温度条件下引物同模板DNA杂交,在TaqDNA聚合酶、dNTPs、Mg2+和合适PH缓冲液存在条件下延伸引物,重复上述“变性退火引物延伸”过程至2540个循环,呈指数级扩大待测样本中的核酸拷贝数,达到体外扩增核酸序列的目的。3、 常

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