食用菌各级菌种的制作

食用菌原种栽培种制作 第三章食用菌各级菌种的制作 人工培育的菌种有母种 原种和栽培种之分 1 母种 一级菌种 用孢子分离或组织分离等培育的菌丝体称为母种 2 原种 二级菌种 把母种扩大到木屑 棉籽壳等为主的培养料上的菌种称为原种 3 栽培种 三级菌种 由原种扩大培养成为生产上使用的菌种称为栽培种 一般1支试管菌种可繁殖4 6瓶原种 每瓶原种又可扩大繁殖60 100瓶栽培种 食用菌菌种 原种和栽培种的生产 无论是培养基成分 配制方法和灭菌方法基本上是相同的 1 原种 是由试管斜面培养基培养的母种作种源接种而成 主要用于繁殖栽培种 也可直接用于生产 母种 原种 2 栽培种 由原种作种源扩大而成 只能用于生产 原种 栽培种 一 常用培养料的配方和配制方法 1 木屑米糠培养基 适用于木腐菌食用菌菌丝生长 木屑78 麸皮或米糠20 石膏1 蔗糖1 水适量 2 棉籽壳麸皮培养基 适用于大多数食用菌菌丝生长 棉籽壳78 麸皮20 蔗糖1 石膏1 水适量 3 棉籽壳木屑综合培养基 适用于大多数食用菌菌丝生长 木屑32 棉籽壳50 麸皮15 石膏1 蔗糖1 过磷酸钙0 5 尿素0 5 水适量 4 麦粒培养基 适用于大多数食用菌菌丝生长 小麦98 石膏2 水适量 一 常用培养料的配方和配制方法 掌握碳氮比例食用菌对碳和氮的需要有一个比例 简称碳氮比 C 菌丝体生长阶段 C 20 1 子实体形成阶段 C 30 40 1 二 培养基 料 配制原则 选好培养材料选不含杀菌物质的木屑杉 松 樟等树种 含酚 酯 精油等杀菌物质 会抑制食用菌生长 要用必须经过处理 如 蒸煮 晒等 二 培养基 料 配制原则 注意物理性状培养原料要注意颗粒粗细 质地软硬程度 以及持水性能等物理性状 调节酸碱度各种食用菌需要的pH值不同 配制培养料时 应选用NaOH 石灰 盐酸或过磷酸钙等物质调节pH值 霉菌比食用菌喜欢更低的pH值 生产上有时为了控制这类杂菌的发生 往往将pH值适当调高0 5 1 二 培养基 料 配制原则 米糠 麸皮作用作用 补充氮源和维生素 稻草 麦秸 木屑 棉籽壳等纤维素原料 含氮量低 如 木屑含氮量0 03 以下 麸皮 含氮量比米糠多 但维生素不如米糠 米糠 含氮量比麸皮少 用量 一般10 20 过多易引起污染 三 培养基原料用途的几点说明 加糖的作用 初期补充碳源 用量1 5 诱导胞外酶的产生 纤维素原料 食用菌利用缓慢 加入少量白糖作为食用菌初期补充碳源 促进菌丝快速生长 同时诱导纤维素酶的产生 更好地利用纤维素 三 培养基原料用途的几点说明 Ca2 作用 提供食用菌钙离子 原料中加石膏 CaCO3或过磷酸钙 骨粉提供食用菌钙离子 钙不断中和食用菌产生的有机酸 钙还能中和单宁 三 培养基原料用途的几点说明 按配方称取原料 拌料 调节含水量65 左右 装袋 灭菌 1 5kg cm2 1 5 2h 冷却 接种 接入黄豆大小一块菌种 培养 25 27 菌丝长满瓶 袋 培养7d 8d 扩大成栽培种 四 原种 栽培种的制作方法 含水量65 左右判断 用手紧握培养料 手指缝中有水珠渗出 但不滴下 接种后的原种 一般在3d 5d左右菌丝恢复生长 应每天全面检查杂菌情况 如有污染及时剔除 如发现接种块无新菌丝萌发 则认为是死菌 应及时补种 正常 菌丝白色杂菌 黄 红 绿 黑死菌 补种 五 杂菌检查 菌种检查 三 原种 栽培种的接种 接栽培种 用接种匙 镊 铲 取枣大原种放于袋的两端或瓶中料面上 栽培种接种 四 菌种培养 二 技术环节 母种培养 二 菌种质量的鉴定 一 母种质量的鉴定 好母种 2 鉴定 耐干湿性试验 耐高温性试验 仍正常生长 适温培养7天30 35 锻炼24h再适温培养 出菇试验 二 原种 栽培种质量的鉴定 黄水 污染 食用菌菌种的保存 无论是母种 原种或栽培种 如果未及时使用 其菌丝就会很快衰老 降低生产力 影响产量和质量 因此 菌种必须进行适当的保存 其目的是防止退化 确保菌种纯一 防止杂菌感染 菌种保存的基本原理 主要是通过采用低温 干燥与缺氧的条件 以中止菌种的繁殖 降低其新陈代谢 使之处于休眠状态 1 斜面低温保存法将斜面菌种 置于冰箱内 在4 左右低温下保存 以后每隔2 3个月转管移接一次 这种保存方法适于大多数食用菌菌种 但草菇菌种在5 以下很快死亡 所以草菇的菌种 不必放在冰箱中 置于室温保存即可 为了延长保存时间 试管口处要用塑料薄膜包扎 以防培养基干固 在农村没有冰箱设备的 可把母种试管 用石蜡封口 再用塑料薄膜包封 沉放于清凉的井底保存 2 液体石蜡保存法食用菌的菌丝体都可用此法保存 方法简单 只在斜面菌种试管内 注入一层已灭过菌的液体石蜡 注入量以高出斜面1厘米为宜 使菌种与空气隔绝 降低其新陈代谢的活动 然后在棉塞外包以塑料薄膜 直立存放于室内干燥处或低温下保存 一般可保存一年以上 使用液体石蜡菌种时 只要用接种针从斜面上挑取少许菌体 放在新鲜的培养基上 经过培养 即可应用 原种则重新蜡封 继续保存 3 木屑试管菌种保存法用杂木屑按原种的培养基配制装入大号试管 容量为管高的三分之二 擦净管口塞紧棉塞 用牛皮纸包扎管口后高压灭菌 然后移入母种 在25 28 下培养 待长满菌丝后 立即移到低温干燥环境保存 或埋于尿素 硝酸铵或地洞中保存 效果更好 并能延长保存时间 4 冷冻干燥保藏法这种方法采用真空 干燥 低温等手段 使菌种新陈代谢活动处于相对静止状态 在低温下快速冷冻 又在低温下真空干燥 而使菌细胞的结构与成分保持原来状态而保存菌种 还有沙土保存法 液氮超低温保藏法 滤纸片保存法 菌丝球生理盐水保藏法 麦粒保藏法 干孢子真空保藏法等 这里不一一介绍 要根据自己的工作需要及具体条件而定 一边保存 一边还要分离 复壮 做好选育工作 延续菌种的优良性能 原种和栽培种培养好后 应立即用于扩接栽培种或栽培生产 不宜保存过久 时间越长 生活力越差 也越容易感染杂菌 若因特殊情况不能及时使用 原种瓶口用牛皮纸包好 置4 14 条件下可保藏一年左右 栽培种短期保存也可放于阴凉 干燥通风的室内 但种瓶不宜堆叠过高 以免堆内发热 加速菌丝老化 如何防止食用菌菌种退化 菌种退化 在菌种传代 保藏和长期栽培过程中 某些原来的优良性状可能会消失或变弱 造成遗传的变异 出现长势弱 抗性差 出菇迟 产量低品质低劣等现象 菌种退化会导致菌丝体生长缓慢 对环境 杂菌等的抵抗力变弱 子实体形成期提前或推后 出菇潮次不明显等现象 1 引起菌种退化的原因很多 遗传变异 不良环境条件 杂菌污染 自然退化 2 防止菌种退化的措施有 1 选优分离 2 更换培养基的营养成分 3 有性繁殖 4 适宜条件培养菌种 5 选优去劣 第一节食用菌的形态结构 一 食用菌的基本组成二 菌丝体的形态结构三 子实体的形态结构 第二章食用菌学基础知识 一 食用菌的基本组成 在分类学上 食用菌属于真菌界中的担子菌门和子囊菌门 食用菌形态上有菌丝体和子实体两种形式 食用菌的子实体一般都比较大 直径和高度可达2 40cm 所以又称食用菌为大型真菌 菌丝体是食用菌的营养结构 主要功能是分解基质 吸收 输送及贮藏养分 子实体是繁殖结构 其主要作用是产生孢子 繁殖后代 食用菌形态 伞菌为例 子实体 菌丝体 食用菌繁殖器官 主要功能是产生孢子 繁殖后代 菌盖 菌柄 食用菌营养器官 主要功能是分解基质 吸收营养 一次菌丝体 初生菌丝体 单核菌丝 次生菌丝体 双核菌丝 三生菌丝 结实性双核菌丝 菌托 菌环 1 概念 一 菌丝及菌丝体的正常形态结构 菌丝 在培养基上向各个方向呈辐射状延伸 分支的每一根细线 称为菌丝 细胞管状 壁薄 透明 细胞内含有一个 两个或多个细胞核 菌丝体 是由基质内无数纤细的菌丝交织而成的丝状体或网状体 二 菌丝及菌丝体的形态结构 菌丝形态1孢子2孢子膨大3孢子萌发4菌丝分枝5菌丝体6放大的菌丝体a细胞壁b细胞核c细胞质d细胞隔膜 蘑菇圈 fairyring 也叫仙人圈 仙人环 是由于蘑菇菌丝辐射生长的缘故 菌丝由中间一点向四周辐射生长 时间长了 中心点及老化的菌丝相继死去 外面的生活力强 于是形成了自然的菌丝体环 并长成蘑菇圈 3 菌丝体的划分 初生菌丝 次生菌丝 质配结果 质配始 突起 锁状联合过程 是已组织化的次生菌丝 三生菌丝 二 菌丝体特殊形态 蜜环菌的菌索 茯苓菌核 冬虫夏草子座 蝙蝠蛾幼虫被虫草菌 Cordycepssinensis 感染 死后尸体 组织与菌丝结成坚硬的假菌核 在冬季低温干燥土壤内保持虫形不变达数月之久 冬虫 待夏季温湿适宜时从菌核长出棒状子实体 子囊座 并露出地面 夏草 可入药 一 概况 三 子实体的形态结构 猴头菌 头状 杏鲍菇 保龄球状 双孢菇 伞状 二 子实体的形态特征 角勺 匙状 块菌 块状 金耳 脑状 竹荪 笔状 牛肝菌 绣球菌 喇叭菌 三 子实体的宏观结构特征 菌盖 菌柄 着生方式 中生 偏生 侧生 中生 偏生 侧生 菌柄 菌柄与菌褶的着生关系 直生 延生 弯生 离生 菌环和菌托 1 2 单层 3 4 双层 可滑动 5 絮状 6 蛛网状 7 8 破裂后附着菌盖边沿 1 苞状 2 鞘状 3 鳞茎状 4 杯状 5 杵状 6 瓣裂 7 菌托退化 8 带状 9 数圈颗粒状 位于菌盖皮层下的松软组织叫菌肉 菌肉是菌盖的实体部分 也是菇 蕈最有食用价值的部分 绝大多数食用菌的菌肉为肉质 易腐烂 少数为蜡质 革质和胶质等 菌肉的颜色绝大部分是白色 受伤后不变色 但也有些食用菌的菌肉受伤后会变色 菌肉是由生殖菌丝和联络菌丝组成的密丝组织 1 菌肉 四 子实体的微观结构特征 1 丝状菌肉 2 泡囊状态菌肉 菌肉的构造分为两大类 一类菌肉全部由丝状的菌丝体组成 称丝状菌肉 另一类菌肉大部分由泡囊状细胞及少数丝状菌丝组成称泡囊状菌肉 泡囊状细胞是菌丝分支膨大而来 常失去再生能力 如红菇属的某些种 菌肉的风味对某些食用菌来说也是分类的依据之一 许多食用菌的命名就是根据其风味而来的 如香菇 鸡油菌 杏菌 鲍鱼菇等 2 子实层子实层是担子菌或子囊菌的繁殖器官 子实层子囊菌的子实层由子囊和侧丝构成 担子菌的子实层比子囊孢菌要复杂 主要有担子 担孢子 囊状体 有的还有侧丝 大多数的担子菌的子实层位于菌褶两侧 但牛肝菌位于菌管内壁 喇叭菌平铺于菌盖外侧 猴头菌平铺于各个肉刺上 珊瑚菌分布于全部分枝表面 侧丝和囊状体是不育的 子实层实际上是由菌盖内的菌肉菌丝向下生长形成的产孢组织 是菌肉的组成部分 最靠近菌肉两侧的菌丝生长成为狭长 分枝多的紧密区 成为下子实层 由下子实层向外再产生栅状排列的担子或囊状体 由这些担子或囊状体组成子实层 因此 可认为子实层便是菌褶两侧的表生覆盖物 担子 担孢子 囊状体的形态特征是分类的重要依据 1 子囊孢子和担孢子 子囊菌的子囊孢子和担子菌的担孢子 都是有性孢子 子囊孢子是在子囊内产生的内生孢子 一般为8个 担孢子则是在担子上产生的外生孢子 1个担子上一般为4个 它们的形成过程比较复杂 担子和子囊担子和子囊分别是担子菌和子囊菌子实层的产孢组织 担子的构造和形状有很大差异 是一个很重要的分类标准 担子的主要形式 无隔担子A 筒状担子 蘑菇等 担子呈圆筒形或棒状 单细胞 无隔膜 典型的在顶端形成4个小梗 每个小梗产一担孢子 B 叉担子 桂花耳等 担子不分隔 幼时呈棒状 成熟时上部呈二叉或形成两个长臂 每臂先端产生一小尖并形成一个担孢子 有隔担子C 纵隔担子 银耳等 双核菌丝顶端细胞形成棒状或梨形的幼担子 经核配 减数分裂后 幼担子长大且十字形纵分隔成四个细胞 呈 田 字形 每细胞顶部伸出小梗 称上担子 小梗先端小而尖锐称小尖 小尖的功能 担负担孢子的形成和掷射之用 长大的纵裂担子又称下担子 D 横隔担子 木耳等 双核菌丝顶端细胞成为柱状幼担子 核配后减数过程中第一次核分裂产生一个横隔 第二次核分裂产生二个横隔 成熟的担子成为四个细胞 每个细胞产生一个小梗 小梗上着生担孢子 子囊孢子的形成过程 两个单核细胞质配后 伸长和弯曲成一种钩状体 双核并列 形成四个子核位于钩头的双核细胞即为子囊母细胞 母细胞核配发育成子囊 经减数分裂形成四个单倍体细胞核 再经一次有丝分裂形成8个细胞核 最后发育成8个子囊孢子 担孢子的形成过程孢子的形状 大小 颜色 表面特征 孢壁的厚薄等是分类的重要依据之一 担孢子的形成过程 双核菌丝顶端逐渐膨大成担子 2核结合 经减数分裂形成四个单倍体核担子顶端生出四个小梗 小梗顶端膨大成幼担孢子 四个单倍体的核通过小梗进入幼担孢子内 最后形成四个单倍体的孢子 1 圆球形 2 卵圆形 3 椭圆形 4 星形 5 纺锤形 6 柠檬形 7 长方形 8 肾形 9 多角形 10 棱形 孢子的形状食用菌的种类不同 其孢子的形状 大小 表面特征及颜色也不相同 分类依据 孢子的形状常见的有球形