SOP文件游离前列腺特异抗原(fPSA)1.doc

宁城县中蒙医院 赤峰市精神病防治院 检验科CLinLab.NCXZMYY(CFSJSBFZY)游离前列腺特异性抗原（ fPSA）标准操作程序编号：日期：版本：第 页共 页 1、变动程序：由操作者提出，并经科主任审核。2、范围：测定人血清、血浆、体液中的游离前列腺特异抗原FPSA。3、操作程序：使用仪器：日本东曹AIA-600II型全自动化学发光免疫分析仪生产厂商名称：日本东曹株式会社注册号：国食药监械（进）字2007第2400371号3.1、测定原理:本方法的原理为采用两种抗体的一步夹心EIA（IEMA）法。固定在磁微粒上的抗fPSA单克隆抗体和以碱性磷酸酶进行酶标识的抗fPSA单克隆抗体以冻结干燥品形式封装在试剂杯内。在一定温度条件下经过一定时间的抗原抗体反应后，用清洗液进行清洗，除去游离的酶标识抗体和样本成分（B/F分离）。之后，添加酶基质4甲基伞形酮酰磷酸，测定结合在磁微粒上的酶活性，通过测定酶反应结果得到的荧光物质（4甲基伞形酮酰）的生成速度，能够了解血清或肝素血浆中的fPSA 浓度。3.2、试剂： E-test（TOSOH）（fPSA）免疫反应试剂3.3 操作步骤3.3.1、向该试剂杯内准确添加100微升缓冲液、20微升校准品或稀释后的样本，在磁石磁珠振动器上搅拌，在37下使抗原抗体反应进行10分钟。3.3.2、用清洗液清洗试剂杯，除去未反应的酶标识抗体及样本成分（BF分离）。3.3.3、加入基质液后，在磁石磁珠振动器上搅拌同时用荧光检测器检测荧光物质的荧光强度，激发波长363nm、荧光波长447nm，并计算出荧光物质的生成速度。3.3.4、根据荧光物质相对于校准品的生成速度制作检量线，计算出样本中的free PSA浓度。3.3.5、如果测定结果大于20ngml，则利用样本稀释液改变适当的稀释倍率稀释样本，按相同的操作1）4）步骤重新测定。3.4、结果判定3.4.1、应用E-test（TOSOH）（FPSA）标准品试剂盒绘制标准曲线，从曲线中计算出样品中FPSA的浓度。3.4.2、在总PSA测定试剂的测定值呈基准范围附近或更大的测定值的样本中，需要识别良性疾病（前列腺肥大症等）和前列腺癌的样本请使用本品，测定游离PSA，求游离PSA值和总PSA值的比（F/T比）。对总PSA测定试剂的测定值呈轻度上升（4.010.0ng/ml）的100例病例（前列腺癌：51例，前列腺肥大症等非癌症：49例）进行测定，求F/T比，各比率的诊断灵敏度（阳性符合率）及诊断特异度（阴性符合率）如下：此外，参考基准范围因各种因素变动，因此请各单位自行设定。F/T比（） 诊断灵敏度（） 诊断特异率（） 25 96 24 20 88 33 15 69 55 10 31 71（注）F/T比按下列计算式计算 F/T（）=(A/B)*100A：E-test（TOSOH）（free PSA）测定值（ng/ml）B：E-test（TOSOH）（PA）（识别符号（ST）测定值（ng/ml）*B的测定值使用E-test（TOSOH）II（PSAII）测定值时也能够得到相同的结果。4、注意事项：1、本产品为体外诊断用药品，请勿用于其他目的。2、请在疾患诊断中考虑其他检查结果和临床症状，进行综合判断。3、本产品不保证适用于非此文件所述的其他情况。4、虽然本试剂盒的组成试剂中，HBs抗原、HIV抗体及HCV抗体被确认为阴性，但使用时请与受检样本同样对待处理。5、使用全自动酶免疫测定装置时，请在仔细阅读装置附带的使用说明书后使用。6、本产品不能在全自动酶免疫测定装置AIA-1200系列、AIA-600中使用。7、求游离PSA值和总PSA值的比（F/T比）时，总PSA值请使用本公司的总PSA测定试剂E-test（TOSOH）II（PA）（识别符号（ST）或E-test（TOSOH）II（PSA II）测定。此外，游离PSA的测定请使用与测定总PSA相同的样本。（注）：PSA:前列腺特异抗原（Prostate-Specific Antigen） 游离PSA：游离型前列腺特异抗原（Free Prostate-Specific Antigen）8、使用时的注意事项1）请不要使用已过期的试剂。2）请在测定中使用新鲜的样品。如需保存样品时，请冷冻保存。请避免反复的冻融。3）如果试验器具受到污染可能会造成判定错误，因此请使用洁净的试验器具。4）使用本产品时，请与下列试剂（另售）组合使用。E-test（TOSOH） (free PSA) 校准品组E-test（TOSOH） (free PSA) 样品稀释液E-test（TOSOH） 基质液组（标签显示为粉红色SUB）E-test（TOSOH） 清洗液E-test（TOSOH） 缓冲液5）由于本产品是血清或肝素血浆中的游离PSA测定试剂，所以请不要在样品上使用上述以外的试剂。另外，血浆请使用肝素血浆。6）样本中含有HAMA（Human Anti-mouse Antibody），但有时使用小鼠单克隆抗体的测定体系不能获得准确的测定值。因各种疾病的治病目的不同，而使用不同的药物所产生的影响，测定值有时也会变化。诊断疾病请结合其他检查结果和临床症状综合判断。9、处理时（防止危险）的注意事项1）样品（样本）可能造成HIV、HBV、HCV等感染，因此请按相应的规定进行处理。在检查时为了避免引起感染，请穿戴一次性手套，此外不要用口进行吸取。2）本品含有防腐剂叠氮化钠，使用时一旦误入眼睛或口腔内，或者粘附在皮肤上请立即采用应急措施，如用大量的清水冲洗。必要时请就近接受医生的诊治。10、废弃时的注意事项1）本产品中包含了作为防腐剂的叠氮化钠。叠氮化钠在与铅管、铜管反应后会生成爆炸性