芦丁的提取纯化鉴定.doc

槐米中芦丁的提取、纯化和鉴定摘要：芦丁为黄酮苷，分子中具有酚羟基，显酸性，可溶于稀碱液中，在酸液中沉淀析出，可利用此性质进行提取分离。利用芦丁易溶热水、热乙醇，较难溶于冷水、冷乙醇的性质选择重结晶方法进行精制。芦丁可被稀酸水解生成槲皮素及葡萄糖、鼠李糖，依此进行制备槲皮素。通过纸色谱及紫外光谱进行黄酮及糖的鉴定。关键词：芦丁 提取 纯化 鉴定Abstract: rutin as flavonoid glycosides, with phenolic hydroxyl groups in molecules, acid, soluble in dilute lye, precipitated in the acid, can use the properties of extraction and separation. Soluble rutin using hot water, hot ethanol and difficult to soluble in cold water, cold ethanol nature of selecting recrystallization method for refining. Rutin quercetin can be generated by dilute acid hydrolysis and the glucose, rhamnose, in accordance with the preparation of quercetin. By paper chromatography and ultraviolet spectroscopy identification of flavonoids and sugar. Keywords: identification of rutin extraction and purification二）实验的基本原理1.芦丁的提取原理利用芦丁结构中含有多个酚羟基，呈酚酸性，能在碱水中溶解的性质，可用碱性溶剂进行提取，提取液加酸后可沉淀析出（碱溶酸沉法）。也可利用芦丁在冷水中溶解度小，在热水中溶解度大的性质进行提取。2.芦丁的分离原理利用芦丁结构在冷乙醇中溶解度小，在热乙醇中溶解度大，以及在热水中溶解度大，在冷水中溶解度小的性质分离。芦丁用溶剂加热溶解后，趁热抽滤，滤液放冷后能析出而达到分离的目的（如不纯可再重复操作进行分离）。也可采用醇溶水沉法进行精制。3芦丁的鉴定原理（1）利用吸附薄层色谱的分离原理，芦丁与芦丁对照品在同一条件下进行展开，显色，以达到鉴定芦丁的目的。（2）通过专属的化学显色反应（如三氯化铝显色反应），确定芦丁的成分类型（黄酮类）三、实验步骤1.芦丁的提取（1）取7.5g槐米研成粉状，置于烧杯中，加150mL水煮沸30min(适量加水，补充蒸发损失)，趁热过滤，滤渣再提取两次（每次用水125mL，煮沸15min）,合并滤液，放置24h使沉淀完全析出。过滤，用少量水洗涤，得芦丁粗品，烘干，称重，计算提取率。2.芦丁精制将芦丁粗品研细，倒入圆底烧瓶中，加入50mL95%乙醇，加热回流至芦丁完全溶解，稍冷，再加适量活性炭回流10min,然后趁热过滤于另一圆底瓶中，得黄色澄清溶液。蒸馏滤液并回收乙醇，带溶液剩余5-7.5mL时停止加热，将浓缩液倒入小烧杯中，用少量乙醇洗涤烧瓶，将洗涤液合并于小烧杯中，放置使结晶完全析出。过滤（滤液回收），得芦丁精品，烘干，沉重，计算产率。3.芦丁的水解称取1g得到的芦丁纯品溶于30%乙醇水溶液150mL，加入浓盐酸4mL，加热煮沸回流30min。放置冷却，过滤，水洗至滤液呈中性，将产品烘干，称重，计算产率。4.性质试验取芦丁及槲皮素精品少许，用95%乙醇溶解，作为样品溶液，进行下列试验，比较两者试验结果的差异并解释。（1）盐酸-锌粉反应：取2试样各5滴于白色点滴板中，加5滴浓盐酸，再加少量锌粉，观察颜色变化。（2）FeCl3：取2试样各5滴于白色点滴板中，分别加入1% FeCl3乙醇溶液2滴，观察颜色变化。（3）莫力许反应:分别1mL试样与试管中，各加10%a-萘酚10滴，充分摇匀，将试管倾斜，沿管壁滴加浓硫酸1mL，静置，观察两层溶液界面处颜色变化，并比较芦丁和槲