医学微生物学教学课件-张敏-第八章 球菌.ppt

球菌 coccus 第八章 球菌 coccus 指个体形状呈球形或椭圆形的一大类细菌 病原性球菌 pathogeniccoccus 球菌中对人类有致病性的球菌 包括四个属的一些球菌 葡萄球菌属 G 球菌 链球菌属 G 球菌 肠球菌属 G 球菌 奈瑟菌属 G 球菌 脑膜炎 淋病奈瑟菌 化脓性球菌 pyogeniccoccus 引起机体化脓性炎症的球菌 第一节葡萄球菌属 staphylococcus 一 金黄色葡萄球菌 S aureus 二 凝固酶阴性葡萄球菌 CNS 金黄色葡萄球菌 S aureus 表皮葡萄球菌 S epidermidis 腐生葡萄球菌 S saprophyticus 分类 1 据色素 生化反应 致病性葡萄球菌的鉴别 三种葡萄球菌鉴别的主要性状 2 根据有无凝固酶分型 凝固酶阴性菌和凝固酶阳性菌两大型 继而依据噬菌体分为4个噬菌体群和23个噬菌体型 III群引起葡萄球菌肠毒素食物中毒 3 根据核酸分析的遗传学分型 DNA脉冲电泳分型 PCR分型等方法 依16SrRNA不同 葡萄球菌属分48个种和亚种 一 金黄色葡萄球菌 S aureus 1 形态与染色球形 无鞭毛 无芽胞葡萄串状 革兰染色阳性 G 一 生物学性状 2 培养特性 易培养 普通平板血平板产色素 金黄色白色柠檬色有些菌溶血 产生溶血环 致病性葡萄球菌菌落呈金黄色 于血琼脂平板上生长后 在菌落周围还可见完全透明溶血环 溶血 3 生化反应 多数菌分解葡萄糖 麦芽糖和蔗糖 产酸不产气 致病性球菌分解甘露醇 触酶阳性 与链球菌区分标准 4 抗原构造 1 葡萄球菌A蛋白 细胞壁表面蛋白质 完全抗原 2 荚膜多糖 有利于细菌粘附 3 多糖抗原 存在于细胞壁 有群特异性 SPA staphylococcalproteinA 协同凝集试验 coagglutination SPA功能体内作用 SPA与IgG结合后所形成的复合物具有抗吞噬 促细胞分裂 引起超敏反应 损伤血小板等多种生物活性 体外作用 用于多种微生物抗原检测 6 抵抗力 强 对外界因素的抵抗力强于其他无芽胞菌 对碱性染料 龙胆紫 敏感 易产生耐药性 特别对青霉素 MRSA 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 葡萄球菌中金黄色葡萄球菌毒力最强 通过在宿主体内增殖 扩散和产生有害的胞外物质 酶和毒素 引起宿主疾病 葡萄球菌的毒力因子 致病物质 包括 酶 毒素 细菌的一些表面结构蛋白 二 致病性与免疫性 1 致病物质 酶凝固酶 血浆纤维蛋白原转为纤维蛋白 使血浆凝固耐热核酸酶 水解DNA纤维蛋白溶酶 水解纤维素 纤维蛋白溶酶 葡激酶 透明质酸酶 降解结缔组织 扩散因子 脂酶 分解脂肪触酶 分解H2O2 毒素葡萄球菌溶素毒性休克综合征毒素 1杀白细胞素肠毒素 以呕吐为主要症状 表皮剥脱毒素 表面结构或蛋白如粘附素 荚膜 胞壁肽聚糖和SPA等 凝固酶 coagulase 概念 使含抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类游离凝固酶 freecoagulas 结合凝固酶 boundcoagulase 意义 鉴别有无致病性的重要指标致病机理 抵抗吞噬细胞的吞噬 保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏 使感染局限化和形成血栓 引起金黄色烫伤样皮肤综合征 staphylococcalscaldedskinsyndrome SSSS 毒性休克综合征毒素 1 TSST 1 引起机体发热 增加对内毒素的敏感性 引起多器官系统功能紊乱或毒性休克综合征 TSS 表皮剥脱毒素 exfoliativetoxin 肠毒素 enterotoxin 约1 3临床分离金黄色葡萄球菌可产生 引起急性胃肠炎 即食物中毒 耐热 抗胃肠液中蛋白酶 作用机制 刺激呕吐中枢导致以呕吐为主要症状的食物中毒 还具有超抗原 superantigen 作用 葡萄球菌溶素 staphylolysin 溶素 损伤细胞膜的毒素 细胞毒素 杀白细胞素 leukocidin 细胞毒素 攻击中性粒细胞和巨噬细胞 抵抗宿主吞噬细胞 增强细菌侵袭力 2 所致疾病 感染类型所致疾病 侵袭性局部感染全身感染 毒素性食物中毒TSSSSSS 3 免疫性 人类有一定的天然免疫力 只有当皮肤黏膜受伤后 宿主免疫力降低时 才易引起葡萄球菌感染 感染后能获得一定的免疫力 但不强 难以防止再次感染 小猫试验 标本 脓汁 血液 剩余食物 呕吐物等 分离培养 血浆凝固酶发酵甘露醇耐热核酸酶 直接涂片镜检 革兰阳性葡萄球菌 生长现象 色素 溶血 生化反应 毒素检查 药敏实验 动物实验 对食物中毒患者 三 微生物学检查法 防 注意消毒隔离 注意个人卫生 防止医源性感染 防止耐药性产生 治 抗菌素药敏试验 自身菌苗疗法 四 防治原则 二 凝固酶阴性葡萄球菌 Coagulasenegativestaphylococcus CNS 泌尿系感染细菌性心内膜炎败血症术后及植入医用器械引起的感染 CNS已成为医源性感染的常见重要病原菌 耐药菌株日益增多 当机体免疫功能低下或细菌进入非正常寄居部位时 CNS可引起多种感染 各类感染中仅次于大肠埃希菌 居病原菌的第2位 造成诊治困难 引起临床微生物学工作者关注 CNS除表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌外 还包括溶血葡萄球菌 人葡萄球菌 头葡萄球菌等30多种 第二节链球菌属 Streptococcus A群 化脓性 链球菌 S pyogenes 肺炎链球菌 S pneumoniae 概述1 概念链球菌属是一大类G 排列呈双或长短不一的链状球菌 2 分类1 溶血现象分类链球菌在血琼脂平板培养基上生长繁殖后 按产生溶血与否及其溶血现象分为3类 甲 型溶血 乙 型溶血 丙 型溶血 根据溶血现象分类 2 抗原结构分类据链球菌细胞壁中抗原结构 C多糖抗原 不同 运用血清学方法分成A V20群 对人致病的链球菌菌株 90 左右属A群 其他群少见 同一群的链球菌又分若干型 A群根据其M抗原不同 可分成约100个型 3 生化反应分类对一些不具有群特异性的链球菌 如肺炎链球菌和草绿色链球菌等 需用生化反应 药物敏感和对氧的需要分类 对氧的需要分类分为 需氧 厌氧和微需氧链球菌 医学常见链球菌 一 A群 化脓性 链球菌本属细菌的代表种 致病性强 对人致病的链球菌有90 属此种 1 形态与染色球形或椭圆形 链状排列 革兰染色阳性 G 无芽胞 无鞭毛 透明质酸的荚膜 一 生物学性状 2 培养特性 营养要求高 血平板或含血清培养基 液体培养为沉淀生长 血平板呈灰白色表面光滑小菌落 不同菌株溶血不一 多数有透明溶血环 溶血现象 3 生化反应 分解葡萄糖 产酸不产气 分解葡萄糖 不分解菊糖 不被胆汁溶解 鉴别甲型溶血性链球菌与肺炎链球菌 链球菌不产生触酶 与葡萄球菌不同 4 抗原结构 分20个群 A群致病菌 溶血性链球菌或化脓性链球菌 根据蛋白抗原M抗原进一步分型 荚膜 细胞壁 蛋白质 C多糖抗原 肽聚糖 细胞膜 细胞质 1 多糖抗原 C抗原 群特异性抗原 细胞壁的多糖组分 2 表面抗原或称蛋白质抗原 壁外的菌毛样结构含M蛋白 位于C抗原外层 具型特异性 有近100种血清型 M抗原与致病性有关 3 P抗原或称核蛋白抗原 无特异性 5 抵抗力 较金葡菌弱 一般链球菌均可在60 被杀死 对常用消毒剂敏感 在干燥尘埃中生存数月 乙型链球菌对青霉素 红霉素 四环素 杆菌肽和磺胺药都很敏感 A群链球菌有较强的侵袭力 产生多种外毒素和胞外酶 1 致病物质致病物质可分三大类 细菌的胞壁成分 胞壁上的粘附素外毒素胞外侵袭酶类 二 致病性与免疫性 1 胞壁成分 1 粘附素 包括 脂磷壁酸 lipoteichoicacid LTA 与生物膜有高度亲和力 是该菌定植在机体皮肤和呼吸道黏膜等表面的主要侵袭因素 F蛋白 proteinF 位于化脓性链球菌细胞壁内 其结合区暴露在菌体表面 是纤维粘连蛋白 fibronectin FBP 的受体 有利于细菌定植和繁殖 2 M蛋白 Mprotein 是A群链球菌的主要致病因子 含M蛋白的链球菌具有抗吞噬和抵抗细胞内杀菌作用 与心肌和肾小球基底膜有共同抗原 故与超敏反应疾病有关 3 肽聚糖A群链球菌的肽聚糖具有致热 溶解血小板 提高血管通透性和诱发实验性关节炎等作用 2 外毒素类 1 致热外毒素 pyrogenicexotoxin 是人类猩红热的主要毒性物质 致热外毒素抗原性强 具有超抗原作用 对兔有致热性和致死性 2 链球菌溶素 streptolysin 溶解红细胞 破坏白细胞和血小板 A族链球菌可分为两种溶血素 hemolysin 链球菌溶素O SLO 对哺乳动物多种细胞有毒性作用链球菌溶素S SLS 对白细胞和多种组织细胞有破坏作用 血清学检查 抗O试验 ASOtest 链球菌侵入体内产生SLO 刺激机体产生相应抗体ASO 检测这个抗体的实验称为抗O试验 风湿热患者体内的抗O抗体比正常人显著增高 大多在250单位 活动性风湿热一般超过400单位 3 侵袭性酶 invasiveenzyme A群链球菌可产生多种侵袭酶 均是扩散因子 1 透明质酸酶 hyaluronidase 分解间质内透明质酸 使病菌易扩散 2 链激酶 streptokinase SK 与葡激酶类似 使血液中纤维蛋白酶原变成纤维蛋白酶 溶解血块或阻止血浆凝固 利于病菌扩散 3 链道酶 streptodomase SD 亦称链球菌DNA酶 降解DNA 使脓液稀薄 促进病菌扩散 2 所致疾病 A群链球菌引起的疾病约占人类链球菌感染的90 淋巴管炎 蜂窝组织炎 扁桃体炎等 猩红热 3 超敏反应性疾病 1 化脓性感染 2 中毒性疾病 风湿热 急性肾小球肾炎 3 免疫性 可刺激机体产生各种抗体 获得对同型链球菌的特异性免疫力 型别间无交叉免疫 抗M蛋白抗体有保护作用 不同型M蛋白均可诱生 干扰素 猩红热患者可建立牢固的同型抗毒素免疫 标本 直接涂片镜检 革兰阳性链球菌 分离培养 脓汁 血液 咽喉拭子 与金葡菌的鉴别 与肺炎链球菌的鉴别 典型链球菌形态 典型的链球菌菌落 必要时做 生化反应或药敏实验等 三 微生物学检查法 积极治疗儿童链球菌感染 防止发生急性肾炎和风湿热 抗生素首选青霉素 用长效青霉素预防链球菌感染 对减少肾小球肾炎及风湿热的发生有一定效果 四 防治原则 二 其他链球菌 一 甲型溶血性链球菌 也称草绿色链球菌 streptococcusviridians 因无多糖抗原 故不属于Lancefield血清学分类的任何族 包括多个种 条件致病 可引起下列两种疾病 1 龋齿 dentalcaries 常由变形链球菌引起 2 亚急性细菌性心内膜炎 subacutebacterialendocarditis SBE 由此菌引起的SBE占全部病例50 二 B族链球菌又称无乳链球菌 可寄居于正常妇女阴道和直肠 也寄居在健康人鼻咽部 故可引起皮肤感染 心内膜炎 产后感染 新生儿败血症和脑膜炎 三 D族链球菌 条件致病菌 本菌包括粪链球菌 牛链球菌和马链球菌 D族链球菌正常寄居在皮肤 上呼吸道 消化道和泌尿生殖道 偶尔引起泌尿道感染 腹部化脓性感染 败血症和心内膜炎 身体虚弱和免疫功能低下者易感染 第三节肺炎链球菌S pneumoniae 在自然界广泛分布 常寄居于正常人的鼻咽腔中 形成带菌状态 在机体抵抗力下降时引起疾病 主要引起大叶性肺炎 约占细菌性肺炎的80 1 形态与染色 G 双球菌矛头状 平面相对 尖面相背 有厚荚膜 无芽胞 无鞭毛 一 生物学性状 2 培养特性 营养要求较高 常用血培养 菌落与甲链相似 能自溶 生化反应 分解葡萄糖 乳糖和菊糖 胆汁可溶菌 抵抗力 较弱 3 抗原结构 1 荚膜多糖抗原具有型特异性 可将肺炎链球菌分为型 2 其他抗原肺炎链球菌含有M蛋白和C多糖 C反应蛋白 Creactiveprotein CRP 不是抗体 在炎症活动期 如风湿热 含量增多 致病物质 荚膜 肺炎链球菌溶素O 脂磷壁酸 神经氨酸酶 所致疾病 免疫性 建立同型免疫 产生型特异的荚膜多糖抗体 大叶性肺炎 还可引起急性或慢性支气管炎 副鼻窦炎 中耳炎和儿童化脓性脑膜炎等 二 致病性与免疫性 1 直接涂片镜检 G 有荚膜的双球菌 2 分离培养 与甲链鉴别 菊糖分解试验胆汁溶菌试验Optochin敏感试验动物试验 肺炎球菌荚膜 1000 脐形 菌落 三 微生物学检查法 多价肺炎球菌荚膜多糖菌苗 预防 治疗 抗生素 四 防治原则 第四节奈瑟菌属Neisseria 奈瑟菌属对人有致病性的有脑膜炎奈瑟菌 N gonorrhoeae 和淋病奈瑟菌 N meningitidis 其余均为人类呼吸道正常菌群 偶而可引起脑膜炎和心内膜炎等 G 双球菌 无鞭毛 芽胞 有菌毛 典型细胞内寄生 一 脑膜炎奈瑟菌N meningitidis 1 形态与染色G 双球菌 肾形或豆形 无鞭毛 芽胞 有菌毛 2 分离培养专性需氧菌巧克力培养基 一 生物学性状 3 抗原构造与分类 荚膜多糖群特异性抗原分群外膜蛋白型特异性抗原分型脂多糖抗原核蛋白抗原 4 抵抗力 很弱四怕 热 寒冷 干燥 消毒剂 1 致病物质 主要是内毒素 2 所致疾病 呼吸道传播 飞沫或接触流行性脑脊髓膜炎 普通型暴发型慢性败血症型 三种临床类型 菌毛 粘附于黏膜上皮细胞 利于定植 IgA1蛋白酶 帮助细菌黏附细胞 LOS 是主要致病物质可作用于血管引起坏死出血 导致皮肤瘀斑和微循环障碍 严重者可致内毒素休克 血栓 DIC等 传染源 病人和带菌者 二 致病性与免疫性 三 免疫性 人对脑膜炎奈瑟菌抵抗力较强 机体感染后以体液免疫为主 血清中特异抗体能杀死脑膜炎奈瑟菌 抗体的调理作用能增强吞噬细胞的功能 分泌型IgA可阻止脑膜炎奈瑟菌对上呼吸道黏膜的粘附 母体中的IgG还可通过胎盘传给胎儿 故6个月内婴儿极少患流行性脑膜炎 二 致病性与免疫性 1 标本 3 分离培养与鉴定 脑脊液 血液 出血点渗出液 鼻咽拭子保暖 保湿 立即送检 培养基预温 2 直接涂片镜检 中性粒细胞内 外有革兰阴性双球菌 可作出初步诊断 巧克力 色 培养基 4 快速诊断 对流免疫电泳 SPA协同凝集试验 三 微生物学检查法 预防 儿童注射流脑荚膜多糖疫苗 治疗 抗生素 四 防治原则 二 淋病奈瑟菌N gonorrhoeae G 双球菌 似一对咖啡豆 有菌毛 有荚膜 专性需氧 巧克力血琼脂平板 2 培养特性 1 形态与染色 3 抵抗力 弱 热 冷 干燥和消毒剂极敏感 1 石炭酸3min或1 4000硝酸银2min即死亡 本菌能自溶 一 生物学性状 1 致病物质 菌毛 粘附作用 抵抗吞噬 外膜蛋白 P1破坏细胞膜 P2有助于粘附