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SYBRGreenI工作原理 未结合的SYBRgreenI 结合解离曲线识别不同的PCR产物 95 15sec 60 20sec 95 15sec在60 95 之间的Ramptime设为19 59 SYBRGreenI的特点 可以用于不同的模板使用方便 价格相对便宜灵敏度很高与非特异性产物结合解离曲线选择良好的引物和探针并优化反应条件 TaqManProbes TaqManProbes工作原理 随着扩增循环数的增加 TaqMan探针释放出来的荧光基团不断积累 因此荧光强度与扩增产物的数量呈正比关系TaqMan探针应用基因检测 病毒定量 细胞因子基因定量 癌细胞基因微突变检测等其结果都具有高特异性与高敏感性但只适合于一个特定的目标 TaqManMGB探针 因此 MGB探针可以比普通TaqMan探针设计得更短 既降低了合成成本 也使得探针设计的成功率大为提高 TaqManMGB探针对于富含A T的模板可以区分得更为理想 分子信标 发夹型杂交探针 分子信标工作原理 荧光基团 分子信标能特异性地检测感兴趣的目标DNA分子信标可用于单核苷酸多态性的检测特别适用于检测点突变只能用于一个特定的目标设计困难价格较高 常用的热循环仪 ABIPrism7700 可以在同一反应体系中同时对多个靶基因分子进行扩增一次可以测定96个样本 并且速度较快 一批样本的完成只需要2 3小时用于水解探针 双链DNA结合染料 分子信标的分析但是它
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