肿瘤治疗相关介绍.docx

肿瘤特异免疫治疗研究新趋向肿瘤免疫治疗研究在经历70年代的低谷后，80年代后期重新掘起。分子生物学的发展也促进肿瘤免疫学的发展。基因重组IL一2的间世使以LAK、TIL为效应细胞的过继免疫治疗得以发展，对一些常规疗法治疗失败的晚期病例取得了一定疗效。80年代末至90年代初，我国也广泛开展了以LAK为主的肿瘤生物治疗研究。1993年“第三届全国肿瘤生物治疗学术会议”几乎成为LAK研究的专题研讨会。经过几年实践，人们已清楚地认识到，以LAK为效应细胞的生物治疗除了对癌性积液消除效果较高外，对于恶性黑色素瘤、肾细胞癌、非何杰金氏淋巴瘤的有效率一般为20%30%左右，而对其他癌症疗效相对较差，甚至无效。过分夸大或完全否定LAK的治疗作用都不符合实际。去年10月在上海召开的“第四届全国肿瘤生物治疗学术会议”上出现了较多的以基因转导方法进行的肿瘤免疫研究，其研究内容、范围和水平都有了大幅度提高。 进入90年代以来，由于对肿瘤免疫排斥抗原的认识以及对抗原递呈和T细胞的识别机制研究的突破性进展，为制备肿瘤疫苗，肿瘤特异性主动免疫和过继免疫治疗奠定了基础。现在已知CDS+T细胞所识别的是蛋白一级结构中能与相应的MHCI类分子递呈抗原的槽状结合部位相匹配的小肤片段，一般由810个氨基酸组成。这种识别受MHC限制，所识别的是抗原小肤与MHCI类分子结合形成的复合物。 继MAGE一1发现之后，研究人员还找到了MAGE一2和MAGE一3等系列肿瘤抗原川。MAGE一2基因所编码的蛋白有67%与MAGE一1相同，它在黑色素瘤细胞中表达的阳性率高于MAGE一1，并且在小细胞肺癌、喉癌、卵巢癌、食管癌和肉瘤中也有表达。因此，在一定程度上它也可以被认为是肿瘤共同抗原。这样，MAGE小肤的应用范围被进一步扩大。 突变的癌基因产物可作为肿瘤排斥抗原。突变的癌基因K一ras常见于结直肠癌病人的癌组织中。人工合成PZI一ras的25肤中第13位甘氨酸突变为天冬氨酸的小肤(MTEYKLVvVGAGDVGKSAL-TIQLI)用HLA一DR和HLA-1殉相匹配的PBMC作为APC可诱导CD4+T细胞克隆增殖，而放射线灭活的HLA一A和一B相匹配的B淋巴母细胞系作为APC可诱导CDS+T细胞克隆增值。后者是IL一2依赖的，因无IL一2时不能引起抗原特异的增殖反应。 有的癌基因，如HERZ/neu，虽无突变，由于异常过度表达，也可成为诱导特异免疫反应的肿瘤抗原。己找到其中一段9肤GP一2(IisAvvGIL)，与HLA一AZ十APC结合后可诱导CTL活性，经过进一步修饰后小肤与HLA一AZ+亲和力提高了20倍，同时也显著增强了CTL对肿瘤的杀伤率。 突变的抑癌基因(如P53)或癌基因(如rasP21)产物也可作为肿瘤排斥抗原。根据人非小细胞肺癌系1272P53突变的情况合成的一个21肤，其中包含了第135位氨基酸残基由酩氨酸取代半胧氨酸的突变区，不必经胞内加工，只需与同基因A卫C表达的MHCI类分子结合，即可用于诱导特异的CTL。 树突状细胞(I兀)是最强的抗原递呈细胞，但难以大量获取。近期人们应用GM一csF和IL一4成功地从外周血中分离并扩增树突状细胞，为肿瘤抗原小肤的临床应用提供了APCc4)。有趣的是，研究人员发现应用HLA一AZ.l+健康人树突状细胞递呈HLA一2.1十恶性黑色素瘤3种相关靶抗原的小肚:gP100的YLEPGPVTA，酩氨酸酶的YMNGTM-SQV和MelanA/MART一1的AAGIGILTV，在体外分别对健康人外周血T细胞反复刺激，可产生相应的特异性CTL。因此，应用肿瘤相关排斥抗原小肤治疗时，APC和特异杀伤效应细胞前体既可来自肿瘤患者自身，也可来自MHCI类抗原相匹配的健康人.利用抗原小肤既可进行主动免疫治疗，又可和体外诱导扩增的特异CTL过继免疫治疗联合使用。 肿瘤免疫排斥抗原小肤一种可能采用的治疗途径是基因免疫。实验证明，鸡的卵清蛋白OvA257-264小肤(SllNFEKL)可被小鼠H一ZKb递呈。将该小肤基因插入痘苗病毒载体，经静脉注入C57BL/6小鼠免疫6天后的脾淋巴细胞即可特异地识别和杀伤OVA257一264小肤基因转导的EL4(H一Zb)胸腺瘤细胞株或该小肤在体外与EL4共育后的靶细胞。因此，应用肿瘤排斥抗原小肤的基因构建真核表达载体作体内免疫，可省去获取足够数量APC的烦琐步骤，在临床上使用更为简便.上述肿瘤抗原小肤的识别是受MHC限制的。 近几年人们也在摸索不受MHC限制，而能产生抗肿瘤免疫效果的方法。美国Baxter公司正在开发“T一bodies”治疗瘤症的新方法。其基本原理是将不受MHC限制的体液免疫中抗体识别系统与细胞免疫中活化T细胞的TCR受体系统相结合。具体作法是将针对肿瘤相关抗原的抗体的抗原识别区基因和T细胞受体TCR基因重组，构成嵌合T细胞受体基因，然后转导入肿瘤病人的淋巴细胞中表达。这样，可利用抗体对肿瘤的识别、导向，一旦与肿瘤结合便通过T细胞受体激活T细胞，进而产生杀伤肿瘤作用。因此，凡能被抗体识别的肿瘤即可用此法治疗，而不必考虑MHCI类分子是否匹配。 另一种不受MHC限制的肿瘤免疫方法是利用热休克蛋白(hsp).实验研究表明，细胞内被降解的内源性蛋白多肤片段最初不是与MHC结合，而是在胞浆内与hsp7o分子结合，继之经hsP90将多肚转运到内质网膜TAP分子处，然后传给内质网hsp(gp96)，最后由gp96将多肤传给MHCI类分子。 因此，热休克蛋白中hsp7o、hspgo、和gp96都有结合多肚的能力，它们是内源性抗原多肤的转运工具.因此，从肿瘤细胞中提取的hsP必然携带有肿瘤抗原肤。hsp也可能参与对多肤前体的进一步加工处理，使其更适于MHCI类分子递呈。实验证明，用SV4o转化的H一Zk小鼠细胞的gp96免疫H一Zb小鼠，能引起H一2“限制性抗原特异CTL应答，这种CTL的产生并未受到H一2“的限制。所以，用携带有肿瘤多肤的h，p制备瘤苗可以得到更广泛的应用.在肿瘤基因免疫治疗方面，研究较多的是应用各种细胞因子基因导入效应细胞或肿瘤细胞。从多因素考虑，采用多基因转导，如将MHC分子、共刺激分子和细胞因子基因联合导入，可能取得更好的效果。基因免疫治疗临床应用的一个重要问题是真核表达载体的高表达、可控性、导向性和安全性。研制好的基因免疫治疗载体是今后研究的重要内容。 以上所述是近年来肿瘤特异免疫治疗研究中有代表性的新趋