实验六 绞股蓝设计实验.ppt

实验六绞股蓝总皂苷的提取分离和鉴别 设计性试验 药物化学教研室 三叶绞股蓝 龙须绞股蓝 人参皂苷 一 实验目的 1 掌握D 101大孔吸附树脂分离纯化绞股蓝总皂苷的原理和实验操作方法 2 掌握查阅文献资料的方法和思路 3 熟悉皂苷类成分的性质及鉴别方法 二 仪器与试药 仪器D 101大孔吸附树脂玻璃层析柱 2 0 50 圆底烧瓶 1000mL SHB 循环水式多用真空泵锥形瓶 100mL 硅胶G 薄层层析用 滤纸研钵等等 试药绞股蓝药材乙醇蒸馏水盐酸氢氧化钠等 三 实验原理 大孔吸附树脂是一类有机高聚物吸附剂 它具有多孔网状结构和较好的吸附性能 为白色的球状颗粒 粒度多为20 60目 理化性质稳定 不溶于酸 碱及有机溶剂 对有机物的选择性较好 不受无机盐类及强离子低分子化合物存在的影响 在天然化合物的分离和富集工作中被广泛应用 通常分为非极性 弱极性 中极性和强极性等几大类 D 101大孔吸附树脂属于苯乙烯型非极性类 原理 吸附和分子筛以苯乙烯为母体 二乙烯苯为交联剂 非极性 树脂的预处理 无水乙醇浸泡 2BV 24h 湿法装柱 2BV 加等量水不变浑浊 BV 试剂 树脂体积比 水洗至无醇味 树脂的再生 4 HCl浸泡2 4h 水洗至中性 5 NaOH浸泡2 4h 水洗至中性 BV 试剂 树脂体积比 5 7BVHCl淋洗 5 7BVNaOH淋洗 影响因素 a 一般非极性化合物在水中易被非极性树脂吸附 极性化合物在水中易被极性树脂吸附 b 物质在溶剂中的溶解度大 树脂对此物质的吸附力就小 反之就大 c 能与大孔吸附树脂形成氢键的化合物易吸附 洗脱液的选择 最常用水 乙醇 此外甲醇 丙酮 乙酸乙酯也被应用 该技术目前已较广泛应用于中药新药的开发和中成药的生产和抗生素的分离精制 主要用于分离和提纯过程 基本程序 中药提取液 过大孔树脂 吸附有效成分 洗脱 洗脱液 回收溶液 药液有效成分 干燥 半成品 四 实验内容 一 绞股蓝总皂苷的提取分离和鉴别方法的实验设计 要求 1 查阅文献资料 综述绞股蓝提取 分离及鉴别方法 2 设计适合于本实验室操作的提取方法 至少两种方法 3 设计采用D 101大孔吸附树脂分离纯化绞股蓝总皂苷的实验方法和鉴别方法 至少两种方法 二 实验操作 要求 从设计的多种实验方法中选择最优的提取分离纯化及鉴别方案进行实验 确定绞股蓝总皂苷的提取分离工艺 具体路线图 绞股蓝 100g 加水1000mL 1h 残渣 水清液 适量水 0 5h 残渣 水清液 合并 水清液 浓缩至300 500mL 浓缩液 上柱 水洗 A 2mL min 15 EtOH洗 B 35 EtOH洗 C 50 EtOH洗 D 70 EtOH洗 E A B C D E分别合并 取12mL置蒸馏水中 水浴蒸干 加95 乙醇溶解 做TLC鉴别 正丁醇萃取 鉴别 鉴别 TLC鉴别硅胶G CMC Na板 展开剂 正丁醇 醋酸 水上层 4 1 5 显色剂 10 硫酸 乙醇液 化学检识醋酐 浓硫酸反应 五 实验结果 1 详细记录实验内容 2 详细记录定性鉴别结果 并绘制色谱图 计算Rf值 3 总结实验过程中遇到的问题和解决方法 六