色谱概论(2).ppt

1 色谱定性定量分析一 定性分析1 与纯物质直接对照定性 1 利用保留值定性 2 利用加入纯物质峰高增加定性2 利用文献保留数据定性 1 利用相对保留值定性 2 利用文献保留指数定性 2 3 利用保留值的经验规律定性 1 利用碳数规律定性 2 利用沸点规律定性 4 与质谱 红外光谱联用定性 定量分析依据 i为组分i的质量 Ai为组分i的峰面积 i为组分i的响应值 fi为组分i的绝对校正因子 峰面积的测量 3 峰面积的测量方法 1 峰高乘半峰宽法 对称峰面积 2 峰高乘平均峰宽法 不对称峰面积 3 剪纸称重法 4 自动积分法 5 峰高定量法 真实面积 乘1 065 相对面积 峰高乘半峰宽 峰高0 15和0 85处的峰宽平均值乘峰高 4 定量校正因子 1 绝对质量校正因子 2 相对质量校正因子 i为组分i的质量 Ai为组分i的峰面积 As为标准物S的峰面积 fi为组分i的绝对校正因子 fs为标准组分S的绝对校正因子 Fi s为相对质量校对因子 为使检测器产生的响应信号能真实地反映出物质的量 比例系数fi 绝对校正因子为单位面积对应的物质量 5 相对校正因子的测量 准确称取被测组分和标准物质 混合后在一定色谱条件下 准确进样 分别准确测量相应的峰面积 根据上式计算 6 相对响应值 相对响应值指组分i与等量标准组分S的响应值之比 它与相对校正因子互为倒数 Si Ai As fi 1 Si 7 几种常用的定量方法 归一化法 以试样中所有组分含量之和为1 测定计算被测组分含量的定量分析方法 所有物质都出峰 且含量都在同一数量级上 Fi为组分i的相对质量校对因子 Ai为组分i的峰面积 ci为试样中组分i的百分含量 8 内标法 定义 以样品中不含的标准品 内标物 加到样品中作对照物质 对比求算待测组分含量的方法 如何操作 在用内标法做色话定量分析时 先配制不同重量比的被测组分和内标样品的混合物做色谱分析 测量峰面积 做重量比和面积比的关系曲线 此曲线即为标准曲线 在实际样品分析时所采用的色谱条件应尽可能与制作标准曲线时所用的一致 如何选择内标物 1 试样中不含有该物质 2 与被测组分性质比较接近 3 不与试样发生化学反应 4 出峰位置应位于被测组分附近 9 外标法 标准曲线法 定义 用待测组分的纯品作对照物质 以对照物质和样品中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法 如何操作 用对照物质配制一系列浓度的对照品溶液确定工作曲线 求出斜率 截距 在完全相同的条件下 准确进样与对照品溶液相同体积的样品溶液 根据待测组分的信号 从标准曲线上查出其浓度 或用回归方程计算 工作曲线法也可以用外标二点法代替 特点 操作和计算简便 不必用校正因子 但要求色谱操作条件稳定 进样重现性好 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 本章要求 1 了解色谱分析法的起源和发展概况 掌握色谱法的分类方法和基本术语 2 掌握色谱基本定性和定量参数的意义 计算方法及其影响因素 掌握分配系数与保留行为的关系 3 掌握塔板理论和速率理论的基本原理和应用方法 学会应用塔板理论计算柱效 理论塔板数参数 20 基本概念 保留时间 tR 死时间 t0 调整保留时间 tR 保留体积VR死体积V0调整保留体积 VR 标准差 半峰宽 W1 2 峰宽 W 容量因子 k 理论塔板高度 H 与理论塔板数 n 涡流扩散项 纵向扩散项 传质阻力项 分离度 21 主要计算公式 容量因子k 分配系数K 分配系数比k 调整保留时间tR 调整保留体积VR 分配系数和保留行为的关系理论塔板数和有效理论塔板数分