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文档简介

教师备选题库1(2011浙江高考)将ada(腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是()A每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒B每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点C每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个adaD每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子解析:选C每个限制酶识别位点处只能插入一个ada,插入的ada成功表达,说明每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子。2(2010全国卷)下列叙述符合基因工程概念的是()AB淋巴细胞与肿瘤细胞融合,杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因B将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌,获得能产生人干扰素的菌株C用紫外线照射青霉菌,使其DNA发生改变,通过筛选获得青霉素高产菌株D自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上解析:选B基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术,是一种人为的操作过程。A项属于细胞工程;B项符合基因工程的概念;C项属于诱变育种;D项是自然发生的,不是人为操作的,不属于基因工程。3(2010浙江高考)在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中,下列操作错误的是()A用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸B用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体C将重组DNA分子导入烟草原生质体D用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞解析:选A限制性核酸内切酶切割的是DNA,而烟草花叶病毒的遗传物质为RNA;目的基因与载体的连接由DNA连接酶催化连接;受体细胞为植物细胞,所以可以是烟草原生质体;目的基因为抗除草剂基因,所以筛选的时候应该用含除草剂的培养基筛选转基因细胞。4下列关于基因工程的叙述,错误的是()A目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物B限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶C人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性D载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达解析:选D目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物;基因工程中常用的工具酶有限制性核酸内切酶和DNA连接酶;大肠杆菌为原核生物,不含有内质网和高尔基体等细胞器,不能对蛋白质进行加工,其合成的胰岛素原无生物活性。运载体中的抗性基因为标记基因,其作用是有利于筛选含重组DNA的细胞,但不能促进目的基因的表达。5降钙素是一种多肽类激素,临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低,半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素,从预期新型降钙素的功能出发,推测相应的脱氧核苷酸序列,并人工合成了两条72个碱基的DNA单链,两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段,再利用Klenow酶补平,获得双链DNA,过程如下图:获得的双链DNA经EcoR(识别序列和切割位点 GAATTC)和BamH(识别序列和切割位点 GGATCC)双酶切后插入大肠杆菌质粒中。下列有关分析错误的是()AKlenow酶是一种DNA聚合酶B合成的双链DNA有72个碱基对CEcoR和BamH双酶切的目的是保证目的基因和运载体的定向连接D筛选重组质粒需要大肠杆菌质粒中含有标记基因解析:选B合成的单链DNA有72个碱基,从题图看出两条单链并未左右两端对齐配对,只通过18个碱基对形成部分双链DNA片段,因此获得的双链DNA有碱基对727218126个碱基对。6(2011江苏高考)请回答基因工程方面的有关问题:(1)利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如图所示)。图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为_。在第_轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图),请分别说明理由。第1组:_第2组:_(3)PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶,下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能,这是因为_。(4)用限制酶EcoRV、Mbo单独或联合切割同一种质粒,得到的DNA片段长度如图(1 kb即1000个碱基对),请在指定位置画出质粒上EcoRV、Mbo的切割位点。解析:(1)根据PCR过程的特点绘制PCR过程示意图如图所示,由图可知,由原来的每条母链为模板合成的两个新DNA分子中,只含有引物A或引物B,而以新合成的子链为模板合成新DNA分子时,两种引物都含有,故第四轮循环共产生16个DNA分子,其中含有引物A的分子是15个,占15/16。由图示可知,第一、二轮循环合成的子链长度均不同,根据半保留复制特点可知,前两轮循环产生的四个DNA分子的两条链均不等长,第三轮循环产生的DNA分子存在等长的两条核苷酸链,如图。(2)在第1组引物中,引物的部分碱基序列是CAGGCT,引物的部分碱基序列是AGCCTG,若利用这两个引物进行DNA扩增,会因其中的部分碱基发生碱基互补配对而使引物失效。在第2组引物中,引物的部分碱基序列是AACTG和CAGTT,该引物一旦发生自身折叠,也将会出现部分碱基发生碱基互补配对而使引物失效。(3)图中直接将两个脱氧核苷酸合成DNA单链,这不是DNA聚合酶的功能。DNA聚合酶只能在DNA模板存在的条件下,将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上。(4)根据图示,该质粒为环形质粒。用限制酶EcoR单独切割该质粒时,只形成一个片段,说明该质粒上只有1个限制酶EcoR的识别位点。用限制酶Mbo单独切割该质粒时,形成两个片段,说明该质粒上有两个限制酶Mbo的识别位点。用限制酶EcoR和Mbo联合切割该质粒时,形成三个片段,其中有一个片段的长度与用Mbo单独切割该质粒时产生的片段长度相同(2.5 kb),另外的两个片段是5.5 kb和6 kb,这说明限制酶EcoR的切割位点存在于用Mbo单独切割该质粒时产生的另一片段(11.5 kb)上。答案:(1)15/16三(2)引物和引物局部发生碱基互补配对而失效引物自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效(3)DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上(4)见右图7如图表示运用基因工程技术生产胰岛素的三条途径。据图结合所学知识回答下列问题:(1)为了便于将含有目的基因的细胞筛选出来,所选择的质粒上应该具有_。(2)培育转基因羊的过程中,科研人员通过感染或_技术将重组质粒M转移到受体细胞A中,受体细胞A应该是_细胞。过程中还用到了_技术。(3)受体细胞B应该是莴苣的_(填“体细胞”“卵细胞”或“受精卵),导入该细胞后,需对该细胞进行培养,经_过程形成愈伤组织。(4)莴苣为双子叶植物,过程常用的方法是_;过程常用的方法是用_来处理大肠杆菌,使其易于吸纳重组质粒M。解析:(1)质粒上有标记基因,便于筛选。(2)由于受精卵全能性最高,且体积较大便于操作,因此培育转基因羊时,常用显微注射技术将重组质粒导入受精卵,然后用动物细胞培养技术获得早期胚胎,然后用胚胎移植技术将早期胚胎植入母体子宫,发育为新个体。(3)培育卵细胞得

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