ACTL肿瘤靶向治疗技术介绍.docx

ACTL肿瘤靶向治疗技术介绍ACTL简介ACTL，即特异杀伤性T细胞。是通过抽取患者少量的外周血，分离免疫细胞，以携带肿瘤相关抗原决定簇基因的重组腺相关病毒转染树突状细胞，在体外与患者T淋巴细胞共培养，刺激产生特异杀伤某种或数种肿瘤相关抗原阳性的肿瘤细胞的细胞毒性T淋巴细胞(Antigen Cytotoxic Lymphocyte, ACTL)。ACTL不仅能够直接定向杀伤肿瘤细胞，而且可杀伤肿瘤新生血管内膜细胞，达到封闭肿瘤新生血管而间接杀伤肿瘤细胞作用。ACTL治疗肿瘤的机理以重组腺相关病毒(Recombinant adeno-associated virus, rAAV)感染树突状细胞(Dendritic cells, DC)为基础的肿瘤细胞靶向治疗技术(ACTL )，是将无致病性的野生型腺相关病毒(Adeno-associated virus, AAV) 通过基因重组技术改建为携带特定肿瘤相关抗原决定簇基因的重组腺相关病毒，感染患者的外周血单核细胞 (Monocytes. Mo)，经细胞因子诱导，单核细胞转化为具有强大抗原提呈功能的DC。如图一所示，经本专利技术获得的DC 可刺激产生有效杀伤肿瘤细胞的特异杀伤性T 淋巴细胞(Cytotoxic T lymphocytes, CTL)。所产生的CTL 具有肿瘤抗原特异性，即靶向性。DC 刺激产生的CTL 仅针对某种或数种肿瘤相关抗原阳性的肿瘤细胞以及PSMA 阳性的肿瘤新生血管内皮细胞具有杀伤作用，对抗原阴性的细胞无任何作用。ACTL采用携带肿瘤抗原基因的重组腺相关病毒能够高效率地感染人树突状细胞(DC)，感染效率高达95%。而传统的以蛋白或多肽感染人树突状细胞(DC)的效率较低，在15%以下。被感染的树突状细胞在体外能够有效地激活T淋巴细胞，产生ACTL，而且数量达109以上。而传统的DC细胞在体内激活T淋巴细胞，但受限于患者的免疫系统微环境，使得DC细胞激活T细胞效率较低。 ACTL治疗的适应症一、肿瘤标志物或免疫组化检测的某种或数种肿瘤相关抗原为阳性(参见肿瘤患者筛选标准);二、肿瘤组织的HLA-类抗原阳性;三、停止化疗或放疗，外周血细胞恢复至正常值或接近正常值(使用升白细胞药物达到的正常值除外);四、无重度贫血，全身器官衰竭和恶病质状态;五、肝肾功能正常，生命体征基本正常;六、无严重过敏体质;七、瘤负荷量不大。患者符合以上条件即可接受ACTL治疗。ACTL治疗肿瘤的优势ACTL具有以下优势：1.疗效确切ACTL特异杀伤性T细胞治疗机理明确，具有高效率连续杀伤癌靶细胞的强大功能，临床疗效可进行影像学、血清肿瘤标志物、生活质量、生存时间等客观指标评价。2.可逆转分子靶向药的耐药性ACTL特异杀伤性T细胞不仅有可能逆转妇科和前列腺等恶性肿瘤对抗激素治疗产生的耐药性，而且有可能逆转肿瘤细胞对易瑞沙、阿瓦斯丁等生物靶向药物治疗的耐药性。(详见研究部分)3.无毒副作用ACTL特异杀伤性T细胞具有抗原特异性，即靶向性。仅针对某种或数种肿瘤相关抗原阳性的肿瘤细胞以及PSMA阳性的肿瘤新生血管内皮细胞具有杀伤作用，对正常细胞无损伤作用。ACTL肿瘤治疗技术的具体治疗流程第一步：抽取肿瘤患者静脉外周血(50-150毫升)或采用血细胞分离机直接分离出外周血单个核细胞(PBMC)。第二步：经培养，PBMC被分离为淋巴细胞和单核细胞，淋巴细胞继续培养，备用。rAAV病毒感染单核细胞，并以细胞因子诱导成熟的树突状细胞(DC)产生。将成熟的DC与淋巴细胞混合培养，使淋巴细胞诱导成为具有抗原特异性的、杀伤抗原阳性肿瘤细胞的细胞毒性T淋巴细胞(ACTL)，最后，将被激活的ACTL细胞回输给肿瘤患者。整个过程需要12-14天。ACTL治疗肿瘤的效果已经接受治疗的患者初步观察的结果表明，治疗效果令人满意。这些患者绝大多数为IV 期的癌症患者，并经过化学治疗，放射治疗，激素治疗或其它治疗无效或复发。在接受三个月以上的ACTL治疗后，大多数患者的临床症状有不同程度的缓解，例如已经发生骨转移的前列腺癌或乳腺癌患者的骨疼痛明显缓解或消失。经治疗，绝大多数患者的血清肿瘤标记物均有不同程度的下降，甚至恢复正常。而且更为重要的是大多数患者治疗后的CT、PET-CT 以及骨扫描等物理检查结果表明，转移病灶均有不同程度的减少甚至消失，尤其是针对淋巴结转移病灶效果明显(见下图1)。经初步观察，经治疗有效的患者，首先表现在淋巴结转移病灶消失。在治疗期间，患者的生活质量得到保障，死亡率明显低于其它治疗方法。在治疗期间，无一例患者因不能耐受而退出治疗。因此，我们认为如果癌症患者尚未处于晚期阶段(IV 期以下)，可能治疗效