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第2课时无菌技术及大肠杆菌的培养和分离的实验操作基础达标知识点一无菌技术1将配制好的培养基进行灭菌应用()A灼烧灭菌B高压蒸汽灭菌C干热灭菌D煮沸灭菌2下列操作与消毒灭菌无关的是()A接种前用肥皂洗双手,再用酒精擦拭双手B接种前用火焰灼烧接种针(环)C培养基在50 左右时搁置斜面D在酒精灯的火焰旁完成倒平板的操作3对无菌操作转接培养物的叙述,正确的是()接种环在火焰上灼烧灭菌在火焰旁冷却接种环,并打开棉塞打开棉塞的试管口通过火焰将已冷却的接种环伸入菌液,蘸取一环菌液转移到一装有无菌培养基的试管中将试管口塞上棉塞 接种环进行消毒ABCD知识点二大肠杆菌培养和分离的实验操作4防止杂菌入侵,获得纯净的培养物,是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是()A实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒B接种环、接种针等金属用具,直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌C在实验室中,切不可吃东西、喝水,离开实验室时一定要洗手,以防止被微生物感染D使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理,以免污染环境5获得纯净培养物的关键是()A将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌B接种纯种细菌C适宜环境条件下培养D防止外来杂菌的入侵6用涂布平板法来统计样品中的活菌数时,通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数。原因是()A平板上的一个菌落就是一个细菌B菌落中的细菌数是固定的C此时的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌D此方法统计的菌落数一定与活菌的实际数相同7微生物培养过程中,肉眼鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据是()A细菌的大小、形状、颜色B菌落的大小、形状、颜色C有无鞭毛D培养基的不同8在接种操作的过程中,不正确的是()A要将接种环灼烧灭菌B取下棉塞后要将试管口灼烧灭菌C将接种环伸入试管内,先接触长菌多的部位D接种后还要将管口灭菌加塞能力提升9有关划线分离法操作的叙述,正确的是()A使用已灭菌的接种环、培养皿,操作过程中不再灭菌B打开含菌种的试管需通过火焰灭菌,取出菌种后需马上塞上棉塞C把皿盖打开,将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线即可D最后将平板倒置,放入培养箱中培养10下列为某同学在培养金黄色葡萄球菌实验中的部分操作步骤,其中正确的是()A培养基中蛋白胨、牛肉膏溶化后,直接补充蒸馏水至100 mLB培养基配制完毕可直接使用C加压至100 kPa之前,要彻底排出锅内的冷空气D将接种环放在酒精灯火焰上灼烧,灭菌后立即伸入菌液试管内挑取少量菌种11若某一稀释度下,平板上生长的平均菌落数为80,涂布平板时所用的稀释液体积为0.1 mL,稀释液的稀释倍数为106,则每克样品中的活菌数约为()A8108B8107C8105D810612巴氏消毒法常用于酒、奶等食品的消毒,该消毒法就是加热到7075 、保持30 min,或加热到80 、保持15 min,能杀死一般杂菌和病原菌。与灭菌的要求相比,巴氏消毒法()A不能杀灭芽孢等耐高温的细菌B能杀灭芽孢等休眠状态的细菌C能杀灭各种细菌,包括芽孢D能杀灭各种真菌,包括孢子13从自然菌样中筛选较理想菌种的一般步骤是:采集菌样富集培养纯种分离性能测定。(1)不同微生物的生存环境不同,获得理想菌种的第一步是从适合的环境采集菌样,然后再按一定的方法分离、纯化。培养耐盐菌的菌样应从_环境中采集。(2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件,使其在群落中的数量大大增加,从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择_的培养基,并在_条件下培养。(3)下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解,请分析接种的具体方法。获得图A效果的接种方法是_,获得图B效果的接种方法是_。(4)配制培养基时各种成分在融化后分装前必须进行_,接种前要进行_。在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在_条件下进行。14有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题:(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以_为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲,该培养基属于_培养基。(2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即_和_。(3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力_。(4)通常情况下,在微生物培养过程中,实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_和_。无菌技术要求实验操作应在酒精灯_附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。个性拓展15下表为牛肉膏蛋白胨培养基的成分列表,据此回答:成分牛肉膏蛋白胨NaClH2O含量0.5 g1 g0.5 g100 mL(1)蛋白胨在培养基中的作用是_。(2)要用此原料配制观察细菌菌落状况的培养基,还需添加的成分是_。(3)表中各成分含量确定的原则是_。(4)培养基配制好后,分装前应进行的工作是_。(5)从配制培养基直到培养完成,所采用的预防杂菌感染的方法是_。(6)在培养基凝固前要搁置斜面,其目的是_。答 案1B2.C3.C 4B5D6.C 7B8C 10C11A12A13(1)高盐(2)以淀粉为唯一碳源高温 (3)涂布平板法划线分离法 (4)pH调整高压蒸汽灭菌无菌14(1)原油选择(2)划线分离法涂布平板法 (3)强
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