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血液安全与病毒灭活 主要内容 输血的风险减少输血传播疾病的方法 血浆病毒灭活 与输血相关的危险 输血不良反应输血传播性疾病 输血不良反应的分类 按原因 免疫性输血反应非免疫性输血反应输血传播性疾病按时间 急性输血反应迟发性输血反应 与输血相关的危险 输血反应由免疫介导的急性输血反应 急性溶血性输血反应 AHTR 过敏反应 非溶血性发热反应 FNHTR 输血相关急性肺损伤 TRALI 由免疫介导的迟发性输血反应有 迟发性溶血反应 DHTR 输血相关的移植物抗宿主病 TA GVHD 输血后紫癜 PTP 等与输血相关的免疫抑制 一 由免疫介导的急性输血反应 急性溶血性输血反应 AHTR 过敏反应 最常见非溶血性发热反应 FNHTR 输血相关急性肺损伤 TRALI 二 由免疫介导的迟发性输血反应 迟发性溶血反应 DHTR 输血相关移植物抗宿主病 TA GVHD 输血后紫癜 PTP 等 输血不良反应 三 与输血相关的免疫抑制 与输血相关的危险 输血不良反应四 非免疫介导的急性输血反应有 细菌污染所致的发热反应 循环超负荷所致的充血性心衰 大量输血所致的高血钾 枸橼酸中毒所致的低血钙症 体温降低 气栓等 五 非免疫介导的迟发性输血反应有 长期输血所致的含铁血黄素沉着症和血栓性静脉炎等 输血传播性疾病病毒感染 HAV HGV HIV CMV HTLV 人细小病毒B19等脂质包膜病毒HBV HCV HIV的危害最大寄生虫感染 疟原虫 巴贝虫 南美洲锥虫等其它经输血传播的疾病 梅毒 细菌污染 与输血相关的危险 输血感染的危险检测方法和试剂的灵敏度检验员的水平和责任心新病毒和未检测病毒病毒感染的 窗口期 病毒窗口期 天 HIV22 11 HCV70 23 HBV56 41 与输血相关的危险 NationalHaemovigilanceProgrammeAug2002 Jun2006 Totalreportedcases 2 264 减少输血传播性疾病的方法 减少不必要的输血 提倡成分输血规范采供血及输血管理从低危人群采血 无偿自愿改善检测方法 提高试剂的灵敏度增加检测项目 新病毒层出不穷提高检验人员的水平和责任心 规范化操作血液成分病毒灭活开发血液代用品 规范采供血及输血管理 中华人民共和国献血法1998医疗机构临床用血管理办法1999临床输血技术规范2000血站基本标准2000血站管理办法2006血站质量管理规范2006血站实验室质量管理规范2006 减少输血传播疾病的方法 根本对策 血液成分病毒灭活开发血液代用品血液白细胞滤除 病毒灭活 从根本上解决输血传播病毒的风险会对血液成分造成部分损失 巴斯德消毒法 保护剂 60 10h 人血白蛋白制品有机溶剂 洗涤剂 S D 法 混合血浆TNBP 磷酸三丁脂 TritonX 100 聚乙二醇辛基苯基醚 30 4h植物油萃取或固相层析出S D干热法 冻干制品 加热 小时 膜过滤法低 孵放法 如 光化学法 光敏剂 光照 病毒灭活的方法 光化学方法灭活病毒的机制 主要是依靠光敏剂在光照下产生的单线态氧或自由基氧化损伤病毒的分子结构 从而杀灭病毒 各种光敏剂的作用特点不尽相同 如补骨脂内酯衍生物主要产生自由基 一类机制 酞菁类光敏剂主要产生单线态氧 二类机制 而酚噻嗪类光敏剂可能同时涉及两类机制 例如单线态氧和光敏剂介导的自由基可能都参与了亚甲兰 MB 光化学处理对病毒的灭活 我们生物体系主要的自由基是氧自由基 例如超氧阴离子自由基 羟自由基 脂氧自由基 二氧化氮和一氧化氮自由基 加上过氧化氢 单线态氧和臭氧 通称活性氧 光化学法 红细胞病毒灭活 血卟啉 酞菁类化合物 酚噻嗪类化合物 DMMB 血小板 白细胞病毒灭活 补骨脂 UVA血浆 亚甲兰 MB 可见光照射 MBP 紫外线UVA波段 波长320 400nm 又称为长波黑斑效应紫外线UVB波段 波长275 320nm 又称为中波红斑效应紫外线UVC波段 波长200 275nm 又称为短波灭菌紫外线UVD波段 波长100 200nm 又称为真空紫外线 亚甲蓝光化学灭活血浆病毒 亚甲蓝 MB 光化学灭活血浆病毒是一种最安全 有效的适合于临床用单袋血浆病毒灭活的方法 其原理 MB是一种光敏剂 其最大吸收波长为600 700nm MB与病毒的基因核酸以及病毒的脂质包膜相结合 在可见光 光诱导 氧化损伤的作用下 使病毒核酸断裂 亚甲蓝与病毒核酸的鸟嘌呤结合 在可见光的作用下 引起脱嘌呤和核酸链的断裂阻止其逆转录及DNA复制 包膜破损 从而使病毒完全失去穿透 复制及感染能力 亚甲蓝 亚甲蓝 methyleneblue 化学名 氯化 3 7 双 二甲胺基 吩噻咛 5 鎓三水化合物分子式 C16H18ClN3S 3H2O 分子量 373 9临床用于亚硝酸盐中毒 氰化物中毒 药代动力学 亚甲蓝静注后作用迅速 基本不经过代谢即随尿排出 口服在胃肠道的pH条件下可被吸收 并在组织内迅速还原为白色亚甲蓝 在6天内74 由尿排出 其中22 为原形 其余为白色亚甲蓝 且部分可能被甲基化 少量亚甲蓝通过胆汁 由粪便排出 亚甲蓝光照灭活血浆病毒的发展 1966年Pohl和Mohl发表了使用亚甲蓝和光照灭活病毒血浆的临床经验 1991年使用吩噻嗪类染料结合可见光对袋装血浆病毒灭活的方法被报导 自1993年起用亚甲蓝灭活病毒的方法已在德国 瑞士等国的许多红十字会输血中心使用 收到良好的临床效果 尚未发现明显的负面反应 2001亚甲蓝灭活病毒的方法在上海血液中心研制成功 获得国家专利 并应用于临床 目前 国内大部分血液中心和中心血站已开展此项目 亚甲蓝光化学灭活的病毒 病毒基因组脂包膜大小 nm HIVRNA有80 100HBVDNA有45HCVRNA有40 60HAVRNA无27B19DNA无20 质量指标 经MB法灭活病毒后血浆的主要质量指标 1 处理前后血浆性质不变 色泽无明显变化2 血浆主要凝血因子回收率 80 3 白细胞去除率 99 9 4 总蛋白回收率 80 0 5 光敏剂残留率 15 0 国内已做到 6 6 病毒灭活系数 6Log10 安全性 每100ml血浆的亚甲蓝用量为40ug 经过滤去除85 后 残留6ug 国内产品的残留量已达到4ug亚甲蓝注射液临床用量 亚硝酸盐中毒 一次按体重1 2mg kg 120mg 氰化物中毒 一次按体重5 10mg kg 最大剂量为20mg kg 患者输注1000毫升血浆所接受的亚甲蓝剂量约为40ug 仅相当于一次甲状腺造影的四千分之一 一次亚硝酸盐中