《药物分析与检验》总课件.ppt

1 药品质量检测技术 第一章绪论 2 第二章药典基本知识 基本要求 一 掌握中国药典的基本内容 二 了解常用的国外药典 练习与思考 3 药典 药典是一个国家关于药品标准的法典 是国家管理药品生产与质量的依据 药典由国家药典委员会编纂 国家药品监督管理局批准并颁布实施 4 美国药典 ThePharmacopoeiaoftheUnitedStatesofAmerica USP 英国药典 BritishPharmacopoeia BP 日本药局方 JP 欧洲药典 EuropeanPharmacopoeia Ph Eur 国际药典 TheinternationalPharmacopoeia Ph Int 北欧药典 亚洲药典 等 第一节常用的国外药典 5 美国药典 USP USP于1820年出第一版 1950年以后每5年出一次修订版 2000年第24版 美国国家处方集 TheNationalFormulary 缩写为NF 1883年第一版 从1975年开始 USP与NF合并 1980年开始出合订本 缩写为USP X NF Y 但仍分两部分 前面为USP 后面为NF 从2002年开始USP NF将原来的每5年一版改为每年出一个新版本 最新版本为USP 30 NF 25 6 英国药典 BP 始于1618年 近现代世界上最早的药典 是英国制药标准的重要来源 英国药典不仅提供了药用和成药配方标准以及公式配药标准 而且也展示了许多明确分类并可参照的欧洲药典专著 英国药典出版周期不定 最新版本BP 2007 7 日本药局方 JP 1886年 日本政府发行了首部日本 药局方 1948年 日本出版了国民药品集 其性质相当于美国国家处方集 1960年 药局方和国民药品集统一为药局方 此后 日本药局方都分两部出版 第一部主要收载原料药及其基础制剂 第二部主要收集生药 家庭药制剂和制剂原料 直到1981年发行的第十改正版 分两部出版的药局方改成了合订本 最新版本 第十五改正版JP 15 8 欧洲药典 Ph Eur 1977年出版第一版 欧洲药典 从1980年到1996年期间 每年将增修订的项目与新增品种出一本活页本 汇集为第二版 欧洲药典 各分册 未经修订的仍按照第一版执行1997年 第三版 欧洲药典 出版2001年 第四版 欧洲药典 出版2004年 第五版 欧洲药典 出版2007年 第六版 欧洲药典 出版 9 国际药典 Ph Int 由联合国世界卫生组织WHO主持编订 第一版于1951和1955年分两卷出版 第二版于1967年出版 第三版目前有5卷国际药典更多关注发展中国家的需要 并且只推荐已被证明合理有效的 经典的化学技术 在世界范围内广泛应用的药物被优先考虑分析方法上尽可能采用经典的方法以便在没有昂贵设备的情况下也能进行 10 第二节中国药典 中国药典 英文缩写 Ch P 的沿革我国建国后先后出版了八版药典 1953 1963 1977 1985 1990 1995 2000 2005年版现行中国药典为2005年版 2005 7 1开始实施1953年版 共一部 收载药品531种1963 2000年版 分一 二两部一部 中药材 中药成方制剂二部 化学药品及其制剂 11 中国药典2005年版 分三部 一部收载药材及饮片 植物油脂和提取物 成方制剂和单味制剂等 收载品种1146种 二部收载化学药品 抗生素 生化药品 放射性药品以及药用辅料等 收载1967种 其中新增327种 三部收载生物制品 首次将 中国生物制品规程 并入药典 收载101种 其中新增44种 12 中国药典的内容 凡例 解释和使用药典的指导原则 正文 具体品种的质量标准 附录 共16部分 索引 中文 英文 13 中国药典配套使用的相关书籍 临床用药须知 药品红外光谱集 中药彩色图集 中药薄层彩色图集 中国药品通用名 14 凡例是制定和执行药典必须了解和遵循的法则 解释和说明 中国药典 概念 正确进行质量检验提供指导原则 将正文 附录及质量检定有关的共性问题加以规定 避免全书中重复说明 其内容同样具有法定约束力 名称及编排 标准规定 生物制品 检验方法和限度 残留溶剂 标准品 对照品 试药 试液 共28条款计量 指示剂 动物实验 精确度 包装 标签 一 凡例 15 中文药名 照 中国药品通用名称 命名名称及编排英文药名 采用国际非专利药品命名原则 INN 有机药物化学名 采用 有机化学命名原则 16 项目与要求 药品标准中 溶解度 项下的规定 极易溶解系指溶质1g 1ml 能在溶剂不到1ml中溶解 易溶系指溶质1g 1ml 能在溶剂1 不到10ml中溶解 溶解系指溶质1g 1ml 能在溶剂10 不到30ml中溶解 略溶系指溶质1g 1ml 能在溶剂30 不到100ml中溶解 微溶系指溶质1g 1ml 能在溶剂100 不到1000ml溶解 极微溶解系指溶质1g 1ml 能在溶剂1000 不到10000ml中溶解 几乎不溶或不溶系指溶质1g 1ml 在溶剂10000ml中也不能完全溶解 试验法 除另有规定外 称取研成细粉的供试品或量取液体供试品 置于25 2 一定容量的溶剂中 每隔5分钟强力振摇30秒 观察30分钟内的溶解情况 如看不见溶质颗粒或液滴时 即视为完全溶解 17 项目与要求 药品标准中 贮藏 项下的规定 是指对药品贮存与保管的基本要求 以下列名词表示 避光系指用不透光的容器包装 例如棕色容器或黑纸包裹的无色透明 半透明容器 密闭系指将容器密闭 以防止尘土及异物进入 密封系指将容器密封以防止风化 吸潮 挥发或异物进入 熔封或严封系指将容器熔封或用适宜的材料严封 以防止空气与水分的侵入并防止污染 阴凉处系指不超过20 凉暗处系指避光并不超过20 冷处系指2 10 常温系指10 30 新增 药品应按质量标准中规定的条件贮藏 以免因贮藏不当而影响质量 18 检验方法 采用其他方法时 应与药典方法作比较试验 在仲裁时 应以药典方法为准 限度 标准中规定的各种纯度和限度数值以及制剂的重 装 量差异 系包括上限和下限两个数值本身及中间数值 规定的这些数值不论是百分数还是绝对数字 其最后一位数字都是有效位 计算时可多保留一位 检验方法和限度 19 检验方法和限度 原料药的含量 除另有注明者外 均按重量计 如规定上限为100 以上时 系指用本药典规定的分析方法测定时可能达到的数值 它为药典规定的限度或允许偏差 并非真实含有量 如未规定上限时 系指不超过101 0 制剂的含量限度范围 系根据主药含量的多少 测定方法 生产过程和贮存期间可能产生的偏差或变化而制定的 生产中应按标示量100 投料 20 标准品 对照品与试药的区别标准品 是指用于生物鉴定 抗生素或生化药品中含量测定或效价测定的标准物质 按效价单位 或 g 计 以国际标准品进行标定 对照品 指在用于检测时 除另有规定外 均按干燥品 或无水物 进行计算后使用的标准物质 用于药物含量测定 纯度检查和鉴别试验 21 计量单位 长度 m cm mm nm 体积 L ml 重量 kg g 压力 Pa kPa Mpa 黏度 波数 计量 22 计量 本版式药典使用的滴定液和试液的浓度 以mol L 摩尔 升 表示 其浓度要求精密标定的滴定液用 XXX滴定液 YYYmol L 表示 作其他用途不需要精密标定其浓度时 用 YYYmol LXXX溶液 表示 以示区别 23 计量 水浴温度除另有规定外 均指98 100 热水系指70 80 微温或温水系指40 50 室温系指10 30 冷水系指2 10 冰浴系指约0 放冷系指放冷至室温 温度以摄氏度 表示 24 计量 百分比用 表示系指重量的比例 但溶液的百分比 除另有规定外 系指溶液100ml中含有溶质若干克 乙醇的百分比 系指在20 时容量的比例 此外 根据需要可采用下列符号 g g 表示溶液100g中含有溶质若干克 ml ml 表示溶液100ml中含有溶质若干毫升 ml g 表示溶液100g中含有溶质若干毫升 g ml 表示溶液100ml中含有溶质若干克 液体的滴系指在20 时 以1 0ml水为20滴进行换算 25 计量 溶液后标记的 1 10 等符号系指固体溶质1 0g或液体溶质1 0ml加溶剂使成10ml的溶液 未指明用何种溶剂时 均系指水溶液 两种或两种以上液体的混合物 名称间用半字线 隔开 其后括号内所示的 符号 系指各液体混合时的体积 重量 比例 26 称取 0 1g 指0 06 014g 2g 指1 5 2 5g 2 0g指1 95 2 05g2 00g指1 995 2 005g 取样精密度与准确度称定 指所称取重量的百分之一精密称定 指所称取重量的千分之一精密量取 指量体积移液管的精密度 约 若干 指不超过规定量的 10 精确度 27 精确度 恒重除另有规定外 系指供试品连续两次干燥或炽灼后的重量差异在0 3mg以下的重量 干燥至恒重的第二次及以后各次称重均在规定条件下继续干燥1小时后进行 炽灼至恒重的第二次称重应在继续炽灼30分钟后进行 空白试验系指在不加供试品或以等量溶剂替代供试液的情况下 按同法操作所得的结果 含量测定中的 并将滴定的结果用空白试验校正 系指按供试品所耗滴定液的量 ml 与空白试验中所耗滴定液量 ml 之差进行计算 试验时的温度 未注明者 系指在室温下进行 温度高低对试验结果有显著影响者 除另有规定外 应以25 2 为准 28 试药 试液 指示剂 试验中的试药 除另有规定外 选用不同等级并符合国家标准或国务院有关行政主管部门规定的试剂标准 试液 缓冲液 指示剂与滴定液等 均应符合附录的规定或按照附录的规定制备 试验用水 除另有规定外 均系指纯化水 酸碱度检查所用的水 均系指新沸放冷至室温的水 酸碱性试验时 如未指明用何种指示剂 均系指石蕊试纸 29 二 正文为所收载药品或制剂的质量标准基本内容有 品名 结构式 分子式与分子量 来源或化学名 含量或效价规定 处方 制法 性状 鉴别 检查 含量测定 类别 贮藏 制剂等 请看阿司匹林的质量标准的示例 30 阿司匹林的质量标准 阿司匹林AsipilinAspirinC9H8O4180 16 31 32 本品为2 乙酰氧基 苯甲酸 含C9H8O4不得少于99 5 性状 本品为白色结晶或结晶性粉末 无臭或微带醋酸臭 味微酸 遇湿气即缓缓水解 本品在乙醇中易溶 在氯仿或乙醚中溶解 在水或无水乙醚中微溶 在氢氧化钠溶液或碳酸钠溶液中溶解 但同时分解 33 鉴别 1 取本品约0 1g 加水10ml 煮沸 放冷 加三氯化铁试液1滴 即显紫堇色 2 取本品约0 5g 加碳酸钠试液10ml 煮沸2分钟后 放冷 加过量的稀硫酸 即析出白色沉淀 并发生醋酸的臭气 3 本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱 光谱集209图 一致 34 检查 溶液的澄清度取本品0 50g 加温热至约45 的碳酸钠试液10ml溶解后 溶液应澄清 35 游离水杨酸取本品0 10g 加乙醇lml溶解后 加冷水适量使成50ml 立即加新制的稀硫酸铁铵溶液 取盐酸溶液 9 100 1ml 加硫酸铁铵指示液2ml后 再加水适量使成100m1 1ml 摇匀 30秒钟内如显色 与对照液 精密称取水杨酸0 1g 加水溶解后 加冰醋酸1ml 摇匀 再加水使成1000ml 摇匀 精密量取lml 加乙醇lml 水48ml与上述新制的稀硫酸铁铵溶液1ml 摇匀 比较 不得更深 0 1 36 易炭化物取本品0 5g 依法检查 附录 K 与对照液 取比色用氯化钴液0 25ml 比色用重铬酸钾液0 25ml 比色用硫酸铜液0 40ml 加水使成5m1 比较 不得更深 炽灼残渣不得过0 1 附录 N 重金属取本品1 0g 加乙醇23ml溶解后 加醋酸盐缓冲液 pH3 5 2ml 依法检查 附录 H第一法 含重金属不得过百万分之十 37 含量测定 取本品约0 4g 精密称定 加中性乙醇 对酚酞指示液显中性 20ml溶解后 加酚酞指示液3滴 用氢氧化钠滴定液 0 1mol L 滴定 每lml氢氧化钠滴定液 0 1mol L 相当于18 02mg的C9H8O4 类别 解热 消炎镇痛药 贮藏 密封 在干燥处保存 制剂 1 阿司匹林片 2 阿司匹林肠溶片 3 阿司匹林栓 38 三 附录制剂通则 生物制剂通则 1 主要内容通用检测方法 生物检测法 试药和试纸 溶液配制 原子量表制剂通则有 片剂 注射剂等21种 均有规定检查项目 2 内容举例通用检测方法有 一般鉴别方法 分光光度法色谱法 一般杂质检查等 试液 指示剂 标准溶液的配制与标定等 39 中国药典 2005年版 二部采用中文索引和英文索引 前者按汉语拼音顺序排列 后者按英文字母顺序排列 这两个索引与药典正文前的 品名目次 相配合 可快速查询有关药物品种的有关内容 中国药典 2005年版 一部采用中文索引 汉语拼音索引 拉丁名索引和拉丁学名索引 四 索引 40 1 药典凡例和正文部分的增修订2 药典附录的增修订3 系列标准及配套丛书 中国药典 英文和电子版 中国药品通用名称 药品红外光谱集 临床用药须知 药典增补本 五 2005年版中国药典进展 返回 41 第三章药物的鉴别 1 掌握性状 化学鉴别法 仪器鉴别法等常用药物的鉴别方法 了解药物鉴别的目的和特点 2 掌握一般药物的鉴别试验方法 学习目标 42 是根据药物的分子结构 理化性质 采用化学 物理化学或生物学 仪器分析等方法来判断药物的真伪 药物鉴别试验 identificationtest 43 第一节常用的鉴别方法 一 鉴别目的 仅适用于鉴别药物的真伪 二 鉴别特点1 为已知药物的确证试验2 鉴别试验是个别分析 而不是系统分析3 对药物制剂进行鉴别时 要注意消除制剂中辅料的干扰 一 药物鉴别的目的和特点 44 二 性状 外观 溶解度和物理常数1 外观指药物的聚集状态 晶型 色泽及臭 味等性质 2 溶解度是药物的一种物理性质 在一定程度上反映了药品的纯度 45 3 物理常数具有鉴别意义 也反映该药品的纯净程度 比旋度在一定波长与温度下 偏振光透过长1dm且每1ml中含有旋光性物质1g的溶液时测得的旋光度称为比旋度 吸收系数在给定的波长 溶剂和温度等条件下 吸光物质在单位浓度 单位液层厚度时的吸收度称为吸收系数 46 酸值酸值系指中和脂肪 脂肪油或其他类似物质1g中含有的游离脂肪酸所需氢氧化钾的重量 mg 碘值系指脂肪 脂肪油或其他类似物质100g 当充分卤化时所需的碘量 g 皂化值系指中和并皂化脂肪 脂肪油或其他类似物质1g中含有的游离酸类和酯类所需氢氧化钾的重量 mg 47 酸值说明供试品中游离脂肪酸的多少 酸值高质量差 也可以看出酸败的程度 碘值说明油中不饱和键的多少 碘值高 则不饱和键多 油易氧化 不适合注射用 皂化值表示油中游离脂肪酸和结合成酯的脂肪酸的总量多少 可看出油的种类和纯度 48 三 化学鉴别法 化学鉴别法是根据药物与化学试剂在一定条件下发生离子反应或官能团反应生成不同颜色 不同沉淀 放出不同气体 呈现不同荧光 从而做出定性分析结论的方法 49 呈色反应沉淀生成反应生成气体反应生成荧光反应褪色反应生成衍生物测定熔点 50 呈色反应 指供试品溶液中加入适当的试剂溶液 在一定条件下进行反应 生成易于观测的有色产物 51 1 三氯化铁呈色反应 酚羟基或水解后产生酚羟基 2 异羟肟酸铁反应 多为芳酸及其酯类 酰胺类 3 茚三酮呈色反应 脂肪氨基 4 重氮化 偶合显色反应 芳伯氨基或能产生芳伯氨基 5 氧化还原显色反应及其它颜色反应 最为常用的反应类型 52 沉淀生成反应 与重金属离子的沉淀反应在一定条件下 药物和重金属离子反应 生成不同形式的沉淀 2 与硫氰化铬铵 雷氏盐 的沉淀反应多为生物碱及其盐 具有芳香环的有机碱及其盐 3 其它沉淀反应 53 生成气体反应 1 大多数的胺 铵 类药物 酰脲类药物以及某些酰胺类药物 可经强碱处理后 加热 产生氨 胺 气 2 化学结构中含硫的药物 可经强酸处理后 加热 发生硫化氢气体 3 含碘有机药物经直火加热 可生成紫色碘蒸气 含醋酸酯和乙酰胺类药物 经硫酸水解后 加乙醇可产生乙酸乙酯的香味 54 褪色反应 具有不饱和键与高锰酸钾或溴水反应 如司可巴比妥钠 氧化还原反应 如碘液等 55 生成荧光反应 常用的荧光发射形式有以下类型 1 药物本身可在可见光下发射荧光 2 药物溶液加硫酸使呈酸性后 在可见光下发射荧光 3 药物和溴反应后 于可见光下发射出荧光 4 药物和间苯二酚反应后 发射出荧光及药物经其它反应后 发射荧光 56 生成衍生物测定熔点 利用甾醇 甾酮类药物与一些试剂反应生成酯 肟 缩氨基脲或水解甾体生成相应母体 测定熔点 57 四 仪器鉴别法 定义 是以物质的物理和物理化学性质为基础的分析方法 需要特殊仪器 具有灵敏度高 信息量大等特点 一 光谱法1 紫外 可见光谱鉴别法对比吸收曲线一致性对比最大吸收波长和同时测定最小吸收波长的一致性 58 规定一定浓度的供试品在最大吸收波长处的吸收度规定吸收波长和吸收系数法规定吸收波长和吸收度比值法经化学处理后 测定其反应产物的吸收光谱特性 59 2 红外光谱鉴别法按指定条件绘制供试品的红外光吸收图谱 标准图谱对比 峰位 峰形 相对强度一致时 即为同一药物 试样制备方法有压片法 糊法 膜法和溶液法等方法 60 如压片法如下 取供试品约1mg 置玛瑙研钵中 加入干燥的溴化钾或氯化钾细粉约200mg 充分研磨 移置于直径为13mm的压模中 使铺布均匀 压模与真空泵相连 抽气约2min后 加压至0 8 1GPa 保持2 5min 除去真空 取出制成的供试片 用目视检查应均匀 无明显颗粒 将供试片置于供试品的样品光路中 并扣除用同法制成的空白溴化钾或氯化钾片的背景 录制光谱图 要求空白片的光谱图的基线应大于75 透光率 除去3440cm 1及1630cm 1附近因残留附着水而呈现一定的吸收峰外 其他区域不应出现大于基线3 透光率的吸收谱带 61 二 色谱鉴别法 同一种药物在同样条件下的薄层色谱行为是相同的 依次可以鉴别药物及其制剂的真伪 用同种溶剂配成同样浓度的溶液 在同一薄层板上点样 展开 显色 供试品所显主斑点的颜色 位置应与对照品的主斑点相同 以此来验证药品的真伪 1 薄层色谱法此法是色谱鉴别方法中常用的方法 一般采用对照品 或标准品 比较法 要求供试品斑点Rf值应与对照品的一致 62 例如丙酸睾酮注射液的鉴别方法为 取本品适量 约相当于丙酸睾酮10mg 加无水乙醇10ml 强力振摇 置冰浴中放置使分层 取上层乙醇溶液 置离心管中离心 取上清液作为供试品溶液 另取丙酸睾酮对照品 加无水乙醇制成每1ml中含1 0mg的溶液 作为对照品溶液 照薄层色谱法试验 吸取上述两种溶液各10 l 分别点于同一硅胶GF254薄层板上 以二氯甲烷 甲醇 19 0 5 为展开剂 展开后 晾干 置紫外灯 254nm 下检视 供试品溶液所显主斑点的颜色和位置应与对照品溶液的主斑点相同 2 高效液相色谱法和气相色谱法 63 三 熔点测定鉴别法 例如苯丙酸诺龙的鉴别方法为 取本品50mg 加甲醇2ml溶解后 加盐酸氨基脲试液4ml 加热回流30min 置水浴上浓缩 放冷 滤过 沉淀用甲醇洗涤数次 再用水洗净后 在105 干燥 依法测定 熔点为178 185 熔融同时分解 64 基本要求掌握一般鉴别试验的原理 熟悉一般鉴别试验的基本方法 了解一般鉴别试验的条件和灵敏度 第二节一般鉴别试验 65 鉴别试验 一般鉴别试验分为专属鉴别试验 66 一般鉴别试验是依据某一类药物的化学结构或理化性质的特征 通过化学反应来鉴别的真伪 专属鉴别试验是证实某一种药物的依据 它是根据每种药物化学结构差异及其所引起的物理化学特性不同 选用某些特有的灵敏的定性反应 来鉴别药物的真伪 67 鉴别原理苯巴比妥及其钠盐 司可巴比妥 异戊巴比妥及其钠盐等原料药及其制剂的分子结构中均以丙二酰脲为母体 都能在弱碱性溶液中与硝酸银作用生成二银盐的白色沉淀 也能与铜吡啶试液作用显紫色 一 丙二酰脲类 68 鉴别方法 1 取供试品约0 1g 加碳酸钠试液1ml与水10ml 振摇2分钟 滤过 滤液中逐滴加入硝酸银试液 即生成白色沉淀 振摇 沉淀即溶解 继续滴加过量的硝酸银试液 沉淀不再溶解 2 取供试品约50mg 加吡啶溶液 1 10 5ml 溶解后 加铜吡啶试液1ml 即显紫色或生成紫色沉淀 69 1 与银盐反应 70 2 与铜盐反应 71 二 有机氟化物 反应原理地塞米松磷酸钠及其注射液 醋酸曲安奈德及其注射液 诺氟沙星 醋酸氟轻松 醋酸氟轻可的松等药物都含有氟 将有机氟转化无机氟离子 用氧瓶燃烧法进行破坏 用水或碱性溶液吸收成无机氟化物 与茜素氟蓝 硝酸亚铈在PH4 3溶液中形成蓝紫色络合物 72 取供试品约7mg 照氧瓶燃烧法 附录 C 进行有机破坏 用水20ml与0 01mol L氢氧化钠溶液6 5ml为吸收液 待燃烧完毕后 充分振摇 取吸收液2ml 加茜素氟蓝试液0 5ml 再加12 醋酸钠的稀醋酸溶液0 2ml 用水稀释至4ml 加硝酸亚铈试液0 5ml 即显蓝紫色 同时做空白对照试验 鉴别方法 73 74 三 托烷类生物碱类 反应原理氢溴酸山莨菪碱及其片剂 注射液 氢溴酸东莨菪碱及其片剂 注射液 丁溴酸东莨菪碱及其注射液 胶囊 硫酸阿托品及其片剂 注射液 盐酸消旋山莨菪碱注射液等药物的分子结构 都是由莨菪烷衍生物 又称托烷衍生物 与莨菪酸生成的酯 称为托烷生物碱类 75 它们分子结构中都含有莨菪酸的结构 与发烟硝酸共热 即得黄色的三硝基 或二硝基 衍生物 冷却后 加醇制氢氧化钾少许 即显深紫色 鉴别方法取供试品约10mg 加发烟硝酸5滴 置水浴上蒸干 即得黄色的残渣 放冷 加乙醇2 3滴 加固体氢氧化钾一小颗粒 即显深紫色 76 77 四 芳香第一胺类 鉴别原理对乙酰氨基酚 磺胺嘧啶 盐酸普鲁卡因及其注射液等芳香第一胺药物或水解后 能还原生成芳香第一胺类的药物均可与亚硝酸钠发生重氮化反应 生成的重氮盐与碱性 萘酚形成偶氮染料 78 鉴别方法 取供试品约50mg 加稀盐酸1ml 必要时缓缓煮沸使溶解 放冷 加0 1mol L亚硝酸钠溶液数滴 滴加碱性 萘酚试液数滴 视供试品不同 生成由橙黄到猩红色沉淀 79 80 五 钠盐 钾盐 1 测定原理钠的火焰光谱的主要谱线有589 0nm 589 6nm 故显黄色 钾盐的火焰光谱的主要谱线有766 49nm 769 90nm等 由于人眼在此波长附近敏感度较差 故显紫色 如有钠盐混存 因钠盐灵敏度很高 遮盖了钾盐的紫色 需透过蓝色钴玻璃将钠焰的黄色滤去 此时火焰显粉红色 81 2 鉴别方法 钠盐 1 取铂丝 用盐酸湿润后 蘸取供试品 在无色火焰中燃烧 火焰即显鲜黄色 2 取供试品的中性溶液 加醋酸氧铀锌试液 即生成黄色沉淀 82 钾盐 1 取铂丝 用盐酸湿润后 蘸取供试品 在无色火焰中燃烧 火焰即显紫色 但有少量的钠盐混存时 须隔蓝色玻璃透视 方能辨认 2 取供试品 加热炽灼除去可能杂有的铵盐 放冷后 加水溶解 再加0 1 四苯硼钠溶液与醋酸 即生成白色沉淀 83 六 铁盐亚铁盐 1 亚铁盐 1 取供试品溶液 加铁氰化钾试液 即生成深蓝色沉淀 分离 沉淀在稀盐酸中不溶 但加氢氧化钠试液 即分解成棕色沉淀 2 取供试品溶液 加1 邻二氮菲的乙醇溶液数滴 即显深红色 84 2 铁盐 1 取供试品溶液 加亚铁氰化钾试液 即生成深蓝色沉淀 分离 沉淀在稀盐酸中不溶 但加氢氧化钠试液 即分解成棕色沉淀 2 取供试品溶液 加硫氰酸铵试液 即显血红色 85 七 硫酸盐 亚硫酸盐或亚硫酸氢盐 1 硫酸盐 1 取供试品溶液 加氯化钡试液 即生成白色沉淀 分离 沉淀在盐酸或硝酸中均不溶解 86 2 取供试品溶液 加醋酸铅试液 即生成白色沉淀 分离 沉淀在醋酸铵试液或氢氧化钠试液中溶解 3 取供试品溶液 加盐酸 不生成白色沉淀 与硫代硫酸盐区别 87 2 亚硫酸盐或亚硫酸氢盐 1 取供试品 加盐酸 即发生二氧化硫的气体 有刺激性特臭 并能使硝酸亚汞试液湿润的滤纸显黑色 2 取供试品溶液 滴加碘试液 碘的颜色即消褪 88 八 醋酸盐 硝酸盐 磷酸盐 1 醋酸盐 1 取供试品 加硫酸和乙醇后 加热 即分解发生醋酸乙酯的香气 2 取供试品的中性溶液 加三氯化铁试液1滴 溶液呈深红色 加稀无机酸 红色即褪去 89 2 硝酸盐 1 取供试品溶液 置试管中 加等量的硫酸 注意混合 冷后 沿管壁加硫酸亚铁试液 使成两液层 接界面显棕色 2 取供试品溶液 加硫酸与铜丝 或铜屑 加热 即发生红棕色的蒸气 3 取供试品溶液 滴加高锰酸钾试液 紫色不应褪去 与亚硝酸盐区别 90 3 磷酸盐 1 取供试品的中性溶液 加硝酸银试液 即生成浅黄色沉淀 分离 沉淀在氨试液或稀硝酸中均易溶解 2 取供试品溶液 加氯化铵镁试液 即生成白色结晶性沉淀 3 取供试品溶液 加钼酸铵试液与硝酸后 加热即生成黄色沉淀 分离 沉淀能在氨试液中溶解 91 九 水杨酸盐 苯甲酸盐 乳酸盐 枸橼酸盐 酒石酸盐 1 水杨酸盐 1 取供试品的稀溶液 加三氯化铁试液1滴 即显紫色 2 取供试品溶液 加稀盐酸 即析出白色水杨酸沉淀 分离 沉淀在醋酸铵试液中溶解 92 2 苯甲酸盐 1 取供试品的中性溶液 加三氯化铁试液 即生成赭色沉淀 加稀盐酸 变为白色沉淀 2 取供试品 置干燥试管中 加硫酸后 加热 不炭化 但析出苯甲酸 在试管内壁凝结成白色升华物 93 取供试品溶液5ml 约相当于乳酸5mg 置试管中 加溴试液1ml与稀硫酸0 5ml 置水浴上加热 并用玻棒小心搅拌至退色 加硫酸铵4g 混匀 沿管壁逐滴加入10 亚硝基铁氰化钠的稀硫酸溶液0 2ml和浓氨试液1ml 使成两液层 在放置30分钟内 两液层的接界面处出现一暗绿色的环 3 乳酸盐 94 4 枸橼酸盐 1 取供试品溶液2ml 约相当于枸橼酸10mg 加稀硫酸数滴 加热至沸 加高锰酸钾试液数滴 振摇 紫色即消失 溶液分成两份 一份中加硫酸汞试液1滴 另一份中逐滴加入溴试液 均生成白色沉淀 95 2 取供试品约5mg 加吡啶 醋酐 3 1 约5ml 振摇 即生成黄色到红色或紫红色的溶液 96 5 酒石酸盐 1 取供试品的中性溶液 置洁净的试管中 加氨制硝酸银试液数滴 置水浴中加热 银即游离并附在管的内壁成银镜 2 取供试品溶液 加醋酸成酸性后 加硫酸亚铁试液1滴和过氧化氢试液1滴 俟溶液褪色后 用氢氧化钠试液碱化 溶液即显紫色 97 十 铵盐 加碱加热后放出氨或胺的反应 测定原理酰胺 内酰胺 磺酰胺 胺类和铵盐等能与酸生成盐的药物在过量碱作用下水解 受热时放出氨或胺 有氨或胺臭 并可使湿润的红色石蕊试纸变蓝 氨与硝酸亚汞反应析出单质汞 98 鉴别方法 1 取供试品 加过量的氢氧化钠试液后 加热 即分解 发生氨臭 遇湿润的红色石蕊试纸 能使之变蓝色 并能使硝酸亚汞试液湿润的滤纸显黑色 2 取供试品溶液 加碱性碘化汞钾试液1滴 即生成红棕色沉淀 99 NH4 OH NH3 H2ORCONH2 NaOHRCOONa NH3 RNH2 HX NaOHRNH2 NaX H2O 100 十一 卤化物 1 氯化物 1 取供试品溶液 加硝酸使成酸性后 加硝酸银试液 即生成白色凝乳状沉淀 分离 沉淀加氨试液即溶解 再加硝酸 沉淀复生成 如供试品为生物碱或其他有机碱的盐酸盐 须先加氨试液使成碱性 将析出的沉淀滤过除去 取滤液进行试验 101 2 取供试品少量 置试管中 加等量的二氧化锰 混匀 加硫酸湿润 缓缓加热 即发生氯气 能使湿润的碘化钾淀粉试纸显蓝色 102 2 溴化物 1 取供试品溶液 加硝酸银试液 即生成淡黄色凝乳状沉淀 分离 沉淀能在氨试液中微溶 但在硝酸中几乎不溶 2 取供试品溶液 滴加氯试液 溴即游离 加氯仿振摇 氯仿层显黄色或红棕色 103 3 碘化物 1 取供试品溶液 加硝酸银试液 即生成黄色凝乳状沉淀 分离 沉淀在硝酸或氨试液中均不溶解 2 取供试品溶液 加少量的氯试液 碘即游离 如加氯仿振摇 氯仿层显紫色 如加淀粉指示液 溶液显蓝色 104 十二 茚三酮反应 氨基酸 伯胺和某些羟基胺类药物可与茚三酮在加热时反应生成紫色 蓝色或红紫色产物 有色物质不是单一化合物 而是几种缩合产物的混合物 105 十三 高锰酸钾褪色反应 含有不饱和双键或含有侧链芳烃的药物 在酸性溶液中与高锰酸钾试液作用 可将高锰酸钾还原 使紫色消褪 综上所述 一般鉴别试验是以某些类别药物的共同化学结构为依据 根据其相同的物理化学性质进行药物真伪的鉴别 以区别不同类别的药物 106 定量分析样品的前处理方法 107 学习目标 熟悉用硫酸水解后测定法 经氧化还原后测定法的分析方法 了解直接测定法 直接回流后测定法 掌握氧瓶燃烧法操作方法 熟悉湿法破坏 干法破坏的方法 108 含金属或卤素的有机药物需做适当地前处理 分析样品前处理 采用一定方法 使待测药物或待测元素转化为适宜测定方式 109 处理方法分为两大类 不经有机破坏的分析方法经有机破坏的分析方法 110 一 不经有机破坏的分析方法 一 直接测定法金属原子不直接与碳原子相连的含金属药物 金属原子直接与碳原子相连 键结合不牢固的有机金属药物 在水溶液中可以电离 因而不需有机破坏 111 二 经水解后测定法 直接回流后测定法含卤素有机药物溶于适当溶剂 如乙醇 中 加氢氧化钠溶液或硝酸银溶液 加热回流使其水解 适于含卤素有机药物结构中卤素原子结合不牢固的药物 112 用硫酸水解后测定法与定量硫酸共沸 水解成易测定成分 二 经水解后测定法 113 三 经氧化还原后测定法 碱性还原后测定 酸性还原后测定 醋酸酸性条件 锌粉还原 碳一碘键断裂 形成无机碘化物 114 三 经氧化还原后测定法 汞齐化法酸性或碱性溶液中 加锌粉 加热回流 将有机结合汞还原析出金属汞 与过量的锌生成锌汞齐 将锌汞齐溶于硝酸 测定汞的含量 换算 本法系还原反应 115 三 经氧化还原后测定法 利用药物中可游离金属离子的氧化性测定含量 如利用五价锑有机药物中可游离的Sb5 的氧化性 在酸性液中氧化碘化钾 并定量析出碘 可用硫代硫酸钠液滴定 116 二 经有机破坏的分析方法 含金属有机药物 有机卤素药物结构中的金属原子 卤素与碳原子结合牢固者 使有机结合状态的金属及卤素转变为可测定的无机化合物 117 一 湿法破坏 据试剂不同分为 硝酸 高氯酸法 硝酸 硫酸法 118 硫酸 硫酸盐法 其它湿法硝酸 硫酸 高氯酸法 硫酸 过氧化氢法等 一 湿法破坏 119 二 干法破坏 有机物灼烧灰化达分解目的 样品置于瓷坩埚或镍坩埚等中炭化 然后放高温炉中灼烧到灰化完全 120 三 氧瓶燃烧法 有机药物放入充满氧气密闭烧瓶中燃烧 产生欲测物质吸收于适当吸收液中 121 1 仪器装置 燃烧瓶 磨口 硬质玻璃锥形瓶 瓶塞 严密 空心 底部熔封铂丝一根 铂丝下端网状或螺旋状 122 图5 1氧瓶燃烧装置与样品包装操作图 123 2 称样 固体样品 先研细 精密称取 置无灰滤纸 图5 1B 中心 按虚线折叠 图5 1C 后 固定铂丝下端 124 2 称样 液体样品 供试品滴在无灰滤纸做成的纸袋中 125 纸袋做法 将纸剪成规定大小和形状 完成操作 按图5 1D E F进行操作 126 3 燃烧分解操作法 燃烧瓶内加吸收液 通氧气 立即用表面皿覆盖瓶口 通气管口应接近液面 使瓶内空气排尽 点燃包有样品的滤纸包或纸袋尾部 放入燃烧瓶 按紧瓶塞 燃烧完毕 振摇 使生成烟雾吸入吸收液 用同法另作空白试验 127 4 吸收液的选择 吸收液使卤素定量吸收 适应所选择分析方法 据被测物质种类及分析方法选择吸收液 128 第七章片剂的质量检测 第一节片剂的质量检测第二节常用片剂的质量检测练习与思考 返回主目录 129 基本要求 返回 1 熟悉片剂的检测步骤2 掌握片剂的常规检查3 熟悉片剂中常用辅料的干扰及其排除4 熟悉片剂的含量测定及结果计算的方法5 掌握常用片剂的质量检测 阿司匹林片 对乙酰氨基酚片 异烟肼片 硫酸阿托品片 6 了解片剂的定义与种类 130 一 片剂定义 药物 辅料 制剂技术 片状或异形片状的制剂 第一节片剂的质量检测 131 二 片剂的种类 口服片口腔用片外用片其它 普通压制片包衣片多层片咀嚼片泡腾片缓释片控释片分散片 口含片舌下片 溶液片阴道片 植入片注射用片 132 三 检测步骤 1 外观及性状检查2 鉴别3 常规检查及杂质检查4 含量测定 133 四 常规检查 1 重量差异检查2 崩解时限检查3 发泡量的检查4 分散均匀性检查5 微生物限度检查6 溶出度的检查7 含量均匀度的检查 134 1 重量差异检查 重量差异定义 指按规定称量方法测得每片的重量与平均片重之间的差异程度 检查意义 在片剂的生产过程中 由于颗粒的均匀度 流动性 生产设备等原因 会引起片剂重量的差异 从而引起各片间主药的含量差异 135 检查对象 一般的片剂检查方法 取20片 精称总重 计算平均片重准确称量各片的重量 计算每片的片重与平均片重差异的百分率 表1片剂重量差异限度 136 判断 依据Ch P对片剂重量差异限度的规定 20中超出重量差异限度的药片不得多于2片 并不得有1片超出限度的1倍 糖衣片的片心应检查重量差异并符合规定 包糖衣后不再检查重量差异 薄膜衣片应在包薄膜衣后检查重量差异并符合规定 注意 137 固体制剂在规定的介质中 以规定的方法进行检查全部崩解溶散或成碎粒并通过筛网所需时间的限度 崩解时限 2 崩解时限检查 138 2 崩解时限检查 1 规定 37 素片 15 薄膜衣片 30 糖衣片 60 肠溶衣片 120 完整 盐酸液 60 崩解 缓冲液 泡腾片 5 15 25 139 2 崩解时限检查 2 方法 不合格时另取6片复试 六片 同时测定 140 141 2 崩解时限检查 咀嚼片不进行崩解时限检查凡规定检查溶出度 释放度的片剂 不再进行崩解时限检查 注意 142 3 发泡量的检查 阴道泡腾片照下述方法检查 应符合规定 检查法 取25ml具塞刻度试管 内径1 5cm 10支 各精密加水2ml 置37 1 水浴中5分钟后 各管中分别投入供试品1片 密塞 20分钟内观察最大发泡量的体积 平均发泡体积应不少于6ml 且少于3ml的不得超过2片 143 4 分散均匀性检查 分散片照下述方法检查 应符合规定 检查法 取供试品2片 置20 1 的100ml水中 振摇3分钟 应全部崩解并通过2号筛 144 5 微生物限度检查 规定 口腔贴片 阴道片 阴道泡腾片和外用可溶片等局部用片剂照微生物限度检查法检查 应符合规定 145 6 溶出度的检查指药物从片剂或胶囊剂等固体制剂在规定溶剂中溶出的速度和程度 溶出度 是一种模拟口服固体制剂在胃肠道里的崩解和溶出情况的体外试验法主要用于难以溶解的药物及控释 缓释制剂 146 取6片 个 分别置溶出度仪的6个吊篮 或烧杯 中 37 0 5 恒温下 在规定的溶液里按规定的转速操作 在规定时间内测定药物的溶出量 每片 个 溶出量相当于标示量的 147 1 6片的溶出量均 Q 符合规定 2 Q 仅1片 Q 10 平均溶出量 Q 3 仅1片 Q 10 另取6片复试 12片中仅2片 Q 10 平均溶出量 Q 148 7 含量均匀度的检查含量均匀度定义 指小剂量片剂 膜剂 胶囊剂或注射用无菌粉末等制剂每片 个 含量偏离标示量的程度 凡规定检查含量均匀度的片剂 一般不再进行重量差异的检查 注意 149 取10片 测定每片以标示量为100的相对含量X 计算均值X S和A值 A 100 X 判断 当A 1 80S 15 0时 符合规定A S 15 0 不符合规定A 1 80S 15 0 且A S 15 0 取20片复试计算30片的值X S和A值 A 1 45S 15 0 符合规定A 1 45S 15 0 不符合规定 150 151 1 糖类 干扰 氧化还原滴定赋形剂中含有淀粉 糊精 蔗糖 乳糖等 它们水解后均生成葡萄糖 葡萄糖为醛糖 具有还原性 干扰氧化还原法 因此 采用氧化还原法测定药物时 应考虑到其干扰 五 片剂中辅料的干扰及其排除 排除改用氧化电位稍低的氧化剂 152 2 硬脂酸镁 1 对配位滴定法的干扰与排除 Mg2 干扰配位法 使测定结果偏高 选用合适的指示剂或掩蔽剂可排除其干扰 153 2 对非水滴定法的干扰 硬脂酸镁消耗高氯酸滴定液 使测定结果偏高 一般排除的方法有 提取分离法碱化后提取分离法加入无水草酸的醋酐溶液法水蒸气蒸出后滴定法 154 滑石粉 淀粉 磷酸氢钙 硫酸钙等 五 片剂的含量测定及结果计算 155 六 片剂的含量测定及结果计算 片剂含量测定结果的计算 156 1 容量分析法 1 直接滴定法 157 2 剩余滴定法 158 2 紫外分光光度法 1 吸收系数法 159 2 对照法 160 第二节常用片剂的质量检测 一 阿司匹林片的质量检测1 结构与性质2 鉴别3 杂质检查4 含量测定 161 1 结构与性质 一 阿司匹林片的质量检测 162 1 阿司匹林为白色结晶或结晶性粉末 无臭或微带醋酸臭 味微酸 遇湿气即缓缓水解 在乙醇中易溶 在氯仿或乙醚中溶解 在水或无水乙醚中微溶 在氢氧化钠溶液或碳酸纳溶液中溶解 但同时分解 阿司匹林片为白色片 遇湿气易变质 2 显酸性 3 三氯化铁反应 4 重氮化 偶合反应 5 水解性 163 2 鉴别 阿司匹林片 1 取本品的细粉适量 约相当于阿司匹林0 1g 加水10ml 煮沸 放冷 加三氯化铁试液1滴 即显紫堇色 中国药典2005版 阿司匹林水解成水杨酸 在中性或弱酸性条件下 与FeCl3生成紫堇色配位化合物 164 2 鉴别 阿司匹林片 2 取本品的细粉适量 约相当于阿司匹林0 5g 加碳酸钠试液10ml 振摇后 放置5分钟 滤过 滤液煮沸2分钟 放冷 加过量的稀硫酸 即析出白色沉淀 并发生醋酸的臭气 中国药典2005版 165 3 杂质检查 阿司匹林ASA 1 溶液的澄清度 主要检查Na2CO3中不溶物 有苯酚 醋酸苯酯 水杨酸苯酯 乙酰水杨酸苯酯 阿司匹林溶解 因此阿司匹林溶液应澄清 2 游离水杨酸 SA 检查 利用SA可与FeCl3呈色 用比色法检查 3 易炭化物检查 主要检查ASA中能被硫酸炭化显色的低分子有机杂质 采用与标准比色液比色的方法检查 4 炽灼残渣 不得过0 1 附录 N 5 重金属 取本品1 0g 加乙醇23ml溶解后 加醋酸盐缓冲液 pH3 5 2ml 依法检查 附录 H第一法 含重金属不得过百万分之十 166 3 杂质检查 阿司匹林片 游离水杨酸 中国药典2005版 取本品的细粉适量 相当于阿司匹林0 1g 加无水氯仿3ml 不断搅拌2分钟 用无水氯仿湿润的滤纸滤过 滤渣用无水氯仿洗涤2次 每次1ml 合并滤液与洗液 在室温下通风挥发至干 残渣用无水乙醇4ml溶解后 移置100ml量瓶中 用少量5 乙醇洗涤容器 洗液并入量瓶中 加5 乙醇稀释至刻度 摇匀 分取50ml 立即加新制的稀硫酸铁铵溶液 取盐酸溶液 9 100 1ml 加硫酸铁铵指示液2ml后 再加水适量使成100ml 1ml 167 3 杂质检查 阿司匹林片 游离水杨酸 摇匀 30秒钟内显色 与对照液 精密称取水杨酸0 1g 置1000ml量瓶中 加水溶解后 加冰醋酸1ml 摇匀 再加水适量至刻度 摇匀 精密量取1 5ml 加无水乙醇2ml与5 乙醇使成50ml 再加上述新制的稀硫酸铁铵溶液1ml 摇匀 比较 不得更深 0 3 168 3 杂质检查 阿司匹林片 溶出度 取本品 照溶出度测定法 附录 C第一法 以稀盐酸24ml加水至1000ml为溶剂 转速为每分钟100转 依法操作 经30分钟时 取溶液10ml滤过 精密量取续滤液3ml置50ml量瓶中 加0 4 氢氧化钠溶液5ml 置水浴中煮沸5分钟 放冷 加稀硫酸2 5ml 并加水稀释至刻度 摇匀 照分光光度法 附录 A 在303nm的波长处测定吸收度 按C7H6O3的吸收系数 1 1cm 为265计算 再乘以1 304 计算出每片的溶出量 限度为标示量的80 应符合规定 中国药典2005版 169 3 杂质检查 阿司匹林片 其他 中国药典2005版 应符合片剂项下有关的各项规定 附录 B 170 1 直接滴定法基于本类药物 COOH 可用碱直接滴定 如ASA的含量测定 其原理如下 原理 条件 在中性乙醇中 以酚酞作指示剂 摩尔比为1 1 应用 多国药典用于双水杨酯 苯甲酸 丙磺舒 布洛芬测定 USP和BP还用于甲芬那酸的测定 4 含量测定 酸碱滴定法 171 4 含量测定 酸碱滴定法 阿司匹林含量测定 中国药典2005版 取本品约0 4g 精密称定 加中性乙醇 对酚酞指示液显中性 20ml 溶解后 加酚酞指示液3滴 用氢氧化钠滴定液 0 1mo1 L 滴定 每lml的氢氧化钠滴定液 0 1mo1 L 相当于18 02mg的C9H8O4 172 4 含量测定 酸碱滴定法 2 水解后剩余滴定法ASA片含量测定 原理 条件 水溶液 173 4 含量测定 酸碱滴定法 ASA片含量测定 具体试验 I份NaOH Vo V相当于ASA消耗硫酸的ml数 I份NaOH VO V ASA Vo V F T W 100 中国药典2005版 174 4 含量测定 酸碱滴定法 取本品10片 精密称定 研细 精密称取适量 约相当于阿司匹林0 3g 置锥形瓶中 加中性乙醇 对酚酞指示液显中性 20ml 振摇使阿司匹林溶解 加酚酞指示液3滴 滴加氢氧化钠滴定液 0 1mol L 至溶液显粉红色 再精密加氢氧化钠滴定液 0 1mol L 40ml 置水浴上加热15分钟并时时振摇 迅速放冷至室温 用硫酸滴定液 0 05mol L 滴定 并将滴定的结果用空白试验校正 每1ml氢氧化钠滴定液 0 1mol L 相当于18 02mg的C9H8O4 ASA片含量测定 中国药典2005版 175 4 含量测定 酸碱滴定法 3 两步滴定法 ASA片的含量测定 ASA NaOH ASA Na H2O 水解产物SA NaOH SA Na H2O 酸性稳定剂 NaOH 中性盐 第二步为水解与测定 第一步为中和 176 第二节常用片剂的质量检测 二 对乙酰氨基酚片的质量检测1 结构与性质2 鉴别3 杂质检查4 含量测定 177 1 结构与性质 二 对乙酰氨基酚片的质量检测 对乙酰氨基酚 扑热息痛 178 1 对乙酰氨基酚为白色结晶或结晶性粉末 无臭 味微苦 在热水或乙醇中易溶 在丙酮中溶解 在水中略溶 对乙酰氨基酚片为白色片或薄膜衣片 2 水解后显芳香第一胺特性 3 水解后易酯化 4 三氯化铁反应 酚羟基的特性 179 2 鉴别对乙酰氨基酚片 取本品的细粉适量 约相当于对乙酰氨基酚0 5g 用乙醇20ml分次研磨使对乙酰氨基酚溶解 滤过 合并滤液 蒸干 残渣照对乙酰氨基酚项下的鉴别 1 2 项试验 显相同的反应 中国药典2005版 180 2 鉴别 1 本品的水溶液加三氯化铁试液 即显蓝紫色 中国药典2005版 对乙酰氨基酚 FeCl3 蓝紫色化合物 181 2 鉴别 2 取本品约0 1g 加稀盐酸5ml 置水浴中加热40分钟 放冷 取0 5ml 滴加亚硝酸钠试液5滴 摇匀 用水3ml稀释后 加碱性 萘酚试液2ml 振摇 即显红色 中国