7890-5975安捷伦GCMS_如何检漏.doc

如何检漏一 判断漏气在调谐报告中发现M/Z 28的丰度大于M/Z 69的10，并且M/Z 32的丰度相当于M/Z 28的1/4左右。二 检查漏气部位1 在调谐与真空控制窗口，参数/编辑和显示参数中将显示的质量数之一更改为28。2 在手动调谐中运行轮廓图。3 如果最近更换过PFTBA，打开和关闭PFTBA，观察M/Z 28的峰高是否变化。如果关闭时空气峰明显减小，说明校正样品瓶没有固定好。4 如果最近没有拆装过任何部件，只是在做样。先更换进样隔垫再检查空气峰。5 在GC面板上修改柱头压或柱流量。如果：l M/Z 28的峰高随着柱流量增大而增大说明空气在GC外管线内。处理办法：不关闭载气将总管线拧松排放几分钟。l M/Z 28的峰高随着柱流量增大而减小说明存在漏气。需要查找漏气部位。按照以下步骤进行6 如果最近重新安装过柱子，在GC面板上改变分流出口流量（注意先关闭节省载气）。如果分流出口流量增大时空气峰减小说明进样口一端漏气。将螺丝拧下，检查柱子的位置（46mm）重新固定。如果这里没有问题，则停止轮廓图，并且点击MS关闭。按照下面步骤进行。7 准备一种易挥发的溶剂（如丙酮）在调谐和显示菜单中更改一个质量数为该溶剂的特征离子（如用丙酮更改为58）。在手动调谐中运行轮廓图。用棉签蘸取溶剂，放到GC/MS接口附近，观察溶剂峰是否出现。如果出现，则是接口螺丝处漏气。处理方法：先把螺丝松回一点点，然后拧紧1/4圈，再次用溶剂检查。直至无溶剂峰出现。8 以上部位都确认没有问题，按照步骤7将棉签放在其他部位，如放空阀周围。如果确认是这里的问题，拧紧螺丝。如果漏气又拧不动，则是这里的密封圈损坏，必须先按照关机程序将系统放空后再处理。如果发现侧门周围漏气，必须先按照关机程序将系统放空后再处理。正确安装毛细管柱安装步骤毛细管色谱柱安装步骤1检查气体过滤器、载气、进样垫和衬管等；2将螺母和卡套装在柱上，并将色谱柱两端口小心切平；3将色谱柱连于进样口上；4接通载气；5将色谱柱连于检测器上；6进行气体捡漏；7确定载气流量，再对色谱柱的安装进行检查；8色谱柱的老化；9设置确定载气流速；10柱流失检测；11分析测试实验混合样品。需要的安装工具和附件1切割工具如金刚石头或碳头笔、宝石笔头或瓷楔；2放大镜（1020X）；3标尺；4扳手；5卡套；6溶剂瓶；7干净的注射针；8适用的非柱保留化合物样品；9色谱柱测试混合样品；10流量计；11其他附件：进样垫、干净的衬管、衬管卡套/O形环等。步骤1：检查气体过滤器、载气、进样垫和衬管等 检查进样垫和气体过滤器，保证辅助气和检测器用气通畅有效。如果以前做过较脏样品或活性较高的化合物，需要将进样口衬管清洗或更换。步骤2：将螺母和卡套装在柱上，小心切平柱子两端口 在色谱柱的一端装上相应的螺母和卡套，此时色谱柱端口无前后之分，色谱柱支架的支撑部分应总是朝向着柱箱门。安装好螺母和卡套后，将色谱柱端口切平，并用放大镜进行检查。熔融石英毛细管和切割将色谱柱所要切割的部分用一根手指顶住，用合适的切割工具（见需要的安装工具和附件列表）在外壁轻轻的划上一个标记，不要直接进行切割。然后捏柱子在标记处折断。再使用放大镜对切割后的端口进行检查，以确定切口和管壁成直角，并且没有残留的碎屑，没有毛边或不平的切割面（见图2）。如果没有问题，最好在切割一次。卡套常用的色谱柱卡套有两种：石墨和石墨/Vespel。如果应用的是ECD或GC/MS 系统，不能使用石墨卡套。色谱柱的直径决定所用卡套的内径（见表1）。使用不合适的卡套不仅难于安装，而且很难保证连接处的密封性，注意；Agilent的6890/5890型GC所用的卡套比常规的要短。表1。套的内径柱内径(mm) 0.10.5mm 0.32mm 0.53mm卡套内径（mm） 0.4mm 0.5mm 0.8mm步骤3：色谱柱连于进样口上色谱柱在进样口中的嵌入溶度根据所使用的GC不同而不同。正确合适的嵌入能最大可能地保证实验结果的重现性。通常来说，色谱柱的顶端应保持在进样口衬管中的中下部，当进样针穿过隔垫完全插入进样口后，如果针尖与衬管中的色谱柱顶端相差1-2cm，这就是较为理想的状态（具体的嵌入浓度和方法参见所使用GC的随机手册）。 从色谱柱架上取出需要连接的足够的长度，并按步骤2切割柱子，连接到进样口。避免用力弯曲压挤毛细柱，并小心不要让标记牌等有锋利边缘的物品与色谱柱接触摩擦，以防柱身断裂或受损。连接螺母的安装：将色谱柱正确嵌入进样口后，用手把连接螺母拧上，拧紧后（用手拧不动了）用钣手再多拧1/4-1/2圈，如果色谱柱还有松动，在拧1/4圈，保证安装的密封程度。因为不紧密和安装，不仅会引起装置的泄漏，而且有可能对色谱造成快速永久的损害。在螺母完全连接后，小心不要再将色谱柱柱上下移动。 注意：如果在进样口或检测器有一定温度时安装色谱柱，安装效果可能会更好，因为卡套，特别是那些材质为石墨/Vespel的，在一定温度下会软化，易变形，也就更容易封住所要密封的部位。色谱柱装好后，等进样口或检测器的温度降下来，再安装其他部件。步骤4：接通载气 当色谱柱与进样口连接好后，接通载气。调节柱前压力得到合适的载气流速（见表2）。在色谱柱的另一端（空端），插入装有己烷的样品瓶中，正常情况下，我们可以看见瓶中稳定持续的气泡，如果没有气泡，就要重新检查一下整个气路有无泄漏。等所有问题解决后，将色谱柱端口从瓶中取出，擦拭干净，保证柱端口无溶剂残留，再进行下一部安装。 警告：当空气中氢气的含量在4-10%时，这样的混合气体就有爆炸的危险。虽然气体本身的扩散会降低爆炸的可能，但还是有一定的危险性，所以一定要保证实验室有良好的通风系统，防止氢气过分的聚集。表2。柱前压设置（pisig）柱长（m）柱内径（mm）0.25mm0.32mm0.53mm15m8-125-101-225/30m15-2510-202-450/60m30-4520-305-1075m5-10105m7-15 以上仅为建议的起始设置，具体数值要依据实际的载气速率，或如步骤9中的流量设置而定。步骤5：将色谱柱连于检测器上其安装和所需注意的事项与以上色谱柱与进样口联接（步骤3）部分所讲述的大致相同。如果在应用中系统所使用的是ECD或是NPD等，那么在老化色谱柱时，使它不与检测器相接，那么这一类的检测器会更快地达到稳定，关于色谱柱老化请见步骤8的内容。步骤6：进行气体检漏在色谱柱加热前，一定要对GC系统进行检漏，当我们对进样口和检测器进行载气捡漏时，使用电子检漏是最为有效的方法之一。建议不要使用Snoop等肥皂泡，它有可能由被检测处进入色谱柱和其它装置中，从而对系统有所损害。而且不能使用Snoop对正在加热的进样口和检测器装置进行检漏。如果一定要用液体检漏，建议使用50/50的异丙醇/水的混合溶液。步骤7：确定载气流量，再对色谱柱的安装进行检查警告：如果不通入载气就对色谱柱进行加热操作，就会快速并且永久性地损坏色谱柱。当色谱柱安装好后，在依照步骤4对载气流量进行确定，或者使用非保留化合物样品进行检测，我们可以通过分析得到的样品谱图来确定进样口和检测器的安装是否正确。表3中列出了常用的非保留化合物样品。实验过程：如果使用分流/不分流进样口，将色谱柱的温度保持在35-40 ，使用分流模式进1-2mL样品。如果使用的是不分流大口径进样口，由于样品不被分流进样，进样前应先对样品进行稀释，以免得到饱和的平头峰形。这样，我们应该得到一张峰形尖锐的谱图，而使用不分流大口径进样口，色谱柱可能会有轻微拖尾。如果得不到色谱图，有可能是根本就没有载气通过系统。那就需检查一下调节器、气体附件和流量控制器的设置是否正确。当然也可能是检测器、记录仪和注射针等出了问题。如果色谱峰有明显的拖尾现象，可能是进样口有泄漏，或是色谱柱安装不完整，也有可能是分流比设置得太低等。我们需要重新对色谱柱进行安装并对进样口进行检漏。只有完全解决了这个问题，才能进行下一步。表3。常用的非保留化合物样品检测器化合物1FID甲烷，乙烷TCD甲烷，乙烷，氩气，空气ECD二氯甲烷2，SF6，CF2C12NPD乙腈2，3PID乙烯，乙快MS甲烷，乙烷，氩气，空气1对于PLOT柱，以上大多数化合物都有明显地保留吸附2不要直接液体进样；建议使用顶空进样装置3当温度小于是100时，乙腈在大多数的色谱中都有保留。使用时需将色谱柱的温度提高到100 或设置更高的线速度步骤8：色谱柱的老化色谱柱安装和系统检漏工作完成后，就可以对色谱柱进行老化了。对色谱柱升至一恒定温度，通常为其温度上限。特殊情况下，可加热至高于最高操作10-20左右。但是一定不能超过色谱柱的温度上限，那样极易损坏色谱柱。升温速度一定要快，不要将程序声升温的速度设定的太慢。当得到老化温度后，记录并观察基线。比例放大基线，以便容易观察。初始阶段，基线应持续上升，在到达老化温度后5-10分钟开始下降，并且会持续30-90分钟。当达到一个固定的值后，基线就会稳定下来。如果在2-3小时后基线仍无法稳定在15-20分钟后仍无明显的下降趋势，那么有可能系统装置有泄漏或污染。遇到这样的情况，应立即将柱温降至40以下，尽快地检查系统并解决相关问题。如果还是继续地老化，不仅对色谱柱有损害，而且始终得不到正常稳定的基线。另外，老化的时间也不宜过长，不然会降低色谱柱的使用寿命。一般来说，涂有极性固定相和较厚涂层的色谱柱老化时间较长，而弱极性固定较厚涂层的色谱柱所需的时间较短。而PLOT色谱柱的老化方法又各不相同，具体步骤请参阅随柱子的操作说明书。如果在色谱柱没有与检测器连接就进行老化，那么老化后，色谱柱末端部分可能已被破坏。要先把柱子末端10-20cm部分截去，再将色谱柱连接到检测器上。温度限定是指色谱柱能够正常使用的应用温度范围。如果操作温度低于色谱柱的温度下限，那么分离效果和峰形都不会很理想。但这样对色谱柱本身并无什么损害。温度上限通常有两个数值，数值较低的是恒温极限。在此温度下，色谱柱可以正常使用，而且无具体的持续时间限制。较高的数值是程序升温极限。该温度的持续时间通常不多于十分钟。高于温度上限的操作则会降低色谱柱的使用寿命。步骤9：设置确认载气流速对于毛细管色谱柱，载气的种类首选高纯氦气或氢气。建议不要使用氮气做载气。载气的纯度最好大于99.995%，而其中的氧气含量越少越好。通常载气级或超高纯度氦气和氢气中氧气的含量小于2ppm。如果您使用的是毛细管色谱柱，那么依照载气的平均线速度（载气流动的速度cm/sec）而不是利用载气流速（载气流量mL/min）来对载气作出评价，这样不仅简单而且非常方便。因为柱效的计算采用的是载气的平均线速度，而不是体积流速。我们进一针非保留样品（见表3），确定它的保留时间。然后按下列公式计算平均线速度（V）V = L/trV = 平均线速度（cm/sec）L = 平均线速度（cm/sec）tr = 非保留样品色谱峰的保留时间（sec）推荐平均线速度值：He，30-40 cm/sec；H2，5080cm/sec不要使用色谱仪上的流量计去设置载气流速，可能不准，表4中列出了非保留样品色谱峰的保留时间和对应的流速范围。大多数情况下，采用流速范围的中间值较为合适，载气速度（流速）会随着柱温的改变而改变，请在温度恒定的情况下测量其具体数值。表4。在几种推荐的线速度下非保留样品的保留时间（min）氦气（He）色谱柱长度(m)线速度cm/ses303540150.830.710.63251.391.191.04301.671.431.25502.752.382.08603.332.862.50754.173.573.311055.835.004.38氢气（H2）色谱柱长度(m)线速度cm/sec506080150.500.420.31250.830.690.52301.000.830.63501.571.391.04602.001.671.25752.502.081.561053.502.922.19载气杂质过滤器：在载气的管线中加入气体过滤器装置不仅可以延长色谱柱寿命，而且很大程度地降低了背景噪声。参考下图，建议最好安装一个高容量氧气或一个可指标氧气过滤器。而在氧气过滤器前再安装一个水分过滤器，不仅可以延长氧气过滤器的使用寿命，而且可以降低背景噪声，使用ECD系统时，最好能在其辅助气路中安装一个氧气过滤器。 步骤10：柱流失检测在色谱柱老化过程结束后，利用程序升温做一次空白实验（不进样）。一般是以每分钟10 从50 升至恒温极限，达到恒温极限后保持10min。这样我们就可以得到一张流失图（见图3）。我们可以看出到一定程度，基线会快速上升。使用记录装置将基线记录下来，并记录下50 OC和恒温极限的信号值。这些数值可能对今后做对比试验和实验问题解决有帮助。色谱柱 DM-5， 30m0.25mm0.25um货号 7221载气 He at 40cm/sec温度 50-325 at 10/min 325 for 5 min进样 分流1：100，250检测器 FID, 300 N2 makeup gas at 30mL/min 在空白实验的色谱图中，不应该有色谱峰出现。如果出现了色谱峰，通常可能是从进样口部位来的污染物。如果在正常的使用状态下，色谱柱的性能开始下降