V-D-002 洁净区甲醛熏蒸消毒验证方案.doc

部门 验证机构编号 V D 002起草 日期 类别 验证方案审核 日期 颁次 洁净区甲醛熏蒸消毒洁净区甲醛熏蒸消毒 验证方案验证方案 批准 日期 替代 生效日期 页码 第 1 页 共19页 颁发部门 分发部门 目目 录录 1 1 概述概述 1 2 2 验证目的验证目的 2 3 3 职责职责 2 3 1 验证委员会 2 3 2 工程部 2 3 3 生产部 2 3 4 质量部 2 4 4 验证内容验证内容 3 4 1 验证条件 3 4 1 1 验证所需文件资料 3 4 1 2 验证所需的试验条件 3 4 2 验证步骤 4 4 2 1 熏蒸消毒前的准备 4 4 2 2 熏蒸消毒 4 4 2 3 消毒效果确认 6 4 2 4 换气后室内环境中甲醛残留量的测试 6 4 3 拟订再验证周期 起草洁净厂房甲醛熏蒸消毒程序 8 4 4 验证结果评定与结论 8 5 附件附件 8 1 1 概述概述 甲醛是常用的消毒剂 其 3 5 的水溶液或乙醇溶液能破坏细菌繁殖体及 许多芽孢 真菌和病毒 使其蛋白质 酶类变性 甲醛熏蒸消毒法是洁净厂房 消毒灭菌的常用方法 每立方米空间用 37 40 甲醛液 8 9ml 加 4 5g 高锰 酸钾做氧化剂 加热熏蒸 密闭一定时间后 通风 置换室内空气中的甲醛 编 号 版本号 洁净厂房甲醛熏蒸消毒验证方案 共 19 页 第 2 页 2 2 验证目的验证目的 为确认甲醛熏蒸消毒法能够对洁净厂房进行有效的消毒 选择最安全合理 的熏蒸时间和换气时间组合 特制订本验证方案 进行验证 验证过程应严格按照本方案规定的内容进行 若因特殊原因确需变更时 应填写验证方案变更申请及批准书 报验证委员会批准 3 3 职责职责 3 13 1 验证委员会验证委员会 1 负责验证方案的审批 2 负责验证的协调工作 以保证本验证方案规定项目的顺利实施 3 负责验证数据及结果的审核 4 负责验证报告的审批 5 负责发放验证证书 6 负责再验证周期的确认 3 23 2 工程部工程部 1 负责验证所需仪器 设备的安装 调试 并做好相应的记录 2 负责仪器 仪表 量具等的校正 3 负责甲醛熏蒸消毒的实施 3 33 3 生产部生产部 1 负责洁净厂房的清洁 2 负责甲醛熏蒸消毒前物料的转移或密封 3 43 4 质量部质量部 1 负责验证所需的试剂 试液 标准菌株等的准备 2 负责取样及样品的检验 3 负责拟订再验证周期 编 号 版本号 洁净厂房甲醛熏蒸消毒验证方案 共 19 页 第 3 页 4 4 验证内容验证内容 4 14 1 验证条件验证条件 4 1 14 1 1验证所需文件资料验证所需文件资料 在进行甲醛蒸汽消毒验证前 洁净厂房空气净化系统应经验证合格并正常 运行 工程部应提供洁净厂房空气净化系统的验证报告 空气净化系统操作程 序 洁净厂房甲醛熏蒸消毒标准操作程序 草案 并负责验证 检验用各种 计量器具的校正 提供校正证书 质量部负责提供验证取样及检验规程等 具 体内容见表 1 表 1 验证所需的文件资料及存放处 资料名称编号存放处 将验证所需的计量器具清单及校正情况记录于附件 2 4 1 24 1 2验证所需的试验条件验证所需的试验条件 列出验证所需的试验条件见附件 3 包括 1 容积为 30L 不锈钢容器和 304L 喷雾薰蒸管道一套 2 不锈钢培养皿 10 个 3 90 双蝶玻璃培养皿 10 个 4 枯草杆菌试纸 2 10 张 10 个培养皿 每张试药枯草杆菌数量为 1 106个 每个培养皿中 二张试药 一张做无菌试验 一张做含菌 数试验 5 通风干湿球温度计一个 6 自记式温湿度记录仪一台 7 浓度为 40 的甲醛 kg 8 浓度为 25 28 氨水 kg 编 号 版本号 洁净厂房甲醛熏蒸消毒验证方案 共 19 页 第 4 页 4 24 2 验证步骤验证步骤 甲醛熏蒸消毒验证方案的验证步骤包括洁净厂房生物负荷测试和细菌挑战 性试验样品的准备 熏蒸消毒 熏蒸消毒效果测试 微生物检测及空气中甲醛 残留量的检测 4 2 1熏蒸消毒前的准备熏蒸消毒前的准备 4 2 1 1 洁净厂房的清洁洁净厂房的清洁 熏蒸消毒前 将厂房内物料转移或密封 按标准操作程序进行清洁 清洁 及检查记录见附件 4 4 2 1 2 厂房内表面生物负荷的测试厂房内表面生物负荷的测试 对洁净厂房内的各种表面进行取样 检测消毒前的生物负荷 1 取样点 应分别包括设备 操作台 墙壁 地面等的开放表面与死角 缝隙处 2 取样方法 用事先经无菌缓冲液湿润的无菌纱布或脱脂棉充分擦拭 3 取样面积 25cm2 4 检测方法 将取样后的纱布或脱脂棉放入广口瓶中 加一定量的浸出 液充分振摇 按微生物检查法进行检测 同时做阳性对照和空白对照 厂房内表面生物负荷测试结果见附件 5 4 2 1 3 生物指示剂挑战性试验准备生物指示剂挑战性试验准备 1 生物指示剂菌种 枯草芽孢杆菌 使用前应检测初期菌数 应不少于 106个 2 准备方法 将装有生物指示剂的表皿放置于个被测房间的不同位置 每房间视面积大小分别放置 3 5 组 每组 3 只 分别用于不同消毒时 间的检测 消毒前打开表皿 生物指示剂放置位置见附件 6 4 2 2熏蒸消毒熏蒸消毒 4 2 2 1 单个房间的熏蒸消毒操作方法 单个房间的熏蒸消毒操作方法 1 薰蒸消毒前对自记式温湿度记录仪装上新记录纸 并用通风干湿球温 编 号 版本号 洁净厂房甲醛熏蒸消毒验证方案 共 19 页 第 5 页 度计进行校准然后将自记式温湿度记录仪放入无菌室 2 关闭洁净室与外界联系的全部门和传递窗 并确认洁净室调配室人员 全部撤离 3 停止供应冷冻水 夏季及过渡季 或开启加热器蒸汽阀加热 冬季或 过渡季 让无菌室内自然或人为的升温并调节无菌室内温度至 30 以上 4 开启机房内抽风机 由戴有防毒面具的操作人员加放到甲醛液体到机 房内甲醛容器中 甲醛的使用量按洁净区待消毒区域的空间容积 按 9g m3称量甲醛 37 40 按 3g m3称量高锰酸钾 置电加热器 或甲醛气体发生器 中 5 将房间密闭 停止空调器运转 6 启动电加热器 或甲醛气体发生器 开始加热 使甲醛气体扩散 约 30 分钟 7 启动空调器 使甲醛气体循环 约 20 分钟 8 关闭空调器 对房间进行熏蒸消毒 熏蒸试验时间分别为 6 8 12h 9 启动空调器 用新鲜空气置换室内空气 换气时间分别设为 2 3 4h 4 2 2 2 整个区域的熏蒸消毒整个区域的熏蒸消毒 1 计算洁净区待消毒区域的空间容积 按 9g m3称量甲醛 37 40 按 3g m3称量高锰酸钾 置电加热器 或甲醛气体发生器 中 2 将需要消毒的区域密闭 3 将电加热器 或甲醛气体发生器 中放置在空调系统新风入口处 启 动空调器和电加热器 或甲醛气体发生器 开始加热 使甲醛气体扩 散 约 30 分钟 4 使甲醛气体循环 约 20 分钟 5 关闭空调器 对房间进行熏蒸消毒 熏蒸试验时间分别为 8 10 12 小时 6 启动空调器 用新鲜空气置换室内空气 换气时间分别设为 2 3 4 编 号 版本号 洁净厂房甲醛熏蒸消毒验证方案 共 19 页 第 6 页 小时 熏蒸消毒记录见附件 7 4 2 3消毒效果确认消毒效果确认 在熏蒸时间分别达 8 10 12 小时时 取样检测 对消毒效果进行确认 4 2 3 1 生物指示剂挑战性试验生物指示剂挑战性试验 在达到设定的熏蒸消毒时间 8 10 12 小时 分别在预先放置在房间 中的装有生物指示剂的各组表皿中 每组收回 1 只 将收回的生物指示剂放入 增菌液中 在 37 培养 3 天 检查是否有细菌生长 生物指示剂挑战性试验结果记录于附件 6 4 2 3 2 表面微生物测试表面微生物测试 在达到设定的熏蒸消毒时间 8 10 12 小时 分别对洁净厂房内的各 种表面进行取样 培养 同时做阳性对照与空白对照 检测是否有微生物生长 1 取样点 应分别包括设备 操作台 墙壁 地面等的开放表面与死角 缝隙处 但不应在消毒前进行表面生物负荷测试的取样点重复取样 2 取样方法 用事先经无菌生理盐水或缓冲液湿润的无菌纱布或脱脂棉 充分擦拭 3 取样面积 25cm2 4 检测方法 将取样后的纱布或脱脂棉放入广口瓶中 加一定量的浸出 液充分振摇 按微生物检查法进行检测 同时做阳性对照和空白对照 消毒后表面微生物测试结果记录于附件 8 4 2 4换气后室内环境中甲醛残留量的测试换气后室内环境中甲醛残留量的测试 在达到设定的换气时间 2 3 4 小时 时 收集室内空气样品 检测空 气中甲醛的残留量 1 取样量 30 升 取样点 2 取样方法 在需要取样的洁净室内 用容积为 30 升左右的塑料袋收集 室内空气 将袋口扎紧备用 3 供试液的制备 编 号 版本号 洁净厂房甲醛熏蒸消毒验证方案 共 19 页 第 7 页 用 0 5 硼酸溶液 20ml 做吸收液用泵将采集的空气样品以 1 升 分钟的速度 通过吸收液 10 分钟 将吸收液转移至 25 0ml 的容量瓶中 加蒸馏水至 刻度 摇匀即得 4 甲醛稀释液 精取中国药典 甲醛溶液 1ml 准确加水至 200ml 得 甲醛稀释液 精取该稀释液 10ml 至碘量瓶中 准确加 0 1mol L 碘液 50ml 再加 1mol L 氢氧化钾溶液 20ml 避光放置 15 分钟后 加 10 硫酸 15ml 用 0 1mol L 硫代硫酸钠溶液滴定 另用 10ml 蒸馏水进行 空白对照 甲醛稀释液中甲醛浓度 mg ml VVf BA 15013 10 式中 VA 甲醛稀释液消耗 0 1mol L 硫代硫酸钠的量 ml VB 空白对照消耗 0 1mol L 硫代硫酸钠的量 ml 1 5013 1ml 碘液 0 1mol L 相对甲醛的量 mg 10 甲醛稀释液取样量 ml 5 甲醛标准液 精取甲醛稀释液 加水准确稀释 1000 倍 即得 ug ml 6 AHMT 溶液 取 4 氨基 3 肼 5 巯基 1 2 4 三唑 0 5g 加 0 2mol L 盐酸 100ml 溶解 避光保存 7 检验 取供试液 2 0ml 至具塞试管中 加 5M 氢氧化钠溶液 2 0ml 及 AHMT 溶液 2 0ml 混匀后 室温放置 20 分钟 加高碘酸钾溶液 2 0ml 摇 2 5 分 钟至无气泡产生 同时用蒸馏水 2 0ml 同法制成对照液 在 550nm 测 最大吸光度 分别取甲醛标准液 0 0 5 1 0 1 5 2 0ml 加水使成 2 0ml 然后按 6 4 1 项下操作 测定吸光度 绘制甲醛浓度 ug ml 与吸光度的关系 曲线 8 计算 编 号 版本号 洁净厂房甲醛熏蒸消毒验证方案 共 19 页 第 8 页 甲醛浓度 ppma V t 224 3003 25 1 273 273 式中 a 供试液中甲醛浓度 ug ml V 气体样品用量 升 t 采样时的平均温度 22 4 1mol 气体在 0 1 个大气压下的体积 升 30 03 甲醛分子量 25 供试液全量 ml 可接受标准 空气中甲醛浓度应不超过 0 5ppm 试验结果及评价记录于附件 9 4 3 拟订再验证周期 起草洁净厂房甲醛熏蒸消毒程序拟订再验证周期 起草洁净厂房甲醛熏蒸消毒程序 工程部负责根据验证结果拟订验证周期 附件 10 起草洁净厂房甲醛熏 蒸消毒程序 4 44 4 验证结果评定与结论验证结果评定与结论 工程部负责收集各项验证 试验结果及评价记录 洁净厂房甲醛熏蒸消毒 程序 报验证委员会 验证委员会负责对验证结果进行综合评审 做出验证结论 发放验证证书 附件 11 确认检验方法的验证周期 对验证结果的评审应包括 1 验证试验是否有遗漏 2 验证实施过程中对验证方案有无修改 修改原因 依据以及是否 经过批准 3 验证记录是否完整 4 验证试验结果是否符合标准要求 偏差及对偏差的说明是否合理 是否需要进一步补充试验 5 附件附件 编 号 版本号 洁净厂房甲醛熏蒸消毒验证方案 共 19 页 第 9 页 附件 4 验证所需仪器 仪表 量具验证所需仪器 仪表 量具 清单及校正情况清单及校正情况 名称 规格 型号 系列号 校正 结果 校正证书 编号 校 正 有效期 确认 工程部经理 年 月 日 验证委员会 年 月 日 编 号 版本号 洁净厂房甲醛熏蒸消毒验证方案 共 19 页 第 10 页 附件 3 验证所需试验条件验证所需试验条件 验证对象 检测对象 名称规格数量准备方法 试 验 条 件 确认 质量部经理 年 月 日 验证委员会 年 月 日 编 号 版本号 洁净厂房甲醛熏蒸消毒验证方案 共 19 页 第 11 页 附件 4 熏蒸消毒前熏蒸消毒前 工作间清洁及检查记录工作间清洁及检查记录 工作间 编号 工作间 名称 清洁 步骤 操作者 复核者 年 月 日 生 产 部 检查结果 车间主任 年 月 日 质 量 部 检查结果 质量部经理 年 月 日 工 程 部 检查结果 工程部经理 年 月 日 确认 验证委员会 年 月 日 编 号 版本号 洁净厂房甲醛熏蒸消毒验证方案 共 19 页 第 12 页 编 号 版本号 洁净厂房甲醛熏蒸消毒验证方案 共 19 页 第 13 页 附件 5 消毒前表面负荷试验消毒前表面负荷试验 取样点及检测结果取样点及检测结果 工作间 编号 工作间 名称 取样点编号取样点位置检测结果备 注 检测 结果 评价 检测者 复核者 年 月 日 确认 质量部经理 年 月 日 验证委员会 年 月 日 编 号 版本号 洁净厂房甲醛熏蒸消毒验证方案 共 19 页 第 14 页 附件 6 生物指示剂挑战性试验生物指示剂挑战性试验 检测结果检测结果 工作间 编号 工作间 名称 熏蒸时间取样点编号取样点位置检测结果 检测 结果 评价 检测者 复核者 年 月 日 确认 质量部经理 年 月 日 验证委员会 年 月 日 编 号 版本号 洁净厂房甲醛熏蒸消毒验证方案 共 19 页 第 15 页 附件 7 甲醛熏蒸消毒记录甲醛熏蒸消毒记录 熏蒸消毒区域 工作间编号工作间名称 空间容积 测算者 复核者 年 月 日 37 40 甲醛 用量 ml 计算 复核 高锰酸钾 用量 g 称量 复核 加热开始时间加热结束时间 空调器运转开始时间空调器运转结束时间 密闭熏蒸开始时间密闭熏蒸结束时间 第一次取样时间第二次取样时间第三次取样时间 消毒效 果确认 通风换气开始时间通风换气结束时间 第一次取样时间第二次取样时间第三次取样时间 甲醛残留量 检 测 操作 说明 检测者 复核者 年 月 日 确认 质量部经理 年 月 日 验证委员会 年 月 日 编 号 版本号 洁净厂房甲醛熏蒸消毒验证方案 共 19 页 第 16 页 附件 8 消毒后表面微生物测试消毒后表面微生物测试 取样点及检测结果取样点及检测结果 工作间 编号 工作间 名称 熏蒸时间取样点编号取样点位置检测结果 检测 结果 评价 检测